ガスクロマトグラフィー-質量分析と全気化固相マイクロ抽出を法医学的ツールとして組み合わせる

全気化固相微小抽出(TV-SPME)は、液体試料を完全に気化させ、検体はSPME繊維に浸します。これにより、溶媒蒸気とSPME繊維コーティングの間で検体を仕切ることができます。

TV-SPMEプロトコルは、薬物、レーシング燃料、爆発材料、多環芳香族炭化水素を含む幅広いサンプルを分析できるため、重要です。揮発性の検菌物のみが気化するため、濾過は必要ありません。したがって、汚れたサンプルやサスペンションを分析することができます。

有機溶剤や水性溶媒など、非常に単純なマトリックスを使用できます。TV-SPME技術の主な利点は、その高感度です。TV-SPMEは標準的な液体注入、ヘッドスペースSPMEおよび浸漬SPMEよりよい感受性を示す。

TV-SPMEには、GC計測器を変更することなく、大量のサンプルを利用するというメリットもあります。TV-SPMEは、実行する非常に簡単なテクニックです。主な難しさは、適切なボリュームが配信されていることを確認することから来ています。

小さい手動または電子のスポイトの使用は、サンプリング中にあなたの時間を取るだけでなく、助けることができます。また、繊維がコーティングを維持していることを保証することは困難であり、繊維は劣化のために注意深く監視する必要があります。手動操作とロボット操作の両方が成功するために必要であるため、視覚的なデモンストレーションは非常に重要です。

まず、目的の濃度に達するのに十分な溶媒に固体試料を抽出または溶解する。サンプルが完全に溶解していることを確認した後、選択した温度で完全に気化するために必要な体積を計算します。サンプルボリュームをヘッドスペースバイアルに移し、キャップを固定します。

サンプルを誘導する場合は、約1ミリリットルの薬剤をヘッドスペースバイアルに入れることにより、適切な誘導体化剤を調製する。適切なインキュベーションと抽出温度を設定し、全気化、十分なサンプル抽出、完全な誘導体化を確実に行います。目的の化合物のクラスに基づいて GC-MS パラメーターを選択します。

適切な入口ライナーがGCインレットにあり、SPMEファイバが適切に調整されており、解析を開始する前に正常に動作していることを確認します。水中のガンマヒドロキシブチレートまたはガンマブチロラクチンのサンプルを調製し、100万分の1未満の濃度で濃縮します。サンプル1マイクロリットルを20ミリリットルのヘッドスペースバイアルに移し、すぐにバイアルをキャップします。

1%トリメチルクロロシランを含むBSTFAの1ミリリットルを別の20ミリリットルのヘッドスペースバイアルに入れ、キャップします。初期オーブン温度を摂氏60度に1分間、オーブンプログラムを1分あたり15度、最終オーブン温度を1分間280度、流量を毎分2.5ミリリットルに、入口と伝流線温度をそれぞれ250度と280度に設定してGC-MS法を作成します。狭いSPMEインレットライナーがGCインレットの内部に配置されていること、およびPDMS/ DVB SPMEファイバが適切に調整され、正常に動作していることを確認します。

次に、サンプルで GC-MS を実行します。ヘッドスペースおよび浸漬SPMEと比較してTV-SPMEの感度を実証するためにGBLボリュームスタディが行われました。全体的に見て、TV-SPMEに対応したサンプルボリュームは、水中のGBL用のヘッドスペースや浸漬SPMEよりも感度が高いことを示しました。

各方法のクロマトグラムの比較をここに示します。GHBおよびGBLの有効用量でスパイクされたワインのサンプルを分析した。これらのサンプルは、GBLとGHBの相互変換も示しています。

TV-SPMEが適切に行われると、急激な豊富なピークが観測されます。TV-SPMEは高感度です。したがって、列を過負荷にしないように適切な濃度を使用する必要があります。

ピーク非対称性は、高濃度が存在する場合に発生します。これらの場合、サンプルを希釈するか、または分割注入を使用してピーク形状を改善することができます。TV-SPMEは液体クロマトグラフィーと組み合わせることができ、検出可能な検体の範囲を劇的に拡大するであろう。