Name: SITUハイブリダイゼーションにおける免疫RNA-蛍光を用いたSARS-CoV-2の可視化 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-12-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 23 s
Description: 学ぶSARS-CoV-2 RNAの可視化法。in situハイブリダイゼーションと免疫蛍光を組み合わせ、Vero細胞および3次元ヒト気道上皮培養でウイルスRNAを高感度・高特異的に検出する。単一細胞レベルでのウイルス複製と宿主相互作用の研究に有用です。

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この研究は、SARS-CoV-2に関する研究のための科学高等教育省と国立科学センターからの助成金(K.P.とUMO-2018/30/E/NZ1/00874にUMO2017/27/B/NZ6/02488を付与)によって支援されました。

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<li>Carletti, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+priming+of+cell+intrinsic+innate+antiviral+signaling+by+the+unfolded+protein+response%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Viral priming of cell intrinsic innate antiviral signaling by the unfolded protein response.</a> Nature Communications. 10, 3889(2019).</li>
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<li>Sze, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+restriction+factor+SAMHD1+limits+human+T+cell+leukemia+virus+type+1+infection+of+monocytes+via+STING-mediated+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+and+Microbe%22%5BJournal%5D)">Host restriction factor SAMHD1 limits human T cell leukemia virus type 1 infection of monocytes via STING-mediated apoptosis.</a> Cell Host and Microbe. 14 (4), 422-434 (2013).</li>
<li>Kikkert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+immune+evasion+by+human+respiratory+RNA+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Innate+Immunity%22%5BJournal%5D)">Innate immune evasion by human respiratory RNA viruses.</a> Journal of Innate Immunity. 12, 4-20 (2020).</li>
<li>Kennedy, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posttranscriptional+m%286%29A+editing+of+HIV-1+mRNAs+enhances+viral+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+and+Microbe%22%5BJournal%5D)">Posttranscriptional m(6)A editing of HIV-1 mRNAs enhances viral gene expression.</a> Cell Host and Microbe. 22 (6), 830(2017).</li>
<li>Fulcher, M. L., Gabriel, S., Burns, K. A., Yankaskas, J. R., Randell, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Well-differentiated+human+airway+epithelial+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Cell+Culture+Protocols+in+Methods+in+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Well-differentiated human airway epithelial cell cultures.</a> Human Cell Culture Protocols in Methods in Molecular Medicine. 107, 183-206 (2005).</li>
<li>Milewska, A., Owczarek, K., Szczepanski, A., Pyrc, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+coronavirus+entry+into+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Visualizing coronavirus entry into cells.</a> Methods in Molecular Biology. 2203, 241-261 (2020).</li>
</ol>

著者は宣言する利害の対立を持っていません。

免疫RNA-FISHはRNAおよび細胞タンパク質の二重染色のための信頼できる方法である。ここでは、細胞株およびHAE培養におけるSARS-CoV-2 RNAおよび細胞タンパク質の検出を可能にする修飾免疫RNA-FISHプロトコルが記載されている。このプロトコルは、細胞単層または特定の組織を含む異なる細胞モデルでの使用に適応することができる。この方法は、適切なプローブローカリゼーションによって開始されるHCRの概念に依存しています。次に、スプリットイニシエータプローブを用いて蛍光標識増幅器によるシグナルの増幅を開始すると、共焦点顕微鏡を用いて観察した場合、蛍光を最小から全く背景にすることが可能になります。アンプは、異なる蛍光色素で標識することができ、さまざまなターゲットを認識するように設計された異なるプローブと互換性があります。したがって、同時に使用することができます。このプロトコルで説明する手順は簡単ですが、時間がかかります(3~4日)。それにもかかわらず、結果は、直接標識された蛍光プローブを使用する他のプロトコルとは異なり、低ノイズ対信号比によって特徴付けられます。
ここでベロ細...

