2020年5月8日
ここに提示されたラットのうつ病のような行動とアンヘドニックな行動を研究するためのプロトコルです。これは、2つの確立された行動方法、スクロースの好みと新規性誘発性低phphagiaテストを組み合わせて、自動食品および液体摂取量監視システムを組み合わせて、代理パラメータを使用してげっ歯類の行動を間接的に調査します。
スクロースの好みとノベルティ誘発性低血圧検査は、アンヘドニアを評価するための確立された技術です。自動摂取監視システムとの組み合わせにより、高精度で詳細な分析が可能です。このプロトコルは、データ分析にこぼれを組み込んでハーディングを防止し、意図しない流体損失を低減することにより、エラーの発生率を低減します。
さらに、プロトコルは、取り入れ微細構造を評価することを可能にする。この技術は、げっ歯類のアンヘドニアを検出し、有効なテストの必要性を満たすことを目的としています。うつ病の増加の有病率を考慮する。
また、薬の抗うつ効果を研究するために使用することができます。.自動取り込み監視システムを使用する場合、正確なデータを提供するためには、日常的に適切に維持および洗浄する必要があることを覚えておくことが重要です。トレーニングを行うために、すべてのゲートを閉じて、マイクロバランスから食品容器と水筒を取り除きます。
ケージの上に計量済みの食品を置き、毎日その重量を文書化します。きれいな水のボトルに約100ミリリットルの水を入れ、ホッパーに戻します。2本目のボトルに100ミリリットルの新鮮な1%スクロース溶液を充填し、ホッパーの上に置きます。
ボトルにマークを付け、その場所を文書化してください。監視システムでのトレーニングの開始を文書化し、すべてのゲートを開きます。ゲートを24時間開いたままにして、両方のボトルにアドリビドーの最大を生み出します。
次に、トレーニングの終了を記録し、ゲートを閉じます。毎日新鮮なスクロース溶液を準備し、24時間ごとにボトルをきれいにし、補充してください。習慣を避けるためにボトルの位置を切り替える。
少なくとも48時間のトレーニングを実施します。テストを続行するだけです, スクロースの好みの比率は、ほぼ1に達したとき.試験の24時間前に、ラットが標準的なチャウと水のみにアクセスできるように、スクロース溶液でボトルを取り除きます。
テストの前に、水道水で満たされた1つの新鮮なボトルと1%スクロースで満たされた別のボトルを準備してください。すべてのゲートを閉じます。ホッパーから食品容器を取り出し、準備したボトルの水とスクロースに交換します。
次に、監視システムでテストの開始を文書化し、すべてのゲートを開きます。ゲートは60分間開いたままにしておきます。次に、テストの終了を文書化し、それらを閉じます。
トレーニング期間の準備をするには、すべてのゲートを閉じて、標準チャウでホッパーを取り外します。新鮮なホッパーに口当たりの良いスナックを入れ、クラッカーを慎重に挿入して崩れないようにします。次に、ホッパーをケージマウントのマイクロバランスの上に置きます。
監視システムでトレーニングの開始を文書化し、ラットがスナックと水に最大のアドリビタムを持っているように30分間ゲートを開きます。30分後、トレーニングの終了を記録し、ゲートを閉じます。その後、スナックを標準的なチャウに置き換えます。
味わい深いスナック摂取の安定したベースラインが達成され、トレーニング日によって統計的に異ならないまで、毎日トレーニングを繰り返します。テストを実施する準備ができたら、寝具や濃縮なしで空の清潔で清掃されたケージを準備し、自動食品摂取監視システムに取り付けます。水道水のボトルとケージマウントに味わい深いスナックとホッパーとホッパーを置きます。
ホームケージからラットを取り出し、新しいケージに入れます。ゲートを30分間開きます。テストの開始と終了を文書化する。
終了したら、ネズミをホームケージに戻します。8匹のラットに投与されたショ糖嗜好試験は、試験期間にわたってスクロースの消費量の増加および水摂取量の減少を示した。スクロースの選好率は、初日の平均0.8から2日目には0.99に増加しました。
スクロースの取り込み微細構造は、監視システムを用いて自動的に評価した。食事の大きさ、食事の期間、食事の数、および9つの他のパラメータを自動的に測定した。自動取り込み監視システムを使用する利点を実証するために、自動測定は従来の手動評価を用いて得られたものと比較した。
すべての測定値はグループ間で異なっていた。手動で評価した場合、誤って高い測定またはこぼれが原因である可能性があります。ノベルティ誘発性低血圧検査のトレーニング期間中、口当たりの良いスナックの全体的な摂取量は着実に増加し、最初の2〜3日間の適応を示した。
同様に、食事のサイズはトレーニング日の間に増加する傾向があり、食事の期間は増加しませんでした。試験日には、スナックや新しい環境にさらされたナイーブラットは、約1グラムの味わい深いスナック摂取量を示した。食事の持続時間、食事に費やされた時間、最初の発作までの待ち時間など、食物摂取微細構造の他のパラメータも自動的に評価された。
このプロトコルを実行する場合は、すべての手順を監視ソフトウェアの共通セクションに記録し、開始時間と各セッションの終了時間を節約します。どの物質がどのバランスに置かれているかを常に文書化します。この方法はストレスに関連付けられていないため、テストの間に適切なトレーニング時間を過ぎるとタスクを繰り返すことができます。
この技術を確立した後、それは異なる神経ペプチドおよび乱れのない動物のアンヘドニック特徴を探求するために使用され、それらの機能の知識を拡大した。
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本プロトコルでは、ショ糖嗜好性試験および新規物誘発性摂食抑制試験を自動モニタリングシステムと組み合わせることで、ラットにおける抑うつ様行動および快感消失行動を研究する方法を提示します。このアプローチにより、げっ歯類の行動を詳細かつ正確に分析することが可能になります。
ラットにおける自動化されたショ糖嗜好性試験および新奇性誘発性低食欲試験は、神経精神疾患の創薬において重要な中核症状であるアンヘドニア(快感喪失)に対し、高解像度な行動表現型解析を提供します。自動摂取モニタリングを統合することで、測定誤差が低減し、初期段階のターゲットバリデーションやメカニズムのリスク低減に向けた、定量的かつ再現性の高いエンドポイントの取得が可能になります。これらの機能は、前臨床モデルにおける予測信頼性を向上させ、中枢神経系(CNS)治療薬のポートフォリオ選別およびトランスレーショナルな連続性を促進します。
この自動行動フェノタイピングプラットフォームは、中枢神経系(CNS)治療薬開発における初期探索から前臨床検証に至る連続的なプロセスに適合します。