Name: ベクター化遺伝子導入のための非ヒト霊長類におけるステンセンダクトによる逆行性耳下腺注入 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 50 s
Description: 学ぶステンセン管逆行性耳下腺注入法による非ヒト霊長類でのベクター化遺伝子導入技術。口腔外科の専門知識がなくても再現可能な遺伝子治療・ワクチン開発への応用手順を解説します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

著者らは、手順の撮影における彼の視聴覚サポートのためにキャグニー・ジェントリー氏に感謝したいと考えています。また、このプロジェクトを追求するヘフナーVA医療センターの学術支援を認めたいと考えています。

すべての手順は、動物研究のためにウェイクフォレスト医学部クラークソンキャンパスで行われました。制度的動物管理・使用委員会(IACUC)は倫理的配慮について協議され、手続きの詳細は審査のために提出された。ウェイクフォレストIACUCは、私たちの研究プロトコルを承認し、すべての手順は、IACUC承認プロトコル#A17-147の下で行われました。
1. 輸液装置の準備
<ol><li>サイズ10ポリエチレンチューブ(PET10)をハサミで25cmの長さにカット。</li>
	<li>黒いマーカーを使用して片端から1 cmと2 cmでPET10をマークします。</li>
	<li>Ad5-EGFP溶液(109 ウイルス粒子/mL)を1mL(結核)シリンジにプレフィル0.5 mL。</li>
	<li>29-31 G針に取り付けられたPET10チューブの無印の端を注射器に取り付けます。一般的に、このタスクは拡大率で実行する方が簡単です。</li>
	<li>チューブが完全に満杯になるまでPET10に溶液を注入します(フリーエンドで目に見える落下)。</li>
	<li>外科用スクラブ、長袖ガウン、不浸透性手袋、外科用マスク、フェイスシールド、ヘアボンネット、靴カバーを含むフルスタンダードPPEを使用してください。</li>
</ol>2. 動物の準備
注:サイノモルガスのマカクは、ビデオデモンストレーションのために使用されました。他の非ヒト霊長類とヒト霊長類の解剖学は非常に類似しており、プロトコルは他の種に翻訳可能であるべきである。
<ol><li>唾液分泌を最小限に抑え、注入体の分布と保持を最適化する手順の15分前に、皮下0.05mg/kgのアトロピンを注入します。</li>
	<li>筋肉内ケタミン/ミダゾラム(10-15 mg/kgのケタミンと0.01-0.05 mg/kgミダゾラム)を用いて5mL注射器を使用して麻酔を提供する。鎮静動物が無意識になり、刺激に反応することができないときに適切な麻酔を確認する。</li>
</ol>3. 手順の実行
<ol><li>口を開くブレースに経口レトラクターを使用してください。<ol>
<li>リトラクターの一端のゴムパッドを、注入される腺の反対側の口の側の上歯の後ろの硬い口蓋に置きます。上部レトラクタと同じ側の下のイヌの反対側にもう一方の端のゴムパッドを置きます。レトラクターのスプリングアクションをそっと広げ、口を開きます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>上部2nd モルに隣接する後頬の、ステンセンのダクトの開口部である耳下腺乳頭を特定します。これは、倍率のための歯科ループを使用して最もよく視覚化されます。</li>
	<li>円錐状のディレーターの点で、耳蓋状乳頭を軽く広げます。ディラトールのポイントを乳頭の中心または開口部に配置し、前後にそっと回転させるのが最善です。ポイントはゆっくりと乳頭に入り、穏やかな回転の約20〜30 s以上にそれを拡張する必要があります。</li>
	<li>PET10チューブを拡張した耳下腺乳頭に挿入します。これは、遠位端から約0.5cmのピンセットでPET10チューブのマークされた端を保持し、チューブの先端を拡張乳頭にそっと挿入することによって最も良い達成されます。<ol>
<li>チューブのスライドを助けるために小さな回転運動によってしばしば促進されるチューブを穏やかに進め、続いてピンセットの0.5 cm近位を前のグリップに再調整する。2cmマークが耳下蓋乳頭に達するまでこれを繰り返します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>乳頭と挿入チューブの周りの頬にシアノアクリル酸を適用し、それが乾燥するのを待ちます(特定の量は記録されず、ステンセンのダクト乳頭の入り口を密封するのに十分です)。これは通常、1分未満かかり、耳下腺乳頭を密封し、口腔内に戻ってインフュージングのこぼれを減らすのに役立ちます。</li>
	<li>100 μL/minの速度で5分以上ゆっくりとシリンジの含有量を押し込みます。この遅い注入速度は管内圧力の突然の増加によるダクト傷害の危険を最小にする。</li>
	<li>注入が完了した後、少なくとも5分間PET10を所定の位置に置いておきます。ダクトを密閉し、インフューズを耳下腺に留まらなくてはなっておいてください。</li>
	<li>優しい牽引力でPET10を取り外します。シアノアクリル酸はチューブで自由に引っ張ります。</li>
	<li>反対側のステップ 3.2 ~ 3.8 を繰り返します。</li>
	<li>両方の耳下垂体が注入され、両方のPET10チューブが除去された後、経口リトラクタをゆっくりと放出する。 注:両側の手順全体は30分未満かかります。</li>
</ol>4. 手続き後のケア
<ol><li>注入が完了し、ステンセンのダクトが脱狭した後、麻酔効果が消えるまで動物を観察します(通常、20〜30分の後の手順)。</li>
	<li>動物の飲み物を提供し、彼らは完全に目を覚まし、定期的なケアを再開した後、食べ物。</li>
</ol>