SARS-CoV-2は、2019年末に出現した新しいヒトベタコロナウイルスであり、数ヶ月後に前例のないパンデミックを引き起こしました。ウイルスは科学に新しいため、その生物学の多くとその宿主細胞への影響は不明のままである。したがって、感染時のウイルス細胞および-組織トロピズムのマッピングは、その基本的な生物学的特徴および宿主への影響が理解されるべきである場合に重要である。生化学的、生物学的、物理的なアッセイを含むウイルス宿主相互作用を調べるためにいくつかの技術が使用されています。このときハイブリダイゼーションは、細胞または組織内の特定のDNAまたはRNA配列に局部的に局部化する、標識された相補DNA、RNA、または修飾核酸プローブを採用する一般的な方法である。
HCR1を介してシグナル対ノイズ比を増幅することで感度を高める改変を組み込んだ新しいRNA蛍光化法(RNA-FISH)が開発されました。HCRは単一細胞レベルでのRNAの局在の研究を可能にする。この方法は、特異性、感度、解像度が高いため、基礎科学研究だけでなく、診断などの応用プロジェクトにも有用です。最近、この方法の実現可能性は、完全に分化されたヒト気道上皮(HAE)培養2内の毛状細胞に局在するSARS-CoV-2 RNAを検出するための実証された。HAE培養は、「自然感染」微小環境3、4の文脈でウイルス感染を研究するために使用される最も先進的なツールの1つを構成する。
ヒトコロナウイルス(HCoV)に関するいくつかの報告は、SARS-CoV-2を含む、HCoV感染および病態生理学に関するエピジェネティック修飾の重要性を強調する[5]、例えば、アンジオテンシン変換酵素2(ACE-2)受容体をコードする遺伝子のメチル化パターン6、7。興味深いことに、質量分光法スクリーニングは、SARS-CoV-2プロテオーム8と相互作用するいくつかのエピジェネティック因子を同定した。より具体的には、非構造タンパク質5(NSP5)は、エピジェネティックレギュレータに結合し、ヒストンデアセチラーゼ2、および触媒的に不活性なNSP5(C145A)とtRNAメチルトランスレシナーゼ1(24)と相互作用する。さらに、NSP16メチルトランスファー酵素活性はメチルトランスファー酵素阻害剤、シネフンジン9によって遮断される。しかしながら、COVID-19におけるこれらのエピジェネティック因子の正確な役割は不明のままである。HCoVの複製は、感染した細胞の細胞質において起こり、エピジェネティック修飾10によって調節される炎症反応を引き起こす。
例えば、HCoV-229Eは核因子κBシグナル伝達を細かく調合し、特定の領域11におけるH3K36およびH4K5のアセチル化を増加させることによって宿主細胞クロマチン景観を深く再プログラムする。中東呼吸器症候群関連コロナウイルス感染は、H3K27me3のレベルを増加させ、特定のインターフェロン感受性遺伝子12のサブセットのプロモーター領域においてH3K4me3を枯渇させる。さらに、ウイルスRNAは、フラビウイルス13、レトロウイルス14、15、およびコロナウイルス16について実証されるように、細胞免疫応答を引き起こす。ウイルスRNA上のエピジェネティックマーカーは、ヒト免疫不全ウイルス-1RNA-17のm7Aメチル化に示されるように、細胞センサーによる認識に役割を果たす可能性がある。しかし、SARS-CoV-2 RNAが免疫応答に与える影響とエピジェネティックなマークは関係していますか?
ここでは、細胞株および3D組織の免疫蛍光分析(完全分化HAE)と組み合わせた最適化されたRNA-FISH法について説明した。FISHや免疫蛍光などの細胞学的方法は広く用いられているが、この新世代のHCRに基づくこの新世代のハイブリダイゼーション法は、ウイルス検出に使用されたことがない(最近の刊行物を除く)2。一般に、免疫染色およびFISHには以下のステップが必要です: プローブまたは抗体の浸透を可能にする透過性;細胞材料が固定され、保存される固定;抗体または核酸プローブが適用される検出。そして最後に、視覚化のためのサンプルの取り付け。
既存のプロトコルはこれらの一般的な機能を共有しますが、関連するパラメータに関しては著しく異なります。ここでは、HAE培養およびベロ細胞におけるSARS-CoV-2 RNAを検出するために最適化された、単純な、免疫RNA-FISHプロトコルが記載されている。この技術は、次のステップを含む: (1) パラホルムアルデヒドを有する細胞の固定;(2) 洗浄剤またはメタノール(MeOH)での透過性(3) グレード付きの一連のMeOHソリューション(HAE培養のみ)による水分補給(4) 検出(5) HCR技術を用いた増幅により、SARS-CoV-2 RNAを検出する。(6) 免疫染色;(7)共焦点顕微鏡下でのイメージング。

