Name: コーダル静脈グルコース注射によるパラバイオティクスマウスにおける共有血液供給の検出 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-06T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 27 s
Description: 学ぶパラバイオティクスマウスの共有血液供給検出法。C57BL/6雄マウスの尾静脈にグルコースを注射し、血糖値変動でキメリズムを非侵襲的に確認する安全で信頼性の高い手法です。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この研究は、中国国家自然科学財団(81570399および81773735)、中国の国家主要研究開発プログラム-伝統的な中国医学近代化研究プロジェクト(2017YFC1702003)、および平龍江によって支援されました優れた青少年科学基金(JC2017020)。

動物とそのケアに関するすべての手順は、ハルビン医科大学の機関動物ケアおよび使用委員会によって承認されました.
注: この方法に必要な工具および装置は、材料表にリストされています。
1. 素材・動物の製造
<ol><li>標準的な実験動物の供給業者からの20 g-25 g間の重量のC57BL/6雄のマウスを注文する。</li>
	<li>マウスを12時間の光のサイクルに収容する:水と食物へのアドリビタムアクセスで24-26°Cで12時間の暗闇。</li>
</ol>2. パラビオシス
<ol><li>0.1 mL/10 gの濃度で20g/L 2,2,2-トリブロモエタノールの腹腔内注射によってマウスを麻酔する。筋肉弛緩、ゆっくりと安定した呼吸、皮膚刺激反射の喪失、角膜反射の消失によって示される適切な麻酔法を確認する。</li>
	<li>眼の軟膏をQチップで塗布し、目が乾くのを防ぎます。</li>
	<li>前述の5に従ってパラビオシス手順を実行します。<ol>
<li>マウスを上向きの位置に置きます。片方のマウスの左側ともう一方のマウスの右側を肘の上約1cmから膝より1cm下に電気かけで剃ります。脱毛クリームを使用して、剃った皮膚の毛皮を完全にクリアします。</li>
		<li>ヨードファーでかき部分を拭きます。無菌パッドで覆われた加熱パッドの上にマウスを置きます。</li>
		<li>肘の上0.5cmから膝関節の下0.5cmまで、各動物の剃った側に鋭いはさみを使用して縦皮切開を作成します。</li>
		<li>切開後に皮下筋膜から皮膚をそっと取り外す。</li>
		<li>3-0縫合糸でパラバイオレントのオレクラノンと膝を接続します。</li>
		<li>連続5-0縫合糸で剃った皮を縫合する。</li>
	</ol>
</li>
	<li>脱水を防ぐために、各マウスに0.9%NaClを皮下に0.5mL注入します。</li>
	<li>痛みを和らげるために、各マウスにトラマドール(10mg /25 g/日)を筋肉内に注入する。</li>
</ol>3. 循環キメラリズムの検証
<ol><li>グルコース変動方法 注:パラバイオシス手術後10日目にグルコース変動法(断食なし)を用いて、パラバイオント間の循環キメラリズムの構築が成功したことを確認します。<ol>
<li>20g/L2,2,2-トリブロモエタノールを濃度0.1mL/10gで各マウスに腹腔内注射することにより、パラバイオントを麻酔する。</li>
		<li>ドナーマウスを静脈ビジュアルマウス尾フィクサーで固定します。</li>
		<li>70〜75%のアルコールに浸した綿のボールで、パラバイオントの尾の脇腹に尾静脈をこすり、尾をきれいにし、血管を拡張します。</li>
		<li>右手にブドウ糖を含む1.0 mLの注射器を持ち、針を静脈に平行に保ちます(15°未満)。</li>
		<li>尾端から約2~4cmの位置に針を挿入します。</li>
		<li>100 μLのグルコース(1.2g/kg)を10秒以内にドナーに注入します。 注:ドナーという用語は、尾静脈を介してグルコース注射を受けるパラバイオレントを指す。レシピエントは他のパラバイオレントで、グルコースを直接受け取りません。</li>
		<li>ヨードファーでつま先をきれいにします。ドナーマウスとレシピエントマウスのつま先をハサミで切り取り、グルコースの注射後に異なる時点(1分、5分、10分、15分、20分、30分、40分、50分、60分)で血液の滴を採取する。より多くの損傷を避けるために、各収集時点で血栓を取り除く。 注:採取された血液の量は、1回の検査で10〜25ul、合計で90〜225ulであった。</li>
		<li>グルコースレベル検出のためのグルコメーターテストストリップの中心に血液を滴下.</li>
	</ol>
</li>
	<li>エバンの青いカウンターステインをポジティブコントロールとして使う3.<ol>
<li>0.5%のエヴァンの青いカウンターステインを腹腔内の200 μLをドナーマウスに注入します。</li>
		<li>2時間後、20g/L2,2-トリブロモエタノールを各マウスに0.2mL/10gの濃度で腹腔内注射してパラバイオイントを安楽死させ、心臓穿刺により両方のパラバイオレントから血液を採取する。</li>
		<li>血液サンプルを916 x gで15分間遠心分離する。</li>
		<li>上清から血清を集める。</li>
		<li>血清を0.9%NaClで1:50に希釈します。</li>
		<li>分光光度計で620nmで希釈した血清サンプルの吸光度を測定します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Baruch, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging-induced+type+I+interferon+response+at+the+choroid+plexus+negatively+affects+brain+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Aging-induced type I interferon response at the choroid plexus negatively affects brain function.</a> Science. 346 (6205), 89-93 (2014).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positional+cloning+of+the+mouse+obese+gene+and+its+human+homologue%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue.</a> Nature. 372 (6505), 425-432 (1994).</li>
<li>Torres, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parabiotic+model+for+differentiating+local+and+systemic+effects+of+continuous+and+intermittent+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Parabiotic model for differentiating local and systemic effects of continuous and intermittent hypoxia.</a> Journal of Applied Physiology (1985). 118 (1), 42-47 (2015).</li>
<li>Loffredo, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+differentiation+factor+11+is+a+circulating+factor+that+reverses+age-related+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Growth differentiation factor 11 is a circulating factor that reverses age-related cardiac hypertrophy.</a> Cell. 153 (4), 828-839 (2013).</li>
<li>Kamran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parabiosis+in+mice%3A+a+detailed+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Parabiosis in mice: a detailed protocol.</a> Journal of Visualized Experiments. (80), e50556(2013).</li>
<li>Conboy, M. J., Conboy, I. M., Rando, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterochronic+parabiosis%3A+historical+perspective+and+methodological+considerations+for+studies+of+aging+and+longevity%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Heterochronic parabiosis: historical perspective and methodological considerations for studies of aging and longevity.</a> Aging Cell. 12 (3), 525-530 (2013).</li>
<li>Eggel, A., Wyss-Coray, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+revival+of+parabiosis+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Swiss+Medical+Weekly%22%5BJournal%5D)">A revival of parabiosis in biomedical research.</a> Swiss Medical Weekly. 144, w13914(2014).</li>