<ol><li>Isenman, L., Liebow, C., Rothman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+secretion+of+mammalian+digestive+enzymes+by+exocrine+glands%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">The secretion of mammalian digestive enzymes by exocrine glands.</a> The American Journal of Physiology. 276, 223-232 (1999).</li>
<li>Perez, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+epithelial+cells%3A+An+unassuming+target+site+for+gene+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Biochemistry+%26+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Salivary epithelial cells: An unassuming target site for gene therapeutics.</a> The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 42, 773-777 (2010).</li>
<li>Kochel, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dengue+virus+serotype-1+DNA+vaccine+induces+virus+neutralizing+antibodies+and+provides+protection+from+viral+challenge+in+Aotus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">A dengue virus serotype-1 DNA vaccine induces virus neutralizing antibodies and provides protection from viral challenge in Aotus monkeys.</a> Vaccine. 18, 3166-3173 (2000).</li>
<li>Ponzio, T. A., Sanders, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+salivary+gland+as+a+target+for+enhancing+immunization+response%5BTitle%5D)+AND+%22Tropical+Diseases%2C+Travel+Medicine+and+Vaccines%22%5BJournal%5D)">The salivary gland as a target for enhancing immunization response.</a> Tropical Diseases, Travel Medicine and Vaccines. 3, 4(2017).</li>
<li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+responses+to+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+for+radiation-induced+salivary+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Early responses to adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA for radiation-induced salivary hypofunction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 19403-19407 (2012).</li>
<li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sorting+of+Transgenic+Secretory+Proteins+in+Rhesus+Macaque+Parotid+Glands+After+Adenovirus-Mediated+Gene+Transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Sorting of Transgenic Secretory Proteins in Rhesus Macaque Parotid Glands After Adenovirus-Mediated Gene Transfer.</a> Human Gene Therapy. 19, 1401-1405 (2008).</li>
<li>Niedzinski, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+systemic+transgene+expression+after+nonviral+salivary+gland+transfection+using+a+novel+endonuclease+inhibitor%2FDNA+formulation%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Enhanced systemic transgene expression after nonviral salivary gland transfection using a novel endonuclease inhibitor/DNA formulation.</a> Gene Therapy. 10, 2133-2138 (2003).</li>
<li>Niedzinski, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zinc+Enhancement+of+Nonviral+Salivary+Gland+Transfection%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy%22%5BJournal%5D)">Zinc Enhancement of Nonviral Salivary Gland Transfection.</a> Molecular Therapy. 7, 396-400 (2003).</li>
<li>Samuni, Y., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+delivery+in+salivary+glands%3A+From+the+bench+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+-+Molecular+Basis+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Gene delivery in salivary glands: From the bench to the clinic.</a> Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease. , (2011).</li>
<li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-Associated+Virus+Serotype+2-Mediated+Gene+Transfer+to+The+Parotid+Glands+of+Nonhuman+Primates%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Adeno-Associated Virus Serotype 2-Mediated Gene Transfer to The Parotid Glands of Nonhuman Primates.</a> Human Gene Therapy. 18, 142-150 (2007).</li>
</ol>