<table><tbody><tr><td>機器</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>共焦点顕微鏡 LSM 880</td><td>ZEISS </td><td></td><td></td></tr><tr><td>Grant Bio, Mini ロッカー - シェーカー</td><td>フィッシャー サイエンティフィ</td>ック <td>12965501</td><td></td></tr><tr><td>インキュベーター Galaxy170R</td><td>ニューブランズウィック</td><td>CO170R-230-1000</td><td></td></tr><tr><td>サーモミキサー コンフォート</td><td>Eppendorf</td><td>5355 000 011</td><td></td></tr><tr><td>材料</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>15 mm x 15 mm NO. 1 カバースリップ</td><td>LabSolute</td><td>7695022</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL チューブ</td><td>FL-MEDICAL</td><td>5.350.023.053</td><td></td></tr><tr><td>12 ウェルプレート</td><td>TTP</td><td>92412</td><td></td></tr><tr><td>円錐形遠心分離チューブ</td><td>Sarstedt</td><td>5.332.547.254</td><td></td></tr><tr><td>パラフィルム</td><td>Sigma</td><td>P7793-1EA</td><td></td></tr><tr><td>血清ピペット</td><td>VWR コレクション</td><td>612-5523P, 612-5827P</td><td></td></tr><tr><td>スライドグラス</td><td>PTH CHEMLAND</td><td>04-296.202.03</td><td></td></tr><tr><td>Transwell ThinCerts</td><td>Grainer bio-one</td><td>665641</td><td></td></tr><tr><td>試薬</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alexa fluorophore 488-conjugated secondary antibodies </td><td>Invitrogen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&beta;5-チューブリン </td><td>サンタクルス バイオテクノロジー</td><td> sc-134234</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>サーモサイエンティフィック</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>リン酸二ナトリウム</td><td>シグマ</td><td>S51136-500G</td><td></td></tr><tr><td>EGTA</td><td>BioShop</td><td>EGT101.25</td><td></td></tr><tr><td>HCR 増幅バッファー</td><td>モレキュラーインスツルメンツ インク</td><td>BAM01522</td><td>バッファーも用意可能 doi:10.1242/dev.165753: 補足情報</td></tr><tr><td>HCRアンプ B1-h1 Alexa Fluor 647</td><td>Molecular Instruments, Inc.</td><td></td><td></td>S013922</tr><tr><td>HCRアンプ B1-h2 Alexa Fluor 647</td><td>Molecular Instruments, Inc.</td><td></td><td></td>S012522</tr><tr><td>HCRプローブハイブリダイゼーションバッファー</td><td>Molecular Instruments, Inc.</td><td>BPH03821</td><td>Buffer can also be prepared doi:10.1242/dev.165753: 補足情報</td></tr><tr><td>Sars-CoV-2 Ncapsid</td><td>Molecular Instruments, Inc.</td> の HCR プローブセット<td>PRE134</td><td></td></tr><tr><td>HCRプローブ洗浄バッファー</td><td>Molecular Instruments, Inc.</td><td>BPW01522</td><td>バッファーも準備できます doi:10.1242/dev.165753: 補足情報</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>BioShop</td><td>HEP001.100</td><td></td></tr><tr><td>硫酸マグネシウム七水和物</td><td>Sigma</td><td>63138-250G</td><td></td></tr><tr><td>メタノール</td><td>Sigma</td><td>32213-1L-M</td><td></td></tr><tr><td>リン酸一カリウム</td><td>Σ</td><td>P5655-100G</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>Sigma</td><td>P6148-1KG</td><td></td></tr><tr><td>PIPES</td><td>BioShop</td><td>PIP666.100</td><td></td></tr><tr><td>塩化カリウム</td><td>Σ</td><td>P5405-250G</td><td></td></tr><tr><td>Prolong Diamond 退色防止 封入剤</td><td>Invitrogen</td><td>P36970</td><td></td></tr><tr><td>塩化ナトリウム</td><td>BioShop</td><td>SOD001.5</td><td></td></tr><tr><td>クエン酸三ナトリウム 2-水和</td>物 <td>POCH</td><td> 6132-04-3</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>BioShop</td><td>TWN580.500</td><td></td></tr><tr><td></td><td>ソフトウェア</td><td></td><td></td></tr><tr><td>蛍光Spectraviewer</td><td></td><td></td><td>スペクトルパラメータのモデリング</td></tr><tr><td>ImageJ フィジー</td><td></td><td></td><td>zスタック画像の取得と処理</td></tr></tbody></table>

