2020年6月4日
この記事では、実験的な内リンパ性水力を誘導するために、モルモット内リンパ嚢を抹消し、細かいピックで内リンパ管を傷つけるための硬膜外アプローチを示しています。
この手順を用いて、内リンパ水性水たまりは、十分な成功率を有するモルモットにおいて比較的迅速に誘導することができる。この技術の主な利点は、内リンパ水力はCSFリークまたは後半規管への傷害のための最小限のリスクで誘導することができるということです。ペダル反射に対する応答の欠如を確認した後、麻酔モルモットの背面にラクチオンリンガー溶液の12ミリリットル皮下液ボーラスを注入し、モルモットを温かいパッドの上のスペイン位置に置きます。
27.5ゲージの蝶の針を腹腔内に置き、針先の中にのみ空気の存在を確認し、モルモットを起こしやすい位置に置きます。頭を定位ホルダに固定し、パルスオキシメーターを未顔足に固定します。直腸プローブと温かい毛布を使用して体温を摂氏38度に保ち、動物の目に軟膏を塗布します。
後ろにマスキングテープを置いて、オクシプットの上の皮膚に沿って十分な張力を与え、テープの端を立体性ホルダーに固定します。その後、オクシプットと後頸部の上に皮膚を3つの連続したヨウ素スクラブと70%アルコールで自由に準備し、動物の上に無菌ドレープを置きます。15番の刃を使って後部咬傷に沿って小さな正中線切開を行い、後部首まで伸びるように外科的処置を開始する。
皮膚の下に入ると、虹彩はさみを使って後頭部の骨から右後頸部筋肉を切り離し、無菌綿球からの圧力で出血を制御する。解剖顕微鏡と5-0吸引と無菌灌漑を備えた数3、2、および1ミリメートルのダイヤモンドバリの組み合わせを使用して、外部後頭紋まで横方向に境界付けられたクレーニクトミー、横方向にlambdoidal尾根、後頭突起縫合線を内側に行い、およびマグメンのマージンの周回を行う。そして、シグモイドのサイヌスを骨格化するために0.5ミリメートルのダイヤモンドバリを使用してください。
後頭部の骨を硬膜から分離しながら、小さな生理塩水湿った綿を骨の下にそっと置きます。慎重に正気の上に骨を取り除き、綿のボールを使用してシグモイドの正腸の内側を静かに引き込みます。シグモイドの大腸菌を慎重に引き込み、ペトロウス側頭骨内に位置するスリット状の構造としてオペルキュラムを特定する。
内リンパ性嚢の外因性部分は、オペルキュラムとシグモイド・サイヌスを覆う硬膜との間の明確な嚢様接続として視覚化することができる。Sigmoidの正気に穏やかな内側の引き込みを適用して、内リンパ嚢の外因性部分を明確に可視化し、嚢の外因性部分と内口部分の間の緊張を高める。細かい角度のピックを使用して、内リンパ嚢の中間部分を穏やかに取り除き、骨の内側に沿ってオペルキュラム内の細かいピックを広く削ります。
この手順の成功には、硬膜とオペルキュラムの間に目に見える接続が残っていないことが重要です。小さなキュレットを使用して側頭骨に沿って擦り付けて骨チップを得り、オペルキュラムに骨チップを寛大に詰め込みます。頭蓋骨に余分なワックスが外れ、骨ワックスを使用してクラニエクトミーの欠陥をカバーするように注意して骨ワックスでオペルキュラムを密封します。
次に、4-0の編組吸収性縫合糸を伴う後頸部筋肉を中断した方法で近似し、4-0の編組吸収性縫合糸を有する下切片閉鎖を使用して、単純な中断された縫合糸と表皮層で深層を近似することによって2層閉鎖を行う。この代表的な実験では、側頭骨の組織学的分析は、7匹のモルモットのうち6匹の左のコクレアと比較して、右の内耳痛全体の内リンパ水たまりを明らかにした。各ターンにわたるスカラメディアの断面積の定量化は、対照動物で観察されたものと比較して、内リンパ嚢の義務化後30日生存した動物の耳において、断面積が一般的に大きいことを示した。
内リンパ性ハイドロプスを持つ動物では聴覚神経重畳の波形閾値が増加し、低周波難聴の存在を示すが、8~20キロヘルツの間のほとんどの高周波人工内科化合物作用電位閾値は正常範囲内であった。硬膜とオペルキュラムの間の領域が嚢を取り除いた後に乾燥している場合は、シグモイドのサイヌスに追加の引き込み値を置いて、それとオペルキュラムの間に目に見える接続がないことを確認してください。この手順に従って、内リンパ水腫に関する重要な研究問題に対処するために、人工内耳の解剖学および生理学に関する追加の研究を行うことができる。
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本記事では、内リンパ嚢の閉塞と内リンパ管の損傷により、モルモットに内リンパ水腫を誘発する硬膜外アプローチについて解説します。この手法により、リスクを最小限に抑えつつ迅速に誘発することが可能となり、蝸牛機能に関連するその後の解剖学的および生理学的研究を促進します。
この外科的モデルは、モルモットにおいて内リンパ水腫を確実に誘導することを可能にし、メニエール病に関連する低音域聴力低下のメカニズムを研究するための前臨床システムを提供します。このアプローチは、測定可能な組織病理学的および機能的なエンドポイントを持つ疾患関連システムを提供することで、ターゲットの妥当性確認をサポートします。86%という高い成功率と、髄液漏出のリスクが最小限であることは、耳科学に特化した創薬パイプラインにおける翻訳バイオマーカーの探索およびメカニズムのリスク低減に対する予測信頼性を高めます。
この手法は、耳科学研究におけるターゲット検証およびアッセイ開発のための検証済み前臨床モデルとして探索ワークフローに組み込まれ、初期の仮説検証から前臨床での有効性評価への橋渡しをします。