ウサギモデルにおける孤立した肺灌流システム

この技術は、代謝活動および呼吸機能を測定することによって、肺生理学および病理の特性評価に有用である。孤立した肺灌流システムは換気および潅流を作り直している間連続生理機能の研究を可能にする完全な機能器官と働くことを可能にする。この方法は、代謝活性および肺胞マクロファージおよび内皮組織のような様々な成分の活動のような肺組織の非呼吸能力の特徴付けに関する洞察を提供することができる。

まず、作業装置を組み立て、気胸部の上部と前ヒートコイルの後方に位置する気胸郭と重量トランスデューサを持つ人工胸郭を保持するベースプレートに取り付けられた主な鋼柱を気泡トラップで含んでいる。すべてのトランスデューサを中央の電子部品に接続し、装置以外の換気システムを準備します。麻酔をしたウサギの手術部位を剃った後、胸骨マヌブリウムから首まで3〜5センチメートルの腹側中央線切開を行う。

操作用のハサミを使用して、軟骨リングの間の気管の前部2/3を切ります。気管線維膜を通して5ミリメートルの気管カニューレを挿入し、4-0シルク縫合糸でカニューレを慎重に固定します。気管の下に鉗子またはピンセットを置き、カニューレが気管に対して曲がらないようにします。

呼吸ポンプを気管カニューレに接続し、1キログラム当たり10ミリリットルの潮量を設定し、気管切開後、胸郭が開く前に、手術中の肺崩壊を防ぐために肺の正気圧を維持するために換気を開始します。胸腔にアクセスするには、メスまたはハサミを使用して胸郭壁を開き、胸郭の上3分の1まで内側の切り分けを行います。胸郭の半分を2つのレトラクターで開いたままにします。

上司と下の静脈をローカライズし、スレッドでそれらをタグ付けします。動物の排泄の前に、右心室を識別し、ヘパリンのキログラム当たり1,000国際単位を注入する。注射の直後に、前ループスレッドで上の静脈と下の静脈をリゲートします。

マヌブリウム・シュタルニを切り裂いて気管カニューレに向かって内側の切除術を延長し、両側の気管を組織をつなぐのを離す。気管カニューレの上の気管を切開し、頭蓋骨/尾軸でカニューレをそっと引き上げます。心肺ブロックを収穫するための剥離後、直接デジタル解剖またはスプリングはさみを使用して結合組織を分離し、胸郭から肺を取り除きます。

次に、血管系と食道を解剖する。孤立した肺を胸郭から持ち上げ、ペトリ皿の無菌ガーゼの上に慎重に肺を置きます。アテクサシスを防ぐために、2センチメートルの水柱に設定された正の端の気呼圧で正圧換気を使用して肺を換気する。

房室溝のレベルで心室を心臓から切り取ります。2つの心室を開いた後、右肺動脈を通して肺動脈カニューレを導入し、左心房を通して左心房を通して左心房に入れます。構造の張りを避けるために、肺動脈と左心房の周囲の組織を含む4-0シルク縫合糸でカニューレを固定します。

動脈カニューレを通して生理食塩水の250ミリリットルを注入し、血管床から残りの血液を洗い流す。灌流のセットアップのために、孤立した肺を肺室に慎重に入れる。チャンバーカバーのトランスダクタに気管を取り付け、カニューレ化された容器を灌流システムに接続し、回転式ロックでチャンバーを閉じて固定します。

次に、チャンバーの蓋を取り付け、栓の上にスイッチを入れ、正圧から負圧換気に移行します。1キログラムあたり1分あたり3ミリリットルの流れから始まる人工血液フリーのパーフューズを200ミリリットルで肺に浸透させ、1キログラムあたり毎分5〜5ミリリットルにわたってゆっくりと流れをステップアップする。そして、次の5分間、流れが1キログラムあたり毎分8ミリリットルに達し、続いて5分間1キログラムあたり10ミリリットルの最大フラックスを流す。

毎分30拍の頻度で加湿空気、1キログラムあたり10ミリリットルの潮量、水柱の2センチメートルの終わりの流れ圧力で肺を換気します。ゾーン3の条件を達成するために、10〜15分待ってISO重量測定状態を特徴とする平衡を得て、静脈圧がレジストリ全体で安定していることを確認します。肺の重量が一定のままであり、動脈および左心房圧が安定してゾーン3条件を達成し、最大数の肺血管を開放し、実験中に微小血管床の含有量を維持することを確認する。

電子制御および信号処理のために、呼吸流れ、体重変化、微小血管圧、潮容、血管抵抗、とりわけ、トランスデューサからの信号を統合し、評価システムに表示する複数の中央電子工学装置に登録されていることを確認する。肺代謝および血管透過性に関与する5-HTおよびモノアミンオキシダーゼの濃度を評価した。5-HTとモノアミンオキシダーゼの濃度は、保存の15分後にピークに達し、次の6時間の間に減少しました.

その後、灌流レベルは24時間まで非統計的に有意な増加を示した。5-HTおよびモノアミンオキシダーゼの放出率は、保存の最初の1時間の間に、5-HTレベルがモノアミンオキシダーゼよりも高くなり、内皮細胞および血小板によって再捕獲された後6時間以内に減少し、またモノアミンオキシジダーゼ媒介性化された同化を示した。中性の内ペプチダーゼ活性は9時間で増加し、その後減少し、12〜24時間の間に安定したままでした。

アンジオテンシン変換酵素活性は4時間後に低下し、その後、24時間の間に増加し、安定した状態を保った。毛細血管透過性における肺保存の効果を24時間評価し、肺肺が毛細管濾過係数の進行性増加に見舞われたことを示した。多様な条件下で分離肺灌流系の毛細管透過性における異なる添加剤の効果をチェックし、アトロピンで透過性の最大上昇が観察された。

最も重要な操縦は肺の部屋に正しく肺を置き、輸血の容器を輸血システムに接続する。この技術の影響は、循環物質と薬物検査や様々な肺病理における吸入または浸透物質の相互作用に及ぶ。