situハイブリダイゼーションにおける免疫rna-蛍光を用いたsars-cov-2の可視化

Visualization of SARS-CoV-2 using Immuno RNA-Fluorescence In Situ Hybridization

この原稿は、ヒト気道上皮の細胞株および三次元(3D)培養における重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2(SARS-CoV-2)RNAを可視化するために、免疫蛍光と組み合わせたその場ハイブリダイゼーション連鎖反応(HCR)のプロトコルを提供する。この方法は、プローブの局在化によって開始されたHCRに依存することにより、ウイルスRNAの非常に特異的で敏感な視覚化を可能にする。スプリットイニシエータプローブは、蛍光標識増幅器によって信号を増幅するのに役立ち、共焦点顕微鏡ではごくわずかなバックグラウンド蛍光を生み出します。異なる蛍光色素を用いたラベリングアンプは、様々なターゲットの同時認識を促進します。これにより、組織における感染のマッピングが、単細胞レベルでのウイルス病因および複製をよりよく理解することを可能にする。この方法を免疫蛍光と結合すると、宿主エピゲノムの交わりや免疫応答経路を含む宿主とウイルスの相互作用についての理解を深めることができます。このプロトコルは、敏感で特定のHCR技術により、診断ツールとしても使用できます。また、この技術は、将来出現する可能性のある非コードRNAおよびRNAウイルスを含む任意のRNAの検出を可能にするために容易に改変される可能性があることを覚えておくことも重要です。

この原稿に記載された免疫RNA-FISHプロトコルは、2つの細胞系を用いて行った:Vero細胞株と3D HAE培養。両方のセルラー モデルの主要な手順を 表 2に示します。HAE培養におけるSARS-CoV-2の可視化のためのRNA-FISHプロトコルには、組織サンプルに典型的なステップ、すなわち、100%MeOHによる透過性およびMeOH-PBSおよび0.1%のトゥイーン溶液の段階的なシリーズによる水分補給が含まれています。免疫蛍光は、RNA-FISHが完了した後に行った。Zstack 画像は取得され、処理されました。
図1 は、SARS-CoV-2に感染したMock-接種対照ベロ細胞または細胞における免疫RNA FISHを示す。 図2 は、SARS-CoV-2に感染したMOCK-接種対照HAE培養...

ここでは、その蛍光におけるRNA蛍光をその蛍光(RNA-FISH)と免疫蛍光と組み合わせて、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2(SARS-CoV-2)RNAを可視化する簡単な方法を説明する。このプロトコルは、単一細胞レベルでのSARS-CoV-2 RNA-宿主相互作用の分子特性の理解を深める可能性がある。

SITUハイブリダイゼーションにおける免疫RNA-蛍光を用いたSARS-CoV-2の可視化

This manuscript provides a protocol for in situ hybridization chain reaction (HCR) coupled with immunofluorescence to visualize severe acute respiratory ...

