黄色ブドウ球菌内在化と抗菌性化合物の細胞内有効性を研究するための酵素保護アッセイの改善

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2021年9月8日

10.3791/62903-v

2021年9月8日

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Josselin Rigaill^*¹^,² , Estelle Audoux^*¹ , Killian Rodriguez¹ , Aurélien Peyron¹ , Philippe Berthelot¹^,³ , Jérôme Josse⁴^,⁵ , Frédéric Laurent⁴^,⁵ , Robin Caire¹ , Paul O. Verhoeven¹^,²

¹CIRI, Centre International de Recherche en Infectiologie, GIMAP team, University of Lyon, INSERM U1111, CNRS, UMR5308, ENS Lyon, UCBL1, University of St-Etienne, France, ²Department of Infectious Agents and Hygiene, University Hospital of St-Etienne, St-Etienne, France, ³Department of Infectious Diseases, University Hospital of St-Etienne, St-Etienne, France, ⁴CIRI, Centre International de Recherche en Infectiologie, Staphylococcal Pathogenesis team, University of Lyon, INSERM U1111, CNRS UMR5308, ENS Lyon, UCBL1, University of Lyon, Lyon, France, ⁵Department of Bacteriology, Institute for Infectious Agents, Hospices Civils de Lyon, Lyon, France

^* These authors contributed equally

このプロトコルは、 黄色ブドウ球菌 の内在化の程度とヒト宿主細胞内で生き残る能力、ならびに抗菌性化合物の細胞内有効性を研究する方法を説明することを目的とする。

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細胞内細菌生存率

抗菌薬有効性

非専門的食細胞

リゾスタフィン処理

プロテイナーゼK不活化

細胞内菌数の定量

A549上皮細胞

オルガノイド感染モデル

Chapters in this video

0:05

Introduction

0:41

Determination of Cell Density and Viability

1:33

Preparation of the Bacterial Suspension

2:32

Cell Inoculation

3:03

Quantification of Intracellular Bacteria with Improved Enzyme Protection Assay (iEPA)

4:44

Results: Intracellular Staphylococcus aureus Load in Epithelial Cells

5:54

Conclusion

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