<li>Brack, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ageing+of+the+heart+reversed+by+youthful+systemic+factors%21%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">Ageing of the heart reversed by youthful systemic factors!</a> EMBO Journal. 32 (16), 2189-2190 (2013).</li>
<li>Wu, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+cells+contribute+to+cardiomyocyte+regeneration+after+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Circulating cells contribute to cardiomyocyte regeneration after injury.</a> Circulation Research. 116 (4), 633-641 (2015).</li>
<li>Kaiser, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27Rejuvenation+factor%27+in+blood+turns+back+the+clock+in+old+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">'Rejuvenation factor' in blood turns back the clock in old mice.</a> Science. 344 (6184), 570-571 (2014).</li>
<li>Rando, T. A., Finkel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+aging+and+rejuvenation--a+sense+of+humors%3F%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cardiac aging and rejuvenation--a sense of humors?</a> New England Journal of Medicine. 369 (6), 575-576 (2013).</li>
<li>Heidt, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+of+monocytes+to+heart+macrophages+in+steady-state+and+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Differential contribution of monocytes to heart macrophages in steady-state and after myocardial infarction.</a> Circulation Research. 115 (2), 284-295 (2014).</li>
<li>McPherron, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Through+thick+and+thin%3A+a+circulating+growth+factor+inhibits+age-related+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Through thick and thin: a circulating growth factor inhibits age-related cardiac hypertrophy.</a> Circulation Research. 113 (5), 487-491 (2013).</li>
<li>Villeda, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Young+blood+reverses+age-related+impairments+in+cognitive+function+and+synaptic+plasticity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Young blood reverses age-related impairments in cognitive function and synaptic plasticity in mice.</a> Nature Medicine. 20 (6), 659-663 (2014).</li>
<li>Katsimpardi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+and+neurogenic+rejuvenation+of+the+aging+mouse+brain+by+young+systemic+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Vascular and neurogenic rejuvenation of the aging mouse brain by young systemic factors.</a> Science. 344 (6184), 630-634 (2014).</li>
<li>Starzl, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lost+chord%3A+microchimerism+and+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+Today%22%5BJournal%5D)">The lost chord: microchimerism and allograft survival.</a> Immunology Today. 17 (12), 577-584 (1996).</li>
<li>Coleman, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+historical+perspective+on+leptin%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">A historical perspective on leptin.</a> Nature Medicine. 16 (10), 1097-1099 (2010).</li>
<li>Salpeter, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+regulation+of+the+age-related+decline+of+pancreatic+beta-cell+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Systemic regulation of the age-related decline of pancreatic beta-cell replication.</a> Diabetes. 62 (8), 2843-2848 (2013).</li>
<li>Sheldon, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gestational+exercise+protects+adult+male+offspring+from+high-fat+diet-induced+hepatic+steatosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Gestational exercise protects adult male offspring from high-fat diet-induced hepatic steatosis.</a> Journal of Hepatology. 64 (1), 171-178 (2016).</li>
<li>Martineau, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+profile+of+intrahepatic+cholestasis+of+pregnancy+is+associated+with+impaired+glucose+tolerance%2C+dyslipidemia%2C+and+increased+fetal+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">The metabolic profile of intrahepatic cholestasis of pregnancy is associated with impaired glucose tolerance, dyslipidemia, and increased fetal growth.</a> Diabetes Care. 38 (2), 243-248 (2015).</li>
<li>Wang, F., Liu, Y., Yuan, J., Yang, W., Mo, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+C+Protects+Mice+from+HFD-Induced+Obesity+and+Nonalcoholic+Fatty+Liver+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Compound C Protects Mice from HFD-Induced Obesity and Nonalcoholic Fatty Liver Disease.</a> International Journal of Endocrinology. 2019, 3206587(2019).</li>
</ol>

