2021年7月4日
ここでは、糸塞栓法により優れた矢状静脈ス(SSS)血栓症の新しいスプレイグ・ドーリー(SD)ラットモデルを確立し、その安定性と信頼性を検証した。
理想的な動物モデルの欠如のために、CVSTの研究は非常に限られています。現在、SSSSの初期部位に自作の糸塞栓術を中心に挿入することで、新しいタイプのSD-Rat CVSTモデルが確立され、臨床状態における様々なまたは制御不能な干渉因子が標準化されました。ラットが腹膜内注射によって正常に麻酔を受けた後、ラットが麻酔中の乾燥から角膜を保護するために立体的フレームに置かれた後にゲル眼の潤滑剤を適用する。
ネズミの頭の上の毛を取り除きます。この処理をより効果的に行うために、前のステップは準備室で早く行うことができる。ラットが麻酔装置によって正常に麻酔を受けた後、滅菌眼潤滑剤も塗布する。
ラットの頭部の表面を5%ポビドンヨウ素で殺菌する。これを75%エタノールで3回交互に行う。頭の真ん中に約2センチメートルの皮膚切開を行います。
鼻隠しはメスで切り開きます。そして、頭蓋骨を完全に露出させるために、慎重に上部筋膜と骨膜を剥がします。前セルタネルの位置を確認し、Aと後部フォンタネル、B.コロナの縫合糸と肘縫合の間の領域を血流観察領域として使用します。
レーザースペックル血流イメージング中の観察に影響を与えるから頭蓋骨を防ぐために、血管がはっきりと見えるまで観察領域の頭蓋骨を薄くする。頭蓋骨研削中は、常温シリンジを使用してデュラを繰り返しすすぎ、大脳皮質への高温バーストを避ける。このステップおよび以下は、すべて解剖顕微鏡下で行われる。
この図では、赤く並ぶ長方形の領域が血流観察領域である。薄くなった頭蓋骨のサイズは、約1センチメートルに1センチメートルを掛ける必要があります。そして、青く並んだ長方形の領域は、骨窓です。
約6ミリメートルに4ミリメートルを掛けた。赤い円形の領域は頭頂部の関節で、矢印はSSSを指しています。頭蓋骨が見える場合は、ピンセットを使用して骨窓の残りの骨片を慎重に使用します。
適切なスレッドプローブを選択し、フロントポイントまたはプラグポイントとして使用します。慎重に2ミリメートルの注射針でそれを穿刺し、すぐに準備ポイントにスレッドプローブを挿入します。このとき、スレッドプローブの終端とSSSの間の角度は約30〜45度である必要があります。
次に、スレッドプローブの終点とSSの間の角度をゼロから10度に調整します。そして、頭部が、後方のコンフルエンスの後端に到達するまで、SSSをゆっくりと構造に挿入する。SSSが穿刺されると急速な呼吸が起こることがある。
スレッドプローブの端部を一度に準備ポイントに素早く挿入できない場合は、小さなガーゼまたはコットンボールを使用してプローブポイントを軽く押しながら、ゆっくりと滑り落ちながら慎重に準備ポイントを露出させます。それは、SSSに持ち込まれたワイヤーの端に素早く挿入して行われます。青色の矢印は、プラグポイントからSSSに挿入されたプローブの状態を示します。
白い矢印はプローブの本体を示し、赤い矢印は頭であることを示しています。その後、尾の余分な部分を切断します。ラットの皮膚を縫合する。
皮膚を3回消毒し、立体フレームからラットを取り除きます。レーザー光源を使用して、血流観測領域を均一に照らします。このイメージは、スレッド・プローブの動的プロセスを SSS に記録します。
この図では、AとBは、糸塞栓挿入前後の血流の比較を示す。Cは、脳静脈のSSSおよび脳静脈の血流が中大脳動脈および毛細血管の両方と比較して有意に減少したことを示す。MRIスキャンテーブル上の動物を固定します。
位置スキャンで脳位置を調整し、位置を確認した後にT2WIとMRIシーケンススキャンを行います。SSSにおけるスレッドプローブの状態をより明確に観察するために、C2ヘッドマウント法を用いてラット脳のT2WI画像を表示した。この図では、A、BおよびCは、SSS内のスレッドプローブを水平位置、矢状位置および頭蓋位置から示す。
この画像は、SSSの塞栓を確認するスレッドプローブが配置されていることを示しています。ラットSSS血栓症モデルは外傷を最小限に抑えて容易に確立され、良好な安定性を提供し、化学的タイミングおよび位置を正確に制御することを可能にするので、CVSTモデルの理想的な新しいタイプである。
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本記事では、糸塞栓法を用いて上矢状静脈洞(SSS)を特異的に標的とした、脳静脈洞血栓症(CVST)の新規かつ信頼性の高いSprague-Dawley(SD)ラットモデルを提示します。このモデルは、実験条件を標準化し、外傷を最小限に抑え、虚血のタイミングと部位を精密に制御できるように設計されており、これにより従来のCVST動物モデルの限界を解消し、CVSTの病態生理学的研究を促進します。
信頼性の高い前臨床モデルは、初期段階の脳血管系薬剤探索におけるリスク低減や、臨床的な個体差がトランスレーショナルな知見を制限している疾患メカニズムの解明において不可欠です。上矢状静脈洞(SSS)閉塞の糸塞栓ラットモデルは、標準化され再現性のある脳静脈洞血栓症(CVST)の誘導を可能にし、メカニズム研究や治療研究における予測の信頼性を向上させます。このモデルは、制御された仮説検証と研究間での強固な比較可能性を可能にすることで、創薬パイプラインにおける極めて重要な転換点に対応します。
このモデルは、初期のメカニズム研究から前臨床のリード評価に至る創薬の連続的なプロセスに統合されており、仮説検証およびトランスレーショナルリサーチのための標準化されたプラットフォームを提供します。