Name: マウスのストレスを軽減する取り扱い技術 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-25T14:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: 学ぶマウスの3D取り扱い技術によるストレス軽減法。トンネル・尾掴み法と比較し、不安行動とコルチコステロン値を評価。動物福祉向上とデータ再現性改善に貢献する神経科学研究手法です。

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著者らは、この作業を支援してくれたCAMHの動物ケア委員会と、手順の有用性に関する広範なフィードバックを提供したCAMHの動物介護者に感謝し、説明された実験の実行を動機づけ、他のユーザーのための詳細なプロトコルを提出する。この作品は、TPに授与されたCAMHブレイクスルーチャレンジとCAMHからの内部資金によって資金提供された部分でした。

<ol><li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Housing%2C+husbandry+and+handling+of+rodents+for+behavioral+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments.</a> Nature Protocols. 1 (2), 936(2006).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Mighty+Mouse%3A+the+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Missouri+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Mighty Mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Martic-Kehl, M., Ametamey, S., Alf, M., Schubiger, P., Honer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+inherent+variability+and+experimental+parameters+on+the+reliability+of+small+animal+PET+data%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Research%22%5BJournal%5D)">Impact of inherent variability and experimental parameters on the reliability of small animal PET data.</a> EJNMMI Research. 2 (1), 26(2012).</li>
<li>Howard, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Variability%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Control of Variability.</a> ILAR Journal. 43 (4), 194-201 (2002).</li>
<li>Toth, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+the+cage+environment+on+rodent+physiology+and+behavior%3A+Implications+for+reproducibility+of+pre-clinical+rodent+research%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The influence of the cage environment on rodent physiology and behavior: Implications for reproducibility of pre-clinical rodent research.</a> Experimental Neurology. 270, 72-77 (2015).</li>
<li>Golini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Non-invasive+Digital+Biomarker+for+the+Detection+of+Rest+Disturbances+in+the+SOD1G93A+Mouse+Model+of+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Non-invasive Digital Biomarker for the Detection of Rest Disturbances in the SOD1G93A Mouse Model of ALS.</a> Frontiers in Neuroscience. 14 (896), (2020).</li>
<li>Singh, S., Bermudez-Contreras, E., Nazari, M., Sutherland, R. J., Mohajerani, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-cost+solution+for+rodent+home-cage+behaviour+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Low-cost solution for rodent home-cage behaviour monitoring.</a> PLoS One. 14 (8), 0220751(2019).</li>
<li>Stewart, K., Schroeder, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Handling+and+Restraint+Techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Rodent Handling and Restraint Techniques.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2021).</li>
<li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taming+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nature Methods. 7 (10), 825-826 (2010).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+the+practicality+of+using+non-aversive+handling+methods+to+reduce+background+stress+and+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Improving the practicality of using non-aversive handling methods to reduce background stress and anxiety in laboratory mice.</a> Scientific Reports. 9 (1), 20305(2019).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+reliability+of+mouse+performance+in+behavioural+testing%3A+the+major+role+of+non-aversive+handling%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Optimising reliability of mouse performance in behavioural testing: the major role of non-aversive handling.</a> Scientific Reports. 7, 44999(2017).</li>
<li>Ghosal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+handling+limits+the+impact+of+stress+on+metabolic+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mouse handling limits the impact of stress on metabolic endpoints.</a> Physiology & Behavior. 150, 31-37 (2015).</li>
<li>Wahlsten, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+data+from+different+labs%3A+lessons+from+studies+of+gene-environment+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Different data from different labs: lessons from studies of gene-environment interaction.</a> Journal of Neurobiology. 54 (1), 283-311 (2003).</li>
<li>Nature Neuroscience. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Troublesome+variability+in+mouse+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Troublesome variability in mouse studies.</a> Nature Neuroscience. 12 (9), 1075(2009).</li>
<li>Sensini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+handling+technique+and+handling+frequency+on+laboratory+mouse+welfare+is+sex-specific%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The impact of handling technique and handling frequency on laboratory mouse welfare is sex-specific.</a> Scientific Reports. 10 (1), 17281(2020).</li>
<li>Ghosal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+handling+limits+the+impact+of+stress+on+metabolic+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mouse handling limits the impact of stress on metabolic endpoints.</a> Physiology & Behavior. 150, 31-37 (2015).</li>
