2021年10月26日
この作業では、犬の体性感覚系を評価するための機械的および高温熱定量的官能試験の標準プロトコルについて説明しています。感覚閾値は、電子フォンフレイ麻酔計、圧力高度計、およびホットコンタクトサーモデを使用して測定されます。
定量的官能検査またはQSTを使用して犬の感覚閾値を評価するためのこのプロトコルは、研究を標準化するのに役立ち、異なる研究間での貴重な比較を可能にします。この技術は、犬の感覚閾値を測定するための非侵襲的な方法を提供します。当社のプロトコールは、正確で一貫性のあるデータを取得するためのベストプラクティスについて研究者を導くのに役立ちます。
このプロトコルは、手術後や慢性疼痛状態に関連する疾患など、犬の痛みの感覚のメカニズムについての洞察を提供することができます。このテクニックの最も重要な側面は、犬の行動を認識することです。安全で正確な検査を確保するためには、関係者全員が犬の行動と不安レベルに注意する必要があります。
まず、0.9mmの硬質フォン・フレイチップをロードセルにそっと取り付け、ロードセルがハンドピースにしっかりとねじ込まれるようにして、装置のセットアップをアレンジします。次に、ハンドピースのコードをM0チャネルを介して録音デバイスに接続します。次に、録音デバイスの電源を入れ、最大ボタンを押して、犬が加えられた刺激に反応したときに達成される最大力を記録して表示します。
CLRボタンを押して、機器をゼロにします。データを収集し、閾値を測定するには、犬に横になるように指示し、その後、犬を横臥位にさせます。犬をその位置に比較的静止させるために、最小限から中程度の拘束を適用します。
テスト対象の犬の手足を優しく手動でサポートして、手足を床から離さないようにし、犬が手足を引っ張るのを防ぎながら力を加えるための安定したバッキングを提供します。犬が落ち着いてリラックスしたら、手足を70%伸展でテストし、一度刺激を加えます。Von Freyの先端を、テストする領域の皮膚に対して垂直に置きます。
犬が皮膚のフォンフレイ先端の感覚から反射運動を示す場合は、フォンフレイ先端を再適用する前に、犬が再び手足をリラックスさせるのを待ちます。皮膚が反射運動を引き起こさない場合は、フォンフレイチップを適用して測定します。フォン・フレイの先端を毎秒20gで着実に力を加え、犬が手足を引っ込めて発声
するまで続けます。刺激を見るために向きを変えるか、刺激の意識的な知覚を示す他の動きや行動反応を示します。犬が手足を引っ込めたとき、または最大力に達したときに刺激を取り除き、記録装置に表示される最大力を加えて記録します。測定を5回の試行で繰り返し、犬が比較的落ち着いてリラックスした状態で、拘束がないか、または最小限に抑えられている場合は、各測定の間に1分間の余裕を持たせます。
各ステップ間で機器をゼロにするには、CLRボタンを押します。次に、データ収集の容易さを示すために、0 から 5 の実現可能性スコアを記録します。鈍いプローブ圧力アルゴメーターで測定を開始する前に、犬に5分間の休憩を与えてください。
機器をセットアップするときは、小さな鈍いプローブがデバイスにしっかりとねじ込まれていることを確認してください。次に、録音デバイスの電源を入れ、画面にプロンプトが表示されたら最大ボタンを押して続行します。画面上部に単位がグラム単位で表示されるまで単位ボタンを押し、ゼロボタンを押して装置をゼロにします。
次に、前述のように犬を横臥位にして準備し、前述のように閾値を測定します。テスト対象の領域の皮膚に垂直に鈍いプローブを適用して、犬が刺激の意識的な知覚を示す行動反応を示すまで、プローブで毎秒20グラムで着実に増加する力を加えます。犬が手足を引っ込めたとき、または最大力に達したときに刺激を取り除きます。
記録装置から最大加えられた力を記録した後、合計5回の試行で測定を繰り返します。犬が横臥位のままで座ったり、立ったり、QSTの部屋を動き回ったりできるようにして、試験間隔中に快適さを維持します。次に、その後の測定の前に犬を横臥位に交換します。
0 から 5 のフィージビリティ スコアを記録して、データの収集の容易さを示します。ホットサーマルプローブで測定を開始する前に、犬に5分間の休憩を与えてください。実験を始める前に、前に説明したように犬を準備してください。
次に、サーモデをテスト対象の領域のスキンに適用し、テストタブの左下隅にあるスタートボタンをクリックしてテストを開始します。犬が刺激の意識的な知覚を示す動きや行動反応を示した場合、または最大遅延に達した場合は、ストップウォッチを停止すると同時にサーモデを取り外します。引き出しの遅延を記録します。
最初に停止ボタンをクリックし、次に各測定の合間に事前テストボタンをクリックしてサーモデの加熱を停止することにより、合計5回の試行で測定を繰り返します。これにより、ソフトウェアはサーモデを再調整して、次のアプリケーションに備えることができます。0 から 5 のフィージビリティ スコアを記録して、データの収集の容易さを示します。
代表的な分析は、健康な痛みのない犬のグループからの機械的および高温のQSTデータをまとめたものです。電子フォンフレイ麻酔計の感覚閾値測定からのデータは、感覚閾値に対する体重の有意な影響を示しませんでした。体重の同様の影響は、鈍いプローブによる圧力アルゴメーターの感覚閾値からのデータでも見られました。
一方、ホットサーマルプローブの感覚潜時について収集されたデータは、感覚潜時に対する体重の有意な影響を示しました。機械的QSTと高温熱QSTの全体的な平均、標準偏差、および感覚閾値の範囲は、健康な無痛犬の同じグループにまとめられました。これは、これらの技術を使用する将来の研究者に参照値を提供します 最も重要であるのは、犬によって異なるように見える可能性のある刺激の意識的な知覚を示す犬の行動反応を確実に特定することです。
定量的な官能検査に加えて、検証済みの飼い主アンケートや感情反応性検査を通じて行動情報を収集することで、犬の感情状態を包括的に評価することができます。
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本研究では、機械的刺激および熱刺激を用いた方法で体性感覚系を評価するための、犬における定量的感覚検査(QST)の標準プロトコルを提示します。電子フォン・フライ・アネステシオメーターや圧力アルゴメーターなどのツールを用いることで、本プロトコルは評価を標準化し、さまざまな研究間での比較を可能にすることを目的としています。
犬における定量的感覚検査(QST)は、体性感覚機能を評価するための標準化された非侵襲的なアプローチを提供し、トランスレーショナルな疼痛研究および比較モデルの開発を支援します。基準となる感覚閾値と行動エンドポイントを確立することで、鎮痛剤候補のより予測的な前臨床評価や、獣医学および比較神経科学のパイプラインにおけるメカニズム的なリスク低減が可能になります。標準化されたQSTプロトコルは、研究間および施設間でのデータの比較可能性を容易にし、初期探索およびトランスレーショナル研究におけるポートフォリオの意思決定を強化します。
QSTは、痛みおよび感覚障害のパイプラインにおけるターゲットバリデーション、リード最適化、およびトランスレーショナルバイオマーカー開発のための機能的リードアウトとして、創薬から前臨床までの連続的なプロセスに組み込まれています。