著者たちは開示するものは何もない。

パラバイオシスは、実験手段6、7、8によって共通の血管系を確立するために2匹の生きている動物を接続する外科的技術を指す。このモデルの利点は、単一の個人によって生成された物質が同時に両方の動物に作用することができるということです。したがって、パラビオシスモデルは、関連疾患における物質または因子の役割を探求するために使用することができ、多くの有意義で革新的な結論を生み出す。その大きな適用価値の観点から、モデルは、心血管系疾患8、9、10、11、12、13、神経系障害...

パラビオシスは、2つの生物が外科的に結合し、共有循環系1を有する単一の生理システムとして発達するモデリング方法である。このようなモデルは、単一の個人によって産生される物質が共有循環系を介して両方の動物に同時に作用できるという利点のために生理学を研究するために広く使用されている。1800年代半ば以来、パラバイオティクス実験がPaul Bert2によって開拓された、パラバイオティクスモデルを構築するための方法が標準化されています。しかし、血液キメラリズムの確立が成功したことを確認するための簡単で便利な方法は欠けています。クロス循環は、腹腔内注射で0.5%のエバンスブルー染料を1つのパラバイオエントに注入し、続いてマイクロプレートリーダーを用いた両方のパラバイオレントの血液中のエバンスブルーの吸光度の測定によって正常に評価できることが報告されている。別の方法は、各パラバイオレントにCD45.1+ -とCD45.2+- 標識単球を含む特定のマウス品種を必要とします。細胞サイトメトリーは、次に脾臓または血液4から単球中の2つのマーカーの頻度を測定することによって血液キメラリズムを決定するために使用される。しかし、これらの方法は、動物に対して致死的または面倒であることが多く、かつ、パラバイオティクスモデルの迅速かつ確実な検証のための安全で簡単な方法が非常に望ましい。本研究では、パラビオシスのマウスモデルで検証された新しい方法を確立しました。尾静脈から採取した血液サンプル中のグルコース濃度はグルコメーターを用いて測定され、ドナーマウスとレシピエントマウスにおけるグルコースレベルの変化のパターンは循環キメラリズムの指標と考えられる。この方法を「グルコース変動法」と名付けた。この検証方法の適用は、マウスに限らず、グルコース代謝の深刻な調節不変を有するものを除いて、多様な病理学的モデルに拡張することができる。手順は簡単で、時間を節約し、安全です。