<li>Novak, J., Bailoo, J. D., Melotti, L., Rommen, J., Würbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Exploration+Based+Cognitive+Bias+Test+for+Mice%3A+Effects+of+Handling+Method+and+Stereotypic+Behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">An Exploration Based Cognitive Bias Test for Mice: Effects of Handling Method and Stereotypic Behaviour.</a> PLoS One. 10 (7), 0130718(2015).</li>
<li>Gouveia, K., Waters, J., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Handling+Tutorial%5BTitle%5D)+AND+%22NC3Rs%22%5BJournal%5D)">Mouse Handling Tutorial.</a> NC3Rs. , (2016).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reducing+Mouse+Anxiety+during+Handling%3A+Effect+of+Experience+with+Handling+Tunnels%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Reducing Mouse Anxiety during Handling: Effect of Experience with Handling Tunnels.</a> PLoS One. 8 (6), 66401(2013).</li>
<li>Henderson, L. J., Smulders, T. V., Roughan, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+obstacles+preventing+the+uptake+of+tunnel+handling+methods+for+laboratory+mice%3A+An+international+thematic+survey%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Identifying obstacles preventing the uptake of tunnel handling methods for laboratory mice: An international thematic survey.</a> PLoS One. 15 (4), 0231454(2020).</li>
<li>Percie Du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ARRIVE+guidelines+2.0%3A+Updated+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biology%22%5BJournal%5D)">The ARRIVE guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research.</a> PLOS Biology. 18 (7), 3000410(2020).</li>
<li>Golde, W. T., Gollobin, P., Rodriguez, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid%2C+simple%2C+and+humane+method+for+submandibular+bleeding+of+mice+using+a+lancet%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">A rapid, simple, and humane method for submandibular bleeding of mice using a lancet.</a> Lab Animal. 34 (9), 39-43 (2005).</li>
<li>Guilloux, J. P., Seney, M., Edgar, N., Sibille, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+behavioral+z-scoring+increases+the+sensitivity+and+reliability+of+behavioral+phenotyping+in+mice%3A+relevance+to+emotionality+and+sex%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Integrated behavioral z-scoring increases the sensitivity and reliability of behavioral phenotyping in mice: relevance to emotionality and sex.</a> Journal of Neuroscience Methods. 197 (1), 21-31 (2011).</li>
<li>LaFollette, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+Animal+Welfare+Meets+Human+Welfare%3A+A+Cross-Sectional+Study+of+Professional+Quality+of+Life%2C+Including+Compassion+Fatigue+in+Laboratory+Animal+Personnel%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Laboratory Animal Welfare Meets Human Welfare: A Cross-Sectional Study of Professional Quality of Life, Including Compassion Fatigue in Laboratory Animal Personnel.</a> Frontiers in Veterinary Science. 7 (114), (2020).</li>
<li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+exposure+to+males%2C+including+men%2C+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nature Methods. 11 (6), 629-632 (2014).</li>
<li>Bailoo, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Cage+Enrichment+on+Behavior%2C+Welfare+and+Outcome+Variability+in+Female+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effects of Cage Enrichment on Behavior, Welfare and Outcome Variability in Female Mice.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 12, (2018).</li>
<li>Spangenberg, E. M., Keeling, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+welfare+of+laboratory+mice+in+their+home+environment+using+animal-based+measures+-+a+benchmarking+tool%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Assessing the welfare of laboratory mice in their home environment using animal-based measures - a benchmarking tool.</a> Laboratory Animals. 50 (1), 30-38 (2016).</li>
<li>Theil, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+fighting+in+group-housed+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of fighting in group-housed laboratory mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16649(2020).</li>
<li>Weber, E. M., Dallaire, J. A., Gaskill, B. N., Pritchett-Corning, K. R., Garner, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aggression+in+group-housed+laboratory+mice%3A+why+can%27t+we+solve+the+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Aggression in group-housed laboratory mice: why can't we solve the problem.</a> Lab Animal. 46 (4), 157-161 (2017).</li>
<li>Cloutier, S., Baker, C., Wahl, K., Panksepp, J., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Playful+handling+as+social+enrichment+for+individually-+and+group-housed+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Animal+Behaviour+Science%22%5BJournal%5D)">Playful handling as social enrichment for individually- and group-housed laboratory rats.</a> Applied Animal Behaviour Science. 143 (2), 85-95 (2013).</li>
<li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((50-kHz+chirping+%28laughter%3F%29+in+response+to+conditioned+and+unconditioned+tickle-induced+reward+in+rats%3A+effects+of+social+housing+and+genetic+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: effects of social housing and genetic variables.</a> Behavioural Brain Research. 115 (1), 25-38 (2000).</li>
</ol>

