ヒト痰サンプルにおける好中球エラスターゼおよびカテプシンG活性のモニタリング
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2021年5月21日
DOI :10.3791/62193-v
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1Translational Lung Research Center Heidelberg (TLRC), German Center for Lung Research (DZL), 2Dept. of Translational Pulmonology, University of Heidelberg, 3Molecular Medicine Partnership Unit (MMPU), European Molecular Biology Laboratory (EMBL), University of Heidelberg, 4Faculty of Biosciences, Collaboration for Joint Ph.D. Degree between EMBL and Heidelberg University, University of Heidelberg, 5Dept. of Pediatric Pulmonology, Immunology and Critical Care Medicine, Charité – Universitätsmedizin Berlin, 6Berlin Institute of Health (BIH), 7German Center for Lung Research (DZL), Associated Partner Site, Berlin, 8Dept. of Chemical Physiology and Biochemistry, Oregon Health and Science University
* These authors contributed equally
本明細書に記載されるプロトコルは、ヒト痰中の好中球プロテアーゼの活性を可視化し定量するためのガイドを提供する。このような分析の用途は、抗炎症治療の評価から、バイオマーカーの検証、薬物スクリーニングおよび大規模なコホート臨床研究まで及ぶ。
Chapters in this video
0:05
Introduction
1:07
Cell Isolation and Supernatant Separation
2:36
Quantification of Soluble Neutrophil Serine Protease (NSP) Activity via Fluorimeter or Plate Reader Assay
4:13
Membrane-bound NSPs Activity Measurement via Fluorescence Microscopy
5:30
Membrane-bound NSPs Activity Measurement via Flow Cytometry
7:25
Results: Representative Images and Quantification of Membrane-Bound NE Activity on Neutrophils Isolated from CF Patient Sputum
8:26
Conclusion
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