A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

Ziyi Hu; Tingting Zhou; Fangrong Wu; Fan Lin

doi:10.3791/62312

患者由来グリオーマ幹細胞を用いたGBMの潜在的併用療法を同定するための迅速スクリーニングワークフロー

JoVE Journal
Cancer Research

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A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

患者由来グリオーマ幹細胞を用いたGBMの潜在的併用療法を同定するための迅速スクリーニングワークフロー

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05:29 min

March 28, 2021

DOI: 10.3791/62312-v

Ziyi Hu*¹, Tingting Zhou*¹, Fangrong Wu¹, Fan Lin^1,2

¹Department of Cell Biology, School of Basic Medical Sciences,Nanjing Medical University, ²Institute for Brain Tumors & Key Laboratory of Rare Metabolic Diseases,Nanjing Medical University; Nanjing Medical University Affiliated Cancer Hospital; Key Laboratory of Human Functional Genomics of Jiangsu Province

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

神経膠腫幹細胞(GSC)は、最も流行し、壊滅的な原発性脳腫瘍である神経膠芽腫(GBM)における腫瘍開始、血管新生、薬剤耐性に不可欠な役割を果たす癌細胞のごく一部である。GSCの存在は、GBMを個々の標的剤のほとんどに非常に難治性にするため、潜在的な有効な組み合わせ治療薬を同定するためにハイスループットスクリーニング方法が必要です。プロトコルは、相乗的相互作用と潜在的な併用療法のための迅速なスクリーニングを可能にする簡単なワークフローを記述します。このワークフローの一般的なステップは、ルシメラーゼタグ付きGSCの確立、マトリゲルコーティングされたプレートの調製、併用薬物スクリーニング、分析、および結果の検証を行う。

グリオーマ幹細胞は、通常、化学療法および放射線療法に耐性である神経膠腫の細胞のサブ集団である。ここでは、グリオーマ細胞を分化するのではなく、グリオーマ幹細胞を標的とする併用療法を迅速に同定する方法について説明した。他の方法と比較すると、面倒で複雑な場合があります。

このプロトコルは、潜在的な有用な薬剤の組み合わせを識別するために、比較的簡単かつ迅速です。まず、グリオーマ幹細胞またはGSCを培養培地から採取し、室温で3分間Gの70倍に遠心します。上清を取り除いた後、摂氏37度で4分間アキュターゼで細胞を消化する。

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