著者らは開示する利益相反を持っていません。

この研究と方法の開発は、マウスの取り扱い技術は依然として科学界によって見落とされており、実験前に動物のストレスや反応性を軽減するための習慣や取り扱い技術を実装することに消極的であるという観察に基づいています。時間の約束を表しながら、動物の取り扱いは、実施される実験の成功に寄与する可能性のある動物に有益な効果を提供し、データ変動性または動物の過剰反応性のために実験を複数回行わなければならないことを防ぎます。3Dハンドリング技術の使用は、マウスの脱出の試みを減少させた。また、実験者との相互作用が増加し、6ヶ月齢の雄マウスにおける不安様型の減少も起きました。さらに、3D処理は、わずか3日間の取り扱い後、生後2.5ヶ月の雌マウスにおけるデータ変動性の低下とコルチコステロンレベルの低下を示した。このアプローチは、よりスムーズな輸送と容易な介入を促進する実験者による取り扱いにマウスを習慣化するために穏やかな操作に依存しています。
3Dハンドリング技術から強調する価値のある何かは、上記および 表1で説明したマイルストーンの達成に応じて、マウスの反応性に応じて処理...

マウスおよびラットは、内分泌、生理学的、薬理学的または行動学的研究2を含む複数の目的のための前臨床試験1、2に不可欠な資産である。動物を含む研究の増加から、人間の相互作用を含む制御されていない環境変数が生物医学研究3、4、5における様々な成果に影響を与えることが生じた。これは、実験や研究所4、5で観察される大きな変動性を担い、動物研究において大きな注意点を示しています。
環境ストレッサーの影響を抑え、人間との相互作用に対する反応性を低減することを目的として、さまざまなアプローチが実施されています。例えば、環境ストレスの影響を抑えるために、住宅条件や自動住宅システム6、7の標準化が実験室全体で実施されています。人間との相互作用に関しては、動物の扱いや運搬に一般的に使用されるアプローチは、動物の不快感やストレスをほとんど考慮していなかった。例えば、尾で動物を拾うか、鉗子8を使用すると、ベースライン不安9、10、11が増加し、探査9、12を減少させ、研究13、14の中および全体の個人間変動に大きく寄与する。その結果、マウスやラットに適用可能なカップハンドリング技術など、他のアプローチが開発された。このアプローチでは、動物はケージから「カップ」され、実験者が手でカップ9、10、11を形成します。尾の取り扱いに対するもう一つの有用な代替手段は、マウス9、10、15を移すポリカーボネートトンネルの使用を含む。この方法により、マウスと実験者の直接的な相互作用が排除されます。カップとトンネルの両方のアプローチは、不安のような行動を減らす効果を示し、尾のピックアップ/テールハンドリング9、10などの回避的な取り扱い技術によって誇張することができる実験者の恐怖を軽減する。
したがって、証拠の増加は、個人9,11,及び動物福祉の改善に対する適切なマウス処理の有用性を示す。ただし、上記の手法は依然として制限に直面しています。カップハンドリング技術は、10日間(2週間10回のセッション)から15週間17までのスケジュールで実施されており、これは施設スタッフと実験者にとってかなりの時間です。さらに、カップハンドリングの有効性は、ひずみ9およびオープンハンドでの従来のカップ処理によって異なり、ナイーブマウスまたは特にびくびくした株が手9,18からジャンプすることにつながる可能性がある。トンネル処理の結果、より一貫性が高く、一般的に迅速に19が得られます。トンネルはホームケージの濃縮としても使用されます。彼らは動物が迅速に取り扱うことを習慣化し、豊かさの付加的な利点を提供するのを助ける。しかし、トンネル処理には、装置間で動物を移送する際に制限があります。興味深いことに、ハーストとウェスト9、ヘンダーソンら20は、穏やかで短い手動処理を使用してトンネルから装置に動物を移しても、その表現型に影響を与えないことを実証した。
既存の方法に代わるものを提供し、短期間での慣用化を短期間で行うため、カップハンドリング技術を拡張する新しい技術を紹介し、特に設備を必要としない。このアプローチでは、マイルストーンを使用して、マウスがハンドリングプロセスで持っている快適さのレベルを測定します。これは、マウスの反応性とストレスの低下(行動およびホルモンレベル)での有効性を示し、日常的な取り扱いを促進し、動物間の変動を減らすことに寄与する。この技術の詳細は、ここで提供され、不安様行動の低減、実験者との相互作用の改善、末梢ストレスホルモン(コルチコステロン)放出の制限におけるその有効性は、トンネル処理(陽性対照)および尾処理技術(陰性対照)と比較して、2つの別々の研究(雄マウスと女性マウス)で実証されている。