著者らは開示するものは何もない。

ここでは、ステンセンのダクトを介して耳下腺への逆行注入のプロトコルについて説明します。説明された方法論は、遺伝子治療やその他のアプリケーションの部位として唾液組織の有用性を探求する研究者によって潜在的に使用することができるガイダンスを提供する。
この手順を成功させるためには、複数の重要な手順があります。まず第一に、すべての手順は穏やかに完了する必要があります。口の強引なブレースは、下顎下の亜脱力をもたらす可能性があります。耳下腺乳頭の強引なカヌリン化またはステンセンのダクトへの溶液の急速な注入は、急性乳管の涙または慢性管狭窄を引き起こす可能性がある。
第二に、麻酔が投与され、有効であることを確認します。適切な麻酔がなければ、どのステップも容易に達成することはなく、動物および人的傷害のリスクは有意に増加する。我々は、ケタミンとミダゾラムを用いた筋肉内麻酔を選んだが、これはヒト以外の霊長類研究における標準的なレジメンである6.我々は、アトロピンが処置中に唾液分泌物を減少させ、解剖学の...

唾液腺は唾液の外分泌産生でよく知られていますが、研究者は長い間、タンパク質を血流1に直接分泌する能力を認識しており、置換ホルモンや抗体産生などの全身投与のための遺伝子治療の潜在的な標的となっています。実際、唾液腺は、分泌のためのタンパク質を産生する固有の能力(プロパティ筋不足)、ベクター拡散を制限できる重いカプセル化、非統合ベクターの安定性を提供する十分に分化された組織など、他の組織ターゲットに対していくつかの利点を提供します。さらに、重篤な有害事象が発生した場合、唾液腺は生命にとって重要ではなく、外科的に除去することができる。直ちに直ぐには直視できないが、耳下腺は口から主な排泄管、ステンセンのダクト2を通して容易にアクセスできる。
遺伝子治療のための唾液組織の利点を考えると、この組織標的を探索することに関心が高まっている。げっ歯類、イヌ、ヒト以外の霊長類モデルでは既に数多くの研究が行われ、少なくとも1つのヒト臨床試験が3、4、5で進行中である。遺伝子治療目的のためにこの組織標的の有用性をさらに探求し、開発するためには、より多くの非ヒト霊長類研究が行われる必要がある。本論文では、Stensenのダクトを介して、アオシド腺にアクセスし、非ヒト霊長類モデルにおける形質導入のためのベクター化遺伝子を送達する方法について述べている。腺に入る場合のインフューズートの送達及びダクトの解剖学を目に見えて実証するために、放射コントラストを用いた蛍光視が行われた。ベクターの正常な伝達を実証するために、アデノウイルス血清型5(Ad5)ベクター化egfp遺伝子を用いた。Ad5は、唾液組織を導入し得る、よく説明したベクターである。究極の臨床使用には免疫原性が高すぎるが、効率的な導入を保証するためにこの実証研究のためにAd5ベクターが選ばれた。強化された緑色蛍光タンパク質(EGFP)の生産を評価することは、転写後のベクター遺伝子の転写と翻訳を成功させたことを実証するためのよく説明された方法であり、ここで行われました。