このプロトコルにより、細胞株および完全分化型の三次元ヒト気道上皮培養物中のSARS-CoV-2 RNAの可視化が可能になり、ウイルスの病原性と複製をシングルセルレベルでより深く理解するためのツールが提供されました。この方法は、その高い特異性、感度、分解能により、SARS-coronavirus-2の基礎科学研究だけでなく、診断などの応用プロジェクトにも有用です。その手順を実演するのは、私の研究室の博士課程の学生であるAgnieszka Suderです。本文原稿に記載されているように細胞を固定し、透過処理した後、ウェルから1X PBS溶液を取り出し、各ウェルに少なくとも300マイクロリットルの増幅バッファーを加えます。サンプルを室温で30分間インキュベートします。各HCRヘアピンは、別々のチューブで目的のボリュームをスナップ冷却して準備します。300マイクロリットルの増幅溶液を調製するには、各ヘアピンに18ピコモルを使用します。ヘアピン溶液をチューブに移し、摂氏95度で90秒間インキュベートします。その後、暗闇の中で30分間室温まで冷却します。スナップ冷却されたH1ヘアピンとH2ヘアピンを増幅バッファーに追加して、ヘアピン混合物を調製します。30〜50マイクロリットルのヘアピン混合物をパラフィルムに滴下します。細胞の入ったカバースリップをヘアピン混合物の滴上に置き、サンプルを室温で暗所で一晩インキュベートします。スライドを取り付けるには、10マイクロリットルの封入剤を2滴スライド上に置き、液滴が十分に分離され、2枚のカバーガラスが1枚のスライドに置けるようにします。清潔なタオルのカバースリップを軽くたたいて、余分な液体を取り除きます。次に、セルを下に向けて色あせ防止封入剤に入れます。マウントされたサンプルを暗闇の乾燥した平らな面に置き、硬化させます。本文原稿に記載されているようにHAE細胞を固定し、透過処理した後、サンプルを増幅バッファーと室温で30分間インキュベートして、サンプルを前増幅します。各ヘアピンの30ピコモルを使用して、500マイクロリットルの増幅溶液を調製します。ヘアピン溶液をチューブに移し、摂氏95度で90秒間インキュベートします。その後、暗闇の中で30分間室温まで冷却します。スナップ冷却したすべてのヘアピンを室温で500マイクロリットルの増幅バッファーに追加して、ヘアピン溶液を調製します。プレアンプ溶液を取り外し、完全なヘアピン溶液を追加します。次に、サンプルを室温で暗所で一晩インキュベートします。トランズウェルインサートからの切り抜きメンブレンを、セルを上に向けて10マイクロリットルの退色防止封入剤に置き、メンブレンに封入剤を追加します。次に、膜をカバースリップで覆います。この免疫-RNA-FISHプロトコールは、Vero細胞株と3Dヒト気道上皮培養の2つの細胞系で実施されました。ここでは、感染細胞と模擬接種したVero細胞におけるSARS-コロナウイルス-2サブゲノムRNAの局在を示しています。ウイルスRNAは赤で見ることができます。ここでは、感染したヒト気道上皮細胞および模擬接種されたヒト気道上皮細胞におけるSARS-コロナウイルス-2サブゲノムRNAの局在を示しています。透過化プロトコルは、Vero細胞で最適化されました。界面活性剤による透過処理では、SARS-コロナウイルス-2サブゲノムRNAの明確な特異的なシグナルが得られますが、エタノールを使用すると、画像がぼやけて焦点が合っていない結果になります。Veroセルでスライドを取り付ける場合は、セルを下に向けてカバースリップを配置することが重要です。HAEスライドを取り付けるときは、細胞を上に向けてメンブレンを配置する必要があります。この手法は、ノンコーディングRNAや将来出現する可能性のあるRNAウイルスなど、あらゆるRNAの検出を可能にするために簡単に変更することができます。免疫蛍光法と組み合わせることで、単一細胞レベルでのタンパク質-RNA相互作用の研究に使用できます。

visualization-sars-cov-2-using-immuno-rna-fluorescence-situ

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

その場テトラマー染色やin situハイブリダイゼーション（ISTH）で組み合わせる手法は可視化、マッピングおよび分析、そのウイルスに感染したターゲットへのウイルス特異的CD8 +...