<table><tbody><tr><td>23 G x 1 インチBD PrecisionGlideは、一般的な滅菌皮下注射針です。レギュラーウォールタイプとレギュラーベベル。</td><td>BD</td><td>2546-CABD305145</td><td>採血用針</td></tr><tr><td>BD Vacutainer&reg;ラベンダーBDヘモガード&貿易と静脈採血EDTAチューブ;クロージャー、2.0ml(13x75mm)、100個入り</td><td>BD</td><td>367841</td><td>EDTA採血用コーティングチューブ</td></tr><tr><td>ベッドo COBS &frac14;&rdquo;トウモロコシの穂軸実験用動物寝具</td><td>Bed-O-Cobs</td><td>BEDO1/4</td><td>新規性のための新しい寝具 抑制された摂食</td></tr><tr><td>遠心分離機</td><td>Eppendorf</td><td>Centrifuge 5424 R</td><td>血液の遠心分離用。</td></tr><tr><td>コルチコステロンELISAキット</td><td>アーバーアッセイ</td><td>K003-H1W</td><td></td></tr><tr><td>デジタルカメラ</td><td>パナソニック</td><td>HC-V770</td><td>カメラ EPM/エクスペリメンターの相互作用を記録するカメラ</td></tr><tr><td>エレベーテッドプラス迷路</td><td>ホームメイド</td> n<td>/a</td><td>カスタム迷路 4つの黒いプレキシガラスアーム(2本の開いたアーム(2本の開いたアーム(長さ29cm×幅7cm、高さ16cm))で作られたカスタム迷路で、2本の開いたアームが互いに反対側にある十字形を形成しています床から55 cm上に保持</td></tr><tr><td>エタノール</td><td>Medstore ハウス ブランド</td><td>39753-P016-EA95</td><td>蒸留水で70%に希釈し、</td></tr><tr><td>Ethovision XT 15</td><td>Noldus</td><td>n/a</td><td>自動動物追跡ソフトウェア</td></tr><tr><td>実験室 げっ歯類ダイエット</td><td>LabDiet</td><td>げっ歯類ダイエット 5001</td><td>標準げっ歯類ダイエット</td></tr><tr><td>メモリーカード</td><td>キングストーンテクノロジー</td><td>SDA3/64GB</td><td>ビデオ録画用そしてファイル転送</td></tr><tr><td>ノベルティ抑制給餌室</td><td>自家製</td><td>n/a</td><td>透明な床と壁を持つカスタムテストプレキシガラステストチャンバー 長さ62cm、幅31cm、高さ40cm。</td></tr><tr><td>Parlycarbonate</td>チューブ<td>自家製</td><td>n / a</td><td>長さ13cm、直径5cm</td></tr>の<tr><td>ピュリナ昨日sニュースリサイクル新聞寝具</td><td>ピュリナ</td><td>n / a</td><td>標準寝具</td></tr><tr><td>分光光度計</td><td>Biotek</td>エ<td>ポックマイクロプレートリーダー</td><td></td></tr></tbody></table>

