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DOI: 10.3791/62163-v
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我々は、胚および成体マウス舌の上皮および間線質/結合組織から大量の高品質単一細胞を解離するための一般化されたプロトコルを開発した。
複雑な組織からの細胞の高収率と品質は、単一細胞RNAシーケンシングや一次幹細胞培養など、一般的に使用される実験分析に不可欠です。このプロトコルは、舌上皮および結合組織を含む哺乳類舌の異なる領域および組織区画から高収率および品質で健康な細胞を生成する。上皮をE 12.5マウス舌の間質から分離するには、安楽死させた妊娠した雌マウスを手術領域に移し、70%エタノールでマウス腹部を濡らして毛皮が手術部位に入るのを防ぐ。
胚を運ぶ子宮の角を露出させるために解剖ハサミを使用して腹部を開き、子宮の角を解剖し、100ミリメートル培養皿で新鮮なタイロードの溶液の15ミリメートルにそれらを転送します。解剖顕微鏡の下で、子宮の角から胚を解剖するためにミニはさみと細かい鉗子を使用してください。細かい鉗子で口腔を開き、ミニハサミを使用して下顎から舌を解剖します。
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