<table><tbody><tr><td>500 & マイクロ;L U100シリンジ 30ゲージ針付き</td><td>ベクトン・ディキンソン</td><td>328466</td><td>固定針で無駄が少ない</td></tr><tr><td>接着剤(例:エチコン・ダーマボンド)</td><td>注入</td><td>中にチューブをシールし、ダクト内に保持するための</td>様々な<td></td>シアノアクリレート接着剤。</tr><tr><td>アトロピン注射液</td><td>Patterson Veterinary</td><td>07 869-6061</td><td>アトロピン 0.54 mg/mL</td></tr><tr><td>BD 超微細インスリン注射器 30G</td><td>ウォルマート</td><td>N/A</td><td>0.5 mL と 1.0 mL のサイズがあります。</td></tr><tr><td>シアノアクリレート(医療用接着剤)</td><td>Ethicon</td><td>DNX12</td><td>Dermabond局所皮膚接着剤</td></tr><tr><td>光付き歯科用ループ</td><td>アマゾン(DDP)B012M3IV80</td><td></td> <td>ステンセン管乳頭の視覚化を強化するために使用されます</td></tr><tr><td>乳児涙液</td><td>Surgipro</td><td>SPOI-137</td><td></td></tr><tr><td>ケタミン注射液</td><td>パターソン獣医</td><td>07-803-6637</td><td>ケタセット注射 100 mg/mL</td></tr><tr><td>涙液拡張器</td><td>Surgipro</td><td>SPOI-132</td><td>ステンセン管をダイヤルするために使用されます。</td></tr><tr><td>ミダゾラム注射液</td><td>パターソン獣医</td><td>07 890-6698</td><td>ミダゾラム インジェクション 5mg/mL</td></tr> は<tr><td>さみ</td><td>アマゾン (DDP)</td><td>該当なし</td><td>PET10 チューブの切断に使用</td></tr><tr><td>ポリエチレンチューブ (PE-10)</td><td>Scientific Comodities, Inc</td><td>BB31695-PE/1</td><td>30Gシリンジを接続し、ダクトに挿入します。</td></tr><tr><td>Q-tips</td><td>ウォルマート</td><td>N/A</td><td>頬にシアノアクリレートを広げるために使用されます</td></tr><tr><td>サイズ10 ポリエチレンチューブ (PET 10)科学</td><td>商品</td><td>BB31695-PE/1</td><td>低密度ポリエチレンチューブ</td></tr><tr><td>小動物用マウスオープナー</td><td>アマゾン (DDP)</td><td>B01F3LVJXC</td><td>動物の口を開けたままにするために使用されます。</td></tr><tr><td>ピンセット</td><td>アマゾン (DDP)</td><td>該当なし</td><td>PET10 チューブをステンソン管に挿入するために使用されます</td></tr><tr><td>塩化亜鉛</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>7646-86-7</td><td>プラスミド DNA 注入液に含まれる</td></tr></tbody></table>

ベクター化遺伝子導入のための非ヒト霊長類におけるステンセンダクトによる逆行性耳下腺注入

Retrograde Parotid Gland Infusion through Stensen's Duct in a Non-Human Primate for Vectored Gene Delivery

唾液腺は、すでにヒトの試験につながる有望な結果を有する遺伝子治療のための魅力的な組織標的である。彼らは本質的に血流中にタンパク質を分泌することができ、容易にアクセス可能であり、遺伝子導入による置換ホルモン産生またはワクチン接種のための潜在的に優れた組織サイトを作る。遺伝子導入の推奨方法としては、唾液管を介した経皮注射および逆行注入が挙げられる。ヒト以外の霊長類で逆行唾液腺注入(RSGI)を行う方法を実演する。我々は、耳下腺乳頭の同定、基本的な歯科用具、ポリエチレンチューブ、シアノアクリル酸塩を利用したステンセンのダクトをカニューララットおよびシールする無外傷性方法、および適切な注入速度を含む重要な解剖学的ランドマークを記述する。これは最も外傷性の低い送達方法ですが、この方法は、引き渡し可能な体積(<0.5 mL)と、ダクトおよび腺への外傷の可能性によって依然として制限されています。蛍光検査を用いて、蛍光検査を用いて、インフューズトを完全に腺に送達できることを実証し、免疫体系化学によって、典型的なベクターの導入と、送達された遺伝子の発現を更に実証する。