マウスのストレスを軽減する取り扱い技術

Handling Techniques to Reduce Stress in Mice

実験動物は、科学者や動物のケア提供者によって複数の操作を受けます。このストレスは、動物の幸福に深い影響を与えることができ、また、不安対策などの実験変数の交核要因となり得る。長年にわたり、取り扱い関連のストレスを最小限に抑える取り扱い技術は、ラットに特に焦点を当てて開発され、マウスにはほとんど注意を払っていません。しかし、マウスはハンドリング技術を用いて操作に慣れることができることを示している。マウスの取り扱いを習慣化することで、ストレスを軽減し、日常的な取り扱いを容易にし、動物の幸福度を向上させ、データの変動性を低下させ、実験信頼性を向上させます。取り扱いの有益な効果にもかかわらず、特にストレスの多いテールピックアップアプローチは依然として広く使用されています。本論文では、人間の相互作用中に動物が経験するストレスを最小限に抑えることを目的として、新たに開発されたマウス処理技術の詳細な説明とデモンストレーションを提供する。この手動技術は3日間(3Dハンドリング技術)にわたって行われ、実験者に慣れる動物の能力に焦点を当てています。本研究は、(ポリカーボネートトンネルを用いた)トンネル処理技術とテールピックアップ技術の効果も示している。具体的に研究されているのは、行動検査(上昇プラス迷路およびノベルティ抑制給餌)、実験者との自発的相互作用および生理学的測定(コルチコステロンレベル)を用いた、不安様行動への影響である。3Dハンドリング技術とトンネル処理技術は、不安のような型を減少させた。最初の実験では、生後6ヶ月の雄マウスを用いて、3Dハンドリング技術は実験者の相互作用を有意に改善した。2番目の実験では、生後2.5ヶ月の女性を用いて、コルチコステロンレベルを低下させた。そのため、3D 処理は、実験者との対話が必要または好ましい場合や、実験中にトンネル処理ができない場合に役立ちます。

2つの別々の研究をC57BL/6マウスで行った。研究#1には生後6ヶ月の男性が含まれており、研究#2にはジャクソン研究所(猫#000664)の生後2.5ヶ月の女性(N=36/研究)が含まれていました。マウスは2ヶ月の年齢で施設に到着しました。研究#2女性は到着の2週間後に処理され、テストされましたが、研究#1男性は6ヶ月(世界的なパンデミックシャットダウンによる遅延)で処理され、テストされました。この間、試験#2のマウスが1本死亡し、実験の処理を開始した。研究は、雄のマウスが動物施設のスタッフによって世話されたことを#1しました。すべてのマウスは、食料と水のアドリビタムへのアクセスを与えられた12時間の明暗サイクル(7:00 ON、19:00 OFF)で維持されました。彼らのホームケージは、寝具材料としてリサイクルされた新聞だけでなく、ネスティング材料で満たされていました。マウスは、取り扱いセッション中または採血または行動検査などの処置後にグループ収容の雄の潜在的な苦痛行動を制限するために、個別に収容された。マウスは、尾の取り扱い、トンネル処理、3Dハンドリングの3つのグループに無作...

本論文では、不安のような行動を軽減してルーチン処理を容易にする3Dハンドリング技術であるマウスの取り扱い技術について述べ、既存の2つの関連技術(トンネルおよびテールハンドリング)の詳細を提示する。

Laboratory animals are subjected to multiple manipulations by scientists or animal care providers. The stress this causes can have profound effects ...

