マウス頸部異所性心臓移植モデルのための修正カフ法

マウス心臓移植モデルは、心臓同種移植片の免疫学的および傍矢状拒絶メカニズムの調査に役立ちます。この理解は、患者の長期生存を改善するための独自のアプローチを開発するのに役立ちます。この子宮頸部移植手術は、カフ法を用いて縫合せずに行われます。

したがって、血管吻合の複雑さを軽減し、血液供給および下半身の静脈逆流との干渉を回避します。手順を実演するのは、私たちの研究室の外科医であるXin Mao博士です。まず、レシピエントマウスを手術台の加熱パッドに置き、手術部位の毛を剃ります。

手術部位を消毒した後、右下顎角から尾端まで頸部正中線と平行に1.5〜2センチの切開を行います。電気凝固装置とマイクロ鉗子を使用して、右外頸静脈の約1センチメートルを解剖します。近位端の静脈をアトルアマティック微小血管クランプでクリップし、遠位端で結紮します。

静脈の遠位端を、斜角端と表面溝のある22ゲージのポリウレタンとげのある袖口に通します。微小血管クランプを使用してカフのハンドルで静脈を固定します。8-0を削除します遠位端の結紮縫合糸、表面のとげで引っ掛けられたカフの上に内腔を裏返し、表面の溝に10-0の外科用縫合糸で固定します。

右舌下腺を切除して心臓移植片を移植するための窩を形成し、顎下腺の右葉と右胸鎖乳突筋を予約します。マイクロ鉗子を使用して右総頸動脈を約1センチメートル解剖し、近位端の非外傷性微小血管クランプで動脈をクリップします。動脈を結睭化して切断する。

動脈の遠位端を、斜角の端と表面に溝がある26ゲージのポリウレタン製のとげのある袖口に通します。微小血管クランプを使用して、カフのハンドルで動脈を固定します。遠位端の結紮縫合糸を取り外し、内腔をカフの上で裏返しにし、10-0外科用縫合糸で表面的なとげと溝で固定します。

レシピエントの血管を準備した後、血栓症を防ぐために、ミリリットルヘパリン生理食塩水あたり100国際単位を血管に落とします。その後の移植のために、頸部切開部を湿った生理食塩水ガーゼで覆います。電気かみそりを使用して腹毛を剃ります。

手術部位を消毒した後、恥骨結合から剣状骨下までの正中線に沿って腹部を切開し、開創器で切開部位を広げます。電気凝固装置と微小鉗子を用いて腹部大動脈と下大静脈の1センチメートルを解剖し、下大静脈からヘパリン1ミリリットルあたり250国際単位を添加した生理食塩水1ミリリットルを注入してヘパリン化を行います。腹部大動脈と下大静脈を切除します。

外科用ハサミを使用して両側の前腋窩線に沿って胸部を切除し、胸壁を分離し、上大静脈を8-0で結紮します。外科用縫合糸。肝上下大静脈に頭皮針を挿入します。次に、肝上下大静脈から頭皮針に1ミリリットルあたり100単位のヘパリンを添加した氷冷生理食塩水を注入し、血液の色が薄くなるまでドナーの心臓を大量に注入します。

ドナー心筋を保護するために、大動脈弓から2〜3ミリリットルの氷冷ヒスチジン-トリプトファン-ケトグルタル酸溶液でドナー心臓を再灌流します。上大静脈と下大静脈と肺静脈を5-0の外科用縫合糸で結紮します。分岐する前に、ドナー大動脈と肺動脈を解剖して切断します。

次に、上大静脈と下大静脈と肺静脈を分割して、ドナーの心臓を取り除きます。ドナーの心臓をレシピエントマウスの頸部ポケットに逆さの位置で移植します。エバートレシピエント頸静脈でカフをドナー肺動脈の内腔に引き込み、エンドツーエンドの吻合を行います。

吻合を固定するために、10-0外科用縫合糸を通して表面の溝を使用してカフを結紮します。レシピエント頸動脈へのドナー大動脈のエンドツーエンドの吻合にも同様の手順を採用します。頸静脈の非外傷性微小血管クランプを解放し、続いて頸動脈を解放して、ドナーの心臓を再灌流します。

心臓移植片を固定し、移植片のねじれを防ぐために適切に縫合します。5-0ポリアミドモノフィラメント縫合糸を使用して、連続縫合糸で頸部切開を閉じます。このマウス頸部異所性心臓移植モデルを使用すると、レシピエントマウスの生存率は約95.2%であり、移植後8日以内にすべての心臓同種移植片が失われました。

対照的に、すべての同質遺伝子心臓移植は4週間を超えて生存しました。溝と袖口は、血管の繰り返し操作を避け、エバートされた血管をよりよく固定します。この手術における血管吻合のための修正カフ法は、異なる臓器移植動物モデルにおける別の吻合にも適用可能である。