<table><tbody><tr><td>湾曲鉗子</td><td>JZ手術器具、中国</td><td>J31340</td><td></td></tr><tr><td>細かいはさみ</td><td>JZ手術器具、中国</td><td>WA1030</td><td></td></tr><tr><td>針鉗子</td><td>JZ手術器具、中国</td><td>60017961</td><td></td></tr><tr><td>2.5 mL注射器</td><td>Agilent、米国</td><td>5182-9642</td><td></td></tr><tr><td>Tribromoethano</td><td>Sigma-Aldrich、米国</td><td>T48402-5G</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン</td><td>Solarbio、中国</td><td>IP0150</td><td></td></tr><tr><td>トラマドール</td><td>Yijishiye、中国</td><td>YJT712520</td><td></td></tr><tr><td>血糖値計</td><td>ロシュ糖尿病ケア、インディアナ</td><td>Accu-Chekアクティブテストストリップエ</td><td></td></tr><tr><td>ヴァンの青いカウンターステイン</td><td>Solarbio、中国</td><td>G1810</td><td></td></tr><tr><td>脱毛クリーム</td><td>ナイール、アメリカ</td><td>LL9161</td><td></td></tr><tr><td>温暖毛布(加熱パッド)</td><td>ケントサイエンティフィックコーポレーション、米国</td><td>TP-22G</td><td></td></tr><tr><td>電気シェー</td><td>バーCodos、中国</td><td>CP-5000</td><td></td></tr><tr><td>3-0,5-0 外科用縫合</td><td>糸上海医療縫合針工場、中国</td><td>SYZ 3-0#、SYZ 5-0#</td><td></td></tr></tbody></table>

コーダル静脈グルコース注射によるパラバイオティクスマウスにおける共有血液供給の検出

Detecting Establishment of Shared Blood Supply in Parabiotic Mice by Caudal Vein Glucose Injection

パラビオシスは、身体の縦軸に沿って2つの平行動物を外科的に結合するための実験的方法である。我々は、グルコースの尾静脈注射によってパラバイオントにおける血液キメラリズムの確立を成功させるためのプロトコルを提示する。パラバイオティクスマウスを構築した。グルコースは、尾静脈を介してドナーマウスに注入され、そして、血糖量の変動を異なる時点で血液グルコメーターを用いて両マウスで測定した。我々の結果は、グルコース注射後、ドナーマウスの血糖値が1分後に急激に増加し、その後ゆっくりと減少することを示した。一方、レシピエントマウスの血糖値は、注射後15分にピークを迎えた。同様の結果は、グルコースの陽性対照として使用されるエバンスブルーで得られた。血糖レベルの同期変動は、2つのマウス間の血流が正常に確立されたことを示す。

ドナーマウス6匹では、血糖濃度が100μLのブドウ糖(1.2g/kg)を尾静脈に注射した後、平均1分で26.5μmol/L(173%増加)に急上昇し、60分で13.3μmol/Lに徐々に低下した。レシピエントマウスでは、注射後に血糖値がゆっくりと上昇し、15分で最初のピークレベルに達した(47%増加、12.2μmol/L)。上記の結果に基づいて、循環キメラ症の標準は次のように設定した:1)グルコース注入後1分以内のドナーマウスにおける血糖値の急激な上昇(最低100%増加または20μmol/L)、及び2)注射後15分のレシピエントマウスにおける血糖値の有意な増加(最小37%増加)(図1)。
また、パラバイオントの血清中のエバンス青色素の濃度は、循環キメラリズムの構築に成功したことを示した(図2)。血中グルコース測定後のパラビオを安楽死さ...

