マウスにおける心筋梗塞の誘導のための改良簡便法

本報告では、マウスにおける心筋梗塞の誘発に関する独自のアプローチを提示する。現在の方法は簡単で時間を節約でき、ほとんどの検査室ですぐに見られる手術用チューブと機器を使用します。心筋梗塞モデルの確立は、心筋梗塞後のリモデリングの過去のメカニズムと新規治療法のバリエーションを調査するための前提を提供します。

脱毛クリームをマウスの胸に塗り、1分間待ちます。次に、脱毛クリームと髪を濡れたガーゼでやさしく拭き取ります。マウスを手術台に仰臥位で固定します。

本文に記載されているように手術部位を消毒します。次に、消毒された領域の周囲に滅菌ドレープを置きます。剣状突起と脇の下をつなぐ線に沿って0.5センチの皮膚を切り、鉗子を使って大胸筋と小胸筋を鈍く分離します。

マイクロモスキート止血剤を使用して4番目の肋間スペースを開きます。左手の人差し指で心臓を第4肋間腔に押し込むことで、心臓を外在化します。左手で心臓を固定し、左前下行枝をその起点から3mmの6/0縫合糸で結紮します。

心臓を胸腔にすばやく戻します。胸腔を軽く押して、胸腔から空気を排出します。術後の疼痛管理のために、術後最大72時間、4〜6時間ごとにブプレノルフィンを皮下注射します。.

マウスを加熱パッドの上に置いて、麻酔から回復します。安楽死させたマウスを手術台に仰臥位で固定します。上腹部を約3〜4センチ切開します。

胸腔の両側から肋骨を切り取り、横隔膜を取り除きます。脳室内注射により、10ミリリットルの低温4°C1X PBSで心臓を灌流します。次に、大動脈根を切り落として心臓を採取し、すぐに摂氏マイナス80度で保管します。

凍った心臓を氷の上でカミソリの刃を使って厚さ1ミリの部分にスライスします。調製したハートスライスを、1X PBS1本に溶解した1%TTC溶液中で、摂氏37度で10〜15分間インキュベートします。次に、デジタルカメラを使用してスライスを撮影します。

冠動脈結紮術後、TTC染色解析により、心筋梗塞の誘発に成功し、心筋梗塞後の瘢痕サイズの経時的変化が示されました。生存解析の結果、雄および雌のC57BL/6Jマウスにおいて心筋梗塞後7日以内の明白な死亡率が示された。心室破裂は、心筋梗塞後の死亡の一般的な理由であった。

心筋梗塞後の心エコー検査評価では、収縮機能障害と心室リモデリングの誘導が成功したことが示されました。心臓を外在化しようとするときは、まず胸腔を押さえず、抵抗に追従して、加重された賞賛に対して方向を調整する必要があることを示します。この手順に続いて、ウイルスベクターまたは細胞の心筋内注射を実施して、心臓病の問題における遺伝子治療または細胞療法の有効性を試験することができる。