私の名前はトーマス・プレヴォット博士です。私は中毒とメンタルヘルスセンター(CAMH)の科学者であり、精神医学科のトロント大学の助教授です。私のグループは、データの変動性を減らし、動物の福祉を改善するために、マウスのベースライン不安と反応性を減らすことに特に関心を持っています。マウスは基礎科学と前臨床研究において非常に貴重な資産であることが証明されていますが、ベースラインの不安と実験動物の反応性を制御するラボは世界中で非常に少なく、ラボ間のデータの複製性が複雑になります。ベースラインの不安の主な要因は、住宅条件、環境濃縮、ストレスへの暴露などの制御されていない環境変数です。住宅条件と濃縮の標準化がこの問題を改善するのに役立ちましたが、実験者との相互作用中のストレスへの暴露は、マウスではまだほとんど対処されていない。尾のハンドリングは、尾でマウスを持ち上げるプロセスであり、マウスは特にストレスが多いにもかかわらず、マウスハンドリング技術を広く使用している。尾の扱いに代わるものは、トンネル処理やカップハンドリングを含めて出現しています。これらの技術の採用は遅れています。ここでは、わずか3日間の習慣、または3Dハンドリングで実装できるカップハンドリングに似た新しい技術について説明します。特定の処理マイルストーンに対するマウスの反応性に応じて、相互作用の程度と複雑さを徐々に増やすことで、ストレスを軽減し、日常的な処理を容易にすることができます。行動検査におけるマウスの3D処理の有効性を評価し、不安様行動を評価し、実験者や末梢ストレスホルモン、コルチコステロン、レベルとの相互作用を評価し、トンネル処理および尾処理技術との比較を提供する。ケージをそっと開け、蓋を側面に置きます。マウスを拾おうとする前に、手袋をした手をホームケージに入れてください。マウスが約30秒間手の存在に慣れる。その後、カップの手でマウスを拾おうとします。マウスを簡単に拾えない場合は、両手をカップに入れ、それらを使ってマウスをケージの隅に案内します。その後、両手を使用してマウスを拾います。マウスをケージから取り外したら、両手を平らにして、できるだけ開いてください。マウスを自由に探索できます。これにより、マウスが踏み込むフラットなプラットフォームが提供され、噛み付きのリスクが制限されます。手を開けて平らに持ち、手のひらを上にして押さえます。もう一方の手をマウスに隣接させ、マウスを自由に手から手に動かします。平らな手でハンドリングを1分間行った後、手のひらをリラックスさせ、マウスを頭の中で少しカップしてから、手の間でマウスをそっと転がします。手の間の穏やかなローリングとあなたの開いた手の自由な探検の間で交互に、4分間続けます。最後の2分間、避難所のテストを行います。マウスを手の端に移動させ、両手を合わせます。非常にゆっくりと、マウスが手で形成された避難所の中に収まるように手をカップ。マウスが必要に応じてエスケープできるように、開口部を残してください。拘束することなく、5〜10秒間避難所にマウスを保管してみてください。最後の2分間に3〜4回避難所のテストを繰り返します。プロセスを急いではいないでください。マウスが手の中に閉じ込められていることにストレスを感じている場合は、手の間を転がして30秒間無料で探索を続け、避難所のテストを再試行してください。30秒間手で自由な探検を許可し、ケージ内のマウスをそっと交換します。70%エタノールまたは適切な洗浄液を使用して、あらゆる便と尿のベンチトップを洗浄してください。必要に応じて、便と尿の手袋をきれいにし、新しいケージに変更する場合は、70%エタノールで手袋をすすいで手袋をすすいで手袋を交換してください。2日目までに、カップの手でケージからマウスを取り除くのはすでに可能であるはずです。マウスが反応性を持つようであれば、平らな手とオープンヘッドの自由な探査を30秒から1分間実行します。それ以外の場合は、手と避難所のテストの間のロールに進みます。1日目から2~3分の間で、手と避難所の間で役割を果たします。各ステップを数回実行します。避難所のテストでマウスが安心しているように見える場合は、背中と頭にマウスをペットにしようとします。マウスが接触を逃げようとしない場合は、鼻突きに進みます。スナッズの先端でマウスを軽く触ります。噛んだり頭を回そうとしない場合、これは習慣の良い兆候です。ふれあいと鼻の突きテストのために、プロセスを急いではいないでください。マウスが手の中に閉じ込められていることによって強調されているように見える場合、または触られたくない場合は、数分間手の間を転がしてから再試行してください。