ここでは、グルコースの尾静脈注射を通じて2つのパラバイオリンの共有血液循環の確立を成功させたことを検出する新しい方法について説明します。

Parabiosis is an experimental method for surgically combining two parallel animals along the longitudinal axis of the body. We present a protocol for ...

当社のプロトコルは、循環キメラリズムの改善された検証方法と、生物医学研究のためのパラバイオシスモデル設定を成功させるための方法を提供します。多くの場合、致死的または面倒であるパラバイオシスにおける血液キメラリズムの検出のための既存の方法と比較して、私たちのプロトコルは安全で簡単であり、迅速かつ信頼性の高い検証を可能にします。この方法は、パラバイオシスモデルにおける血液キメラリズムの検出に特異的であるが、パラバイオティクス処置を含むあらゆる生物医学的研究に適用することができる。最も困難なステップは、グルコース注入です。したがって、実験手順を行う前に尾静脈注射を練習するか、静脈視覚的マウス尾部固定剤を使用してください。ペダル反射に対する応答の欠如を確認した後、20〜25グラムの麻酔付きC57黒6雄マウスをスピービン位置に置き、電気剃りを使用して1匹のマウスの左側と2番目のマウスの右側を肘の上約1センチメートルから膝の下1センチメートルまで徹底的に剃ります。肘の上0.5センチメートルから膝関節の下0.5センチメートルまで、各動物のクリアされた皮膚に縦方向の皮膚切開を行う前に脱毛クリームで残りの毛髪を取り除き、皮下筋膜から皮膚をそっと剥離します。パラビオントのオレクラノンと膝を3-0縫合で接続し、剃った皮膚を5-0縫合で縫合する。その後、皮下に0.5ミリリットルの0.9%塩化ナトリウムを注入して脱水症状を防ぎ、筋肉内にマウス25グラムあたり10ミリグラムのトラマドールを注入して痛みを和らげ、1日あたり1匹ずつ3日間注射する。グルコース変動によるパラバイオント間のキメラリズム間の循環の正常な構築を検証するために、パラバイオシス手術後10日目に、ドナーマウスを静脈視覚マウス尾固定器に固定し、70〜75%エタノール浸し綿球を使用して、1つのパラバイオント尾部の側面で尾静脈をこすります。尾端から2〜4センチメートル、可能な限り静脈に平行な尾静脈に1ミリリットルの注射針を挿入し、100マイクロリットルの生理食塩水中のグルコース1キログラム当たり1〜2グラムを10秒間ドナーに注入する。次に、注射後の様々な時点での血液の滴を可能にするために、ドナーおよびレシピエント動物からつま先を取り除くためにはさみを使用する。次に、各血液サンプルの滴をグルコメータテストストリップの中央に加え、グルコースレベル検出を行います。エバンスブルー色素吸光度による循環の成功した構築を確認するには、0.5%のエバンスブルーカウンターステインの200マイクロリットルをドナーマウスに腹腔内に注入し、2時間後に心臓穿刺によって両方のパラバイオントから血液を採取する。遠心分離によって血清を分離し、0.9%の塩化ナトリウムで1〜50比で希釈するために円錐形チューブに血清を移す。次に、分光光度計で620ナノメートルで希釈した血清サンプルの吸光度を測定します。6匹のドナーマウスにおける血糖値のこの代表的な分析では、血糖値は、尾静脈を通して100マイクロリットルのグルコースを注入した後、平均1分で1リットル当たり26.5マイクロモルに急激に増加した。血糖値は、その後、徐々に60分でリットル当たり13.3マイクロリットルに減少しました。レシピエントマウスでは、注入後に血糖値が徐々に増加し、15分で最初のピークレベルに達した。パラバイオエントの血清中のエバンスブルー染料の濃度はまた、循環キメラリズムの構築に成功したことを示し、パラバイオント間の皮下血管接合部は明確に観察することができた。パラバイオシス手術の15日後に血中キメリズムを確立しなかったパラバイオエントでは、レシピエントマウスは、ドナー動物へのグルコース注入後60分以内に血糖値の上昇を示さなかった。2人のレシピエントにおけるエバンスブルーの血中濃度も上昇しておらず、グルコース変動法がエバンスブルー法と同じくらい敏感であることを実証した。さらに、血中インスリン濃度は、グルコースレベルの急速な増加によりグルコース注射の1時間後に著しく低下し、3時間の正常レベルまで回復し、インスリン代謝に対する注入されたグルコースの効果が回復可能であることを示している。針が尾静脈に直接挿入されていることを確認するように注意してください。この方法によりパラバイオントの血中キメラリズムを確認した後、生理病理学的変化を生きたパラバイオティクス動物で研究することができる。