成功した手順、伝達および転写 図1 は、後部上頬の2番目 の大臼歯に隣接する耳下腺乳頭を示す。画像はまた、口のブレースの正しい配置を示しています, 硬口蓋に一方のゴム端とイプシラテラレのイプシラテラの上に他のゴム端. 図2 は、PET10上の2cmマークでの耳蓋乳頭のカヌリン化に成功した後に撮影した画像を示す。 図3 は、狭窄管を通って耳下腺に溶液の分岐を示す放射コントラスト注入の瞬間の透視検査画像を示す。この蛍光顕微鏡像は、解剖学とインフューズンの分布を実証する唯一の意図のために行われた。ベクターデリバリーのためにこの手順を実行する場合、蛍光検査は必要ありません。 図4 は、組織病理学上の赤で染色されたEGFP免疫を示す。両管細胞とアシナル細胞はいずれも赤色に染色されており、両方の細胞タイプでの転写および転写に成功したことを示している。要...

唾液腺は、遺伝子治療の組織標的部位として、特に遺伝子導入によるワクチン接種の領域において提案されている。逆行性の耳下腺注入を利用した非ヒト霊長類モデルにおける遺伝子導入を実証する。

Salivary glands are an attractive tissue target for gene therapy with promising results already leading to human trials. They are inherently capable of ...

このプロトコルは、唾液腺逆行注入の手順を詳細に示すため重要である。この手順は、ベクター化免疫予防や遺伝子治療などの様々な医学的理由で使用することができます。このテクニックは、簡単に学習し、再現できます。著者らは、口腔外科医ではないにもかかわらず、そのような背景を持っていないにもかかわらず、何度もこの手順を正常に実行することができました。麻酔後、拡大のために歯科ループを使用し、上部第2臼歯に隣接する後頬の耳下蓋乳頭またはステンソンのダクトの開口部を特定する。円錐形のディレーターの点を中央に置くか、乳頭を開いて、約20〜30秒間、前後にディラタを回すことによって、耳蓋乳頭を穏やかに拡張します。次に、遠位端から約0.5センチメートルで注射器を含むインフューズを含むインフューズを取り付けたポリエチレンチューブの印の端を保持するピンセットを使用し、チューブの先端を軽く拡張乳頭に挿入します。チューブがスライドするのを助けるために小さな回転運動によってチューブを穏やかに進め、続いてピンセットの0.5センチメートル近位を前のグリップに再調整します。2センチマークが耳下腺乳頭に達するまで、このプロセスを繰り返します。次に、耳下腺乳頭を密封し、口腔内に戻るインフュージングのこぼれを減らし、乳頭の周りおよび挿入管の頬にシアノアクリルを塗布する。シアノクリレートが乾燥したら、1分間に100マイクロリットルの速度で5分間にわたって徐煙をゆっくりと注入します。注入が完了した後、チューブを少なくとも5分間所定の位置に残し、それによってダクトを密閉し、インフュージングが耳下腺に残るようにします。最後に、穏やかな牽引力でチューブを取り外すと、シアノアクリルはチューブで自由に引っ張ります。無線コントラスト注入を用いた蛍光検査は、ステンソンのダクトを通って耳下腺に溶液の分岐を実証した。耳下腺の化学分析としての免疫は、両方の細胞タイプにおける正常な転移および転写を示す管および共生細胞の両方でEGFPの陽性染色を明らかにした。この手順の主な課題は、おそらく非常に穏やかにゆっくりと行われるべき乳頭にポリエチレンチューブを導入することです。

retrograde-parotid-gland-infusion-through-stensen-s-duct-non-human

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

ワルトン管を介してマウス顎下唾液腺のカニュレーションのためのプロトコルが記述されています。この実験では、トリパンブルー溶液は、この手法が効果的に標的腺に注入を提供する方法を示すこと、および唾液腺の再生のための潜在的な臨床薬/細胞療法としてのこの新しいアプローチの信頼性を示唆するダイアーとして使用されます。...

