生物医学・バイオエンジニアリング研究のためのタコ生態系の確立

私たちのプロトコルは、研究者がタコ環境を維持し、水族館を設置する方法、タコの毎日のケアを説明するので重要です。この技術は、タコのケア経験のない新しい研究者が実験室でタコのための水族館環境を設定し、研究のための健康なタコを維持することを導きます。タコを持つ新しい研究者は、これらの動物が強いコミットメントを必要とすることを認識することが重要です。

彼らは毎日のケアを必要とし、水質は動物が到着する前に安定した状態で継続的に監視する必要があります。タコのタンクが成熟した1週間後、成熟した塩水8ガロンをタンクに移して別のエビタンクを設置し、15キログラムの砕いたサンゴをタンクの底に加えます。また、脱皮のための隠れ場所を提供するために、いくつかのライブ岩を追加します。

次に、キャニスターフィルターをタンクの端に取り付け、メーカーの指示に従って設定します。タンクにエアストーンを取り付けたチューブに接続されたタンクの隣にエアポンプを追加します。砕いたサンゴの堆積物がエビを放散したら、エビをタンクに加え、到着時にエビを加え、まずエビを小さな中間塩水タンクに5分間移動してバイオ廃棄物を除去し、エビを直接タンクに加えることができます。

到着時に、蚊の魚は、エビタンクに直接追加することができます。エビと魚に魚のフレーク、死んだ植生、または藻類を与えます。毎週、フィルターを洗浄し、フィルターパッドを変更し、水の25%を変更します。

水テストキットを使用して、食品タンク内の窒素、pH、温度パラメータを毎日チェックしてください。水窒素パラメータが高いままの場合は、水をより頻繁に交換し、窒素吸収性バッグを追加します。問題が1ヶ月以上続く場合は、エビを大きなタンクに移動します。

カニタンクの場合は、片方に10キロの小石を積んで乾燥した土地を作り、もう一方の側に塩水1ガロンを充填します。次に、フィドラーカニをタンクに直接加えます。カニは人生のほとんどを陸上で過ごしますが、一度に数日間水中に入ることができ、長期的な生存のために部分的に水中タンクが重要になります。

水槽の部分の皿に魚のフレークを加えることによって、1日1回フィドラーカニを養います。まずカニを取り除き、塩水の100%を交換し、小石を洗浄することによって、毎週タンクをきれいにします。タコの海水タンク内に、アサリやムール貝などの海洋二枚貝軟体動物を入れます。

これらの軟体動物は開き、別の水のろ過メカニズムを提供する。タンクにタコを導入する前に、アンモニア、亜硝酸塩、硝酸塩の各レベルが100万分の5、25、および10未満であることを確認してください。タンクからタコインクを取り除くために利用可能な水ハンドポンプを持っています。

この手順には2人が必要です。到着時に、スケールにバッグを置き、タコとバッグの重量を記録します。動物をタンクに移しながら水の酸素を増やすために袋にエアストーンを追加します。

出荷後の長期にわたる病気の場合、出荷水の温度と水分を測定し、記録します。袋からタンクに水を移さずに、タンクの隅に輸送バッグをタンク水に部分的に沈めたまま吊り下げ、輸送バッグの温度を変え始める。袋から水の10%を取り出し、それをシンクに捨て、タンクから袋に同量の水を加えます。

袋の中の水温がタンク内の水温と1度以下になるまで10分ごとに繰り返します。その後、手袋を着用し、両手をタコの下に置き、転送中にサポートを提供します。2人目の人は、吸引された腕をバッグの側面からそっと引っ張る必要があります。

タコが袋から出たら、新しい生息地の水に素早く移動し、できるだけ少ない水を出荷袋から移します。ハンドポンプを使用して、タンク内でタコが放出するインクを取り除きます。今、動物のおおよその重量を得るために水で袋の重量を量る。

到着後の最初の2週間は、タコの1日の消費量を監視します。タコは1日4回チェックする必要があります。これは、2週間後に1日2回に減少させることができます.

2週間ごとに動物の重量を量り、必要に応じて食品消費量を調整します。市販の塩水試験キットをpH、アンモニア、亜硝酸塩、硝酸塩レベルに使用します。キットに付属の4本の試験管に、キット指示量のタンク水を追加します。

テストキットで指定されているように、対応するチューブに熱量反応物の量を加えます。アンモニア、亜硝酸塩、硝酸塩のレベルがそれぞれ100万分の5、25、および10を超える場合は、バイオマスを靴下フィルターから洗い流すか、新しい靴下フィルターに変更します。さらに、スキマーの上からバイオマスをブラシできれいにし、タンクに脱窒細菌を追加します。

問題が解決しない場合は、水の25%を淡水に置き換えます。ハンドポンプを使用して、タンクからすべての死んだカニとエビの死体だけでなく、任意のタコの便物質を削除します。残りのすべての生きたカニをタンクから取り出し、貯蔵タンクに戻します。

次に、タンク内の大きなオブジェクトを再配置します。その後、タコが毎日食べるカニの半分の数をタンクに導入します。解凍したエビや小さなオスのフィドラーカニを若いタコに食べさせます。

実験に応じて、カニやエビはタンク内のどこにでも、またはタコに直接導入することができます。毎日5つの幽霊エビを提供しています。タコに様々な食べ物を提供するには、週に一度1つの生きたアサリまたはムール貝を与え、常にタンク内の3匹の蚊の魚を維持します。

毎週の衛生のために、ポンプシステムを掃除する前にスキマー、ポンプ、藻類のビンライトをシャットダウンし、水を取り除く前にシステムの自動バルブをオフにします。最後に、スキマーとすべての水をサンプシステムから取り除きます。藻類のビンを軽くこすって、バイオマスの大部分を壁から取り除き、残りのサンプ部分をブラシできれいにしてから、靴下フィルターを取り除き、酢できれいにし、乾燥させます。

毎週別の靴下フィルターで回転し、3ヶ月ごとに新しいものに置き換えます。スキマーの上からバイオマスを洗浄した後、スキマーをシステムに戻し、塩水で補充を開始します。ポンプ領域が満杯になったら、すべてのシステムをオンに戻します。

フロートバルブの自動上部がオフの位置にある場合は、水を追加します。試験管を緩めるのは、感覚運動機能を理解するとともに、タコの記憶能力を学習するための貴重なテストです。この検査は3匹のタコで毎日行われ、試験管の開け方を学ぶのに平均4日かかりました。

ここに示されているのは、タコの脳と腕の超高空間分解能MRI画像で、一緒に5億以上のニューロンを含む神経系を形成しています。これは、脳と視神経を示す頭部のコロナ図である。腕のコロナビューでは、軸索は7つの腕のそれぞれに見え、吸盤の矢状の眺めは複雑な末梢神経構造を示す。

動物全体の3次元形態画像を生成するクライオ蛍光断層撮影は、470ナノメートルの波長で腕に沿って配置された脳および吸盤の視覚化を可能にした。消化器系は555ナノメートルと640ナノメートルの波長で視覚化される。この技術が開発された後、タコの動きを追跡し、分類するための機械学習ツールを使用することが可能でした。