detecting-establishment-shared-blood-supply-parabiotic-mice-caudal

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

2つの生物の結合並体結合は、共有循環系の開発につながる。このプロトコルでは、野生型マウスと恒常的GFP発現マウスとの間の並体結合接続を形成するための手術ステップを記載している。...

マウスの並体結合：詳細なプロトコル

インスリン依存性血管拡張筋の血流を調節するなり、微小血管表面積 (微小血管募集)...

インスリン依存性血管拡張や筋肉の血流を研究する生体顕微鏡観察とマウスの後肢の造影超音波検査

現在の記事では、生成および食事療法誘導されたインシュリン抵抗性および肥満のモデルとして高脂肪食飼育マウスの代謝特性について説明します。さらに、経口ブドウ糖負荷試験、インスリン負荷試験、グルコース代謝体内の全身の変化の監視を実行する詳細なプロトコルを備えています。...

経口ブドウ糖負荷試験 (OGTT) とインスリン負荷試験 (ITT) を使用して高脂肪食飼育マウスの生体内糖代謝の研究

本研究では、多嚢胞性卵巣症候群マウスモデルにおける肝グルコース産生の直接測定を、タンデムにおける空腹時およびグルコースが豊富な状態の両方で尾静脈 を介して...

多嚢胞性卵巣症候群マウスモデルにおける肝グルコース産生の評価

ここでは、患者向けに設計された市販の連続血糖モニターをマウスに移植する簡単な方法を説明し、結果を分析するためのスクリプトを提供します。...

自由に動くマウスにおける簡単な連続グルコースモニタリング

このプロトコルは、非肥満糖尿病(NOD)重症複合免疫不全マウスにNIT-1細胞を移植およびイメージングするための簡単で低侵襲な方法を説明しています。...

マウスにおける自己免疫性糖尿病の養子移植モデルにおける移植片生存の生物発光モニタリング

高血糖クランプは、より高い血糖濃度を維持してインスリン放出を測定するために使用されます。血糖降下クランプは、逆調節反応によって誘発されるグルコース産生を測定するためのものです。どちらの方法も同じ外科的処置を使用します。ここでは、全身のグルコース代謝を評価するためのクランプ技術を紹介します。...

意識のあるマウスにおける高血糖クランプと低血糖クランプ

このプロトコルでは、マウスモデルのGC-MSを使用してBAT最適化された動静脈メタボロミクスに関連する方法が概説されています。これらの方法により、生物レベルでのBATを介した代謝物交換に関する貴重な洞察を得ることができます。...

褐色脂肪組織における 生体内 代謝物交換を測定する動静脈メタボロミクス

ここでは、ICSIに起因する可能性のあるグルコース代謝の加齢に伴う変化を観察できるように、細胞質内精子注入(ICSI)-胚移植(ET)マウスを確立するためのプロトコルを提示します。...

細胞質内精子注入後のマウス仔の血糖値のモニタリング

このプロトコルは、マウスから門脈と下大静脈から血液を順番に採取して、腸内微生物代謝産物の産生と吸収を評価する方法を示しています。...

マウスの腸内微生物代謝物を評価するための下大静脈からの逐次採血とそれに続く門脈

ここでは、交絡因子の可能性を減らしながら内分泌膵臓機能を評価するための追加技術として、無傷の膵臓を持つマウス血管系を通る灌流を介してグルコース刺激インスリン分泌 (GSIS)...

無傷の膵臓を持つマウス血管系を介した灌流によるグルコース刺激インスリン分泌

学ぶパラバイオティクスマウスの共有血液供給検出法。C57BL/6雄マウスの尾静脈にグルコースを注射し、血糖値変動でキメリズムを非侵襲的に確認する安全で信頼性の高い手法です。

コーダル静脈グルコース注射によるパラバイオティクスマウスにおける共有血液供給の検出

さらに動画を探す