ワルトン管を経由してマウス顎下唾液腺のカニュレーション

出典: Tadokoro, T., et al.成体マウスにおける軟膜下アデノ随伴ウイルス9(AAV9)ベクター送達J. Vis. 経験。(2017年)このビデオは、マウスの脊髄への遺伝子送達のための軟膜下注射技術を示しています。この手順には、硬膜を露出させ、軟膜に穿刺し、蛍光タンパク質発現遺伝子を運ぶ組換えアデノ随伴ウイルス (rAAV)...

遺伝子発現を評価するためのマウス脊髄における軟膜下遺伝子送達

これらの研究は、アデノウイルス遺伝子ベクターのステントおよびモデルメッシュディスクのコートレス金属表面への可逆的な付着について報告しています。ベクター固定化に使用される架橋剤の加水分解を条件として、形質導入にコンピテントなウイルス粒子が持続的に放出されるため、血管細胞やステント留置動脈において、部位特異的な導入遺伝子の持続的な発現が得られます。...

加水分解性架橋剤を介してアデノウイルスベクターテザーを使用した金属ステント表面からの血管の遺伝子導入

唾液腺の機能低下は、頭頸部放射線治療の大きな副作用であり、患者の生活の質を低下させます。動物モデルにおける新しい治療法の有効性の実証は、臨床移行前の前提条件です。このプロトコルは、ラット顎下腺のレトロダクト投与と局所照射について説明しています。...

唾液機能低下のラットモデルにおけるRetroductal顎下腺点滴とローカライズされた分割照射

このメソッドでは、ウサギの介在静脈グラフトの配置、移植の伝達と遺伝子発現の耐久性の達成をについて説明します。これは遺伝子とグラフト静脈でタンパク質製品の生理学的および病理学的役割と静脈グラフト病に対する遺伝子治療のテストの調査をことができます。...

耐久性のある遺伝子発現により一般的な頚動脈移植に頸静脈の家兎モデル

顎下腺への薬剤の局所投与は、唾液腺の生物学を理解に、新規治療法の開発に興味のです。配信精度と実験の再現性を向上させるため、更新と詳細な retroductal...

マウス顎下腺への Retroductal ナノ粒子注入

ここでは、マカク脳の大きな皮質領域にわたって光遺伝学的発現を達成するための効率的かつ簡素化されたアプローチとして、皮質へのウイルスベクターの磁気共鳴(MR)誘導対流増強送達(CED)を示す。...

オンラインMRI画像のガイダンスの下でレソスマカクの皮質への光遺伝学アデノ関連ウイルスベクターの対流強化された配信

現在実施されているように、非ヒト霊長類のオプトジェネティクスは、脳へのウイルスベクターの注射を必要とします。最適な注入方法は、信頼性が高く、多くのアプリケーションにとって、死後の組織学で容易かつ明確に特定される任意の深さの個々の部位を標的にできる必要があります。これらの特性を有する注入方法が提示される。...

非ヒト霊長類脳における麻酔および覚醒行動のための光遺伝学のためのAAVベクターの注射

幼若ラットの腰椎槽に注射を行うための外科的処置が記載されている。このアプローチは、遺伝子治療ベクターの髄腔内送達に使用されてきましたが、このアプローチは、細胞や薬物を含むさまざまな治療に使用できることが期待されています。...

腰椎貯水槽注射による幼若ラットの髄腔内ベクター送達

この記事では、出生後、若年性、およびラント成体マウスに対する総容量150μLまでの眼球後洞注射のプロトコルと付随するビデオを提供します。この手順は、尾静脈注射が不可能な場合の小型マウス(15g)の注射に特に適しています。...

出生後、若年性、および滑走性成体マウスの眼球後洞注射による全身治療

このレポートでは、マウス腎臓への効果的かつ安全な遺伝子導入のための腎盂 を介した AAV...

アデノ随伴ウイルスベクターの低速逆行性腎盂注射 による マウス腎臓への効果的かつ安全な遺伝子送達

学ぶステンセン管逆行性耳下腺注入法による非ヒト霊長類でのベクター化遺伝子導入技術。口腔外科の専門知識がなくても再現可能な遺伝子治療・ワクチン開発への応用手順を解説します。

ベクター化遺伝子導入のための非ヒト霊長類におけるステンセンダクトによる逆行性耳下腺注入

さらに動画を探す