約3分間の取り扱いの後、動物が避難所によく反応する場合は、頭ふれあいと鼻の突き刺しでこのセッションを停止します。そして、動物が脱出の試み、手からのジャンプ、または手との接触を避けるなど、ストレスの兆候なしにあなたの手を探検する意思があるように見える場合。マウスがストレスの兆候を示し続けるか、避難所のテストや鼻の突き刺しテストにうまく反応していない場合は、初日のように5分に達するまでセッションを続けます。ケージの中でマウスを交換し、ベンチトップと手袋を清掃します。3 日目に、2 日目の同じ手順を進めます。手のひらでマウスを拾います。マウスを手の間に移します。カップの手にそっとマウスを閉じ込めます。マウスがこれらの手順にうまく反応する場合は、マウスをかわいがって鼻の突きのテストを試してみてください。3日目には、マウスは離れて移動せずに手のひらに座るのに十分リラックスしている必要があり、約2〜3分にわたってこれらのステップを進むことができるはずです。ケージの中のマウスを交換し、ベンチトップと手袋を清掃します。3日目。もし動物が実験目的で拘束される場合、口腔内のガバジや腹腔内注射など、マウスは首のピンチ試験を受けることができる。首のうなじでマウスをつかみ、親指と人差し指の間でマウスを手の上に5センチ持ち上げます。これは通常、成体マウスにとって不快な位置であり、マウスが不動の近くに残っている場合、彼らは取り扱いに慣れ、注射のために拘束することが容易になります。マウスを平らな手に戻し、1分間自由に探索できるようにします。動物は、実験者と自発的に相互作用する意欲と実験コンテキストでの取り扱いの容易さについてテストされました。研究1では、実験者がマウスを拾おうとすると、チューブハンドリングまたは3Dハンドリングによって処理されたマウスが逃げる可能性が低かった。さらに、3D技術を使用して処理された1匹のマウスを研究し、実験者の手と同じ象限でより多くの時間を費やし、実験者と対話する意欲が高まったを示しています。研究2では、チューブハンドリングまたは3Dハンドリングのいずれかで処理されたマウスは、実験者が尾がマウスを扱うのと比較してマウスを拾おうとしたときに逃げる可能性が低かった。しかし、2つの研究では、ハンドリング技術は実験者の手と同じ象限で費やされた時間に大きな影響を与えませんでした。3Dとトンネル処理の効果は、不安のような行動の2つのテストで尾の取り扱いに比較されました, 新しさ抑制された給餌テストと上昇プラス迷路.研究1では、新規性抑制された摂食試験において、トンネル処理および3D処理マウスにおける不安を軽減する傾向があった。上昇プラス迷路では、取り扱いの全体的な効果はありませんでした。Zスコアとして要約すると、尾処理マウスと比較して、トンネル処理マウスおよび3D処理マウスにおける全体的な不安が有意に減少した。2の研究では、新規性抑制された摂食試験または上昇プラス迷路における不安対策に対する取り扱いの全体的な効果はなかった。Zスコアとして要約すると、ハンドリング技術は不安に対する全体的な影響を及ぼさなかった。ストレスの生理学的尺度として、我々は、簡単な取り扱いセッションの15分後に取り扱い、3D処理し、トンネルマウスから血清を採取し、コルチコステロンレベルをテストした。研究1では取り扱いの全体的な効果はなかった。研究2では、3Dハンドリングは、尾の取り扱いに比べてコルチコステロンレベルを有意に低下させた。マウスの取り扱い技術が科学界で広く認められていないという観察に基づいて、我々は新しいハンドリング技術の使用を説明した。両方の研究では、トンネルと3D処理は、ピックアップされたときに逃げるマウスの試みを減らし、日常的な取り扱いを促進する可能性があります。さらに、高齢の雄マウスでは、この技術は不安のような行動を減少させ、実験者との相互作用を増加させた。若い女性で。この技術は、取り扱いに応答して観察されるコルチコステロンレベルを減少させる。この技術を実装すると、データの変動性を減らし、動物の福祉を改善し、日常的な取り扱いを容易にする可能性があります。

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Behavior

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マウスのストレスを軽減する取り扱い技術

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