同時にウイルス特異的CD8 + T細胞やウイルス感染細胞を可視化するテクニックその場で</em

蛍光によるウイルスRNAの検出<em&gt;その場で</em&gt;ハイブリダイゼーション（FISH）

Source: Mateer, E., et al., Confocal Imaging of Double-Stranded RNA and Pattern Recognition Receptors in Negative-Sense RNA Virus Infection. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates the confocal imaging of viral double-stranded RNA (dsRNA) and cytoplasmic pattern recognition receptors (PRRs) in virus-infected epithelial cells. It highlights how antibody-based fluorescent labeling reveals the interaction between viral replication intermediates and host immune sensors.

Visualization of Viral Double-Stranded RNA and Host Pattern Recognition Receptors in Infected Epithelial Cells

このビデオでは、SARS-CoV-2サブゲノムRNAの空間分布を可視化するためのHybridization Chain Reaction(HCR)-Fluorescence In Situ...

Immuno-RNA Fluorescence In Situ ハイブリダイゼーションを使用した SARS-CoV-2 の可視化

このビデオは、単純ヘルペスウイルス-1感染における感染細胞タンパク質0、ICP0の輸送を監視する方法を示しています。de...

感染細胞におけるウイルスタンパク質の局在化のための免疫蛍光法

二本鎖 RNA ウイルス RNA の複製中に生産は、生来の免疫応答を誘導するパターン認識受容体によって認識できます。否定的な感覚の RNA のウイルスの低レベルの dsRNA と PRRs の相互作用は不明します。アレナ ウイルス科 dsRNA と個々 の細胞における PRR...

二本鎖 RNA と否定的な感覚の RNA のウイルス感染におけるパターン認識受容体の共焦点レーザー顕微鏡

ここで紹介するのは、蛍光イメージングアプローチのためのプロトコルであり、DNA、RNA、およびpロテイン(MICDDRP)の究極の蛍光immuno蛍光c...

ウイルスの核酸とタンパク質を視覚化し、HIV、HTLV、HBV、HCV、ジカウイルス、インフルエンザ感染を監視するためのシングルセルマルチプレックス蛍光イメージング

ここで説明するプロトコルは、スパイク糖タンパク質に擬似的に結合した強化された緑色蛍光タンパク質標識付き小胞性口内炎ウイルスによる感染を阻害する回復血清サンプルの能力を評価することによって、SARS-CoV-2スパイクタンパク質に対する中和抗体を測定するための迅速かつ効果的な方法を概説する。...

疑似ウイルス感染のハイスループット蛍光イメージングを用いたSARS-CoV-2中和抗体の検出

このプロトコルは、インビボでSARS-CoV-2感染を研究するために必要な二次的アプローチの必要性を克服するために、K18...

レポーター発現組換えSARS-CoV-2を用いたK18 hACE2トランスジェニックマウスにおけるウイルス感染のライブイメージングと定量

このプロトコルは、急速な細胞全体の検出に続いてトマトや他の生鮮食品の表面のサンプリングのための簡単​​な粘着テープベースのアプローチを、説明して...

粘着テープベースのサンプリングと蛍光の組み合わせその場で</emの迅速検出のための>ハイブリダイゼーションサルモネラ生鮮食品について

学ぶSARS-CoV-2 RNAの可視化法。in situハイブリダイゼーションと免疫蛍光を組み合わせ、Vero細胞および3次元ヒト気道上皮培養でウイルスRNAを高感度・高特異的に検出する。単一細胞レベルでのウイルス複製と宿主相互作用の研究に有用です。

SITUハイブリダイゼーションにおける免疫RNA-蛍光を用いたSARS-CoV-2の可視化

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