Name: 眼表面疾患の治療のための多血小板血漿ライセート (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: 学ぶ眼表面疾患治療のための多血小板血漿ライセート調製法。ドナー由来血小板から成長因子を含む製剤を調製し、長期保存と品質管理のプロトコルを確立する方法を解説します。

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著者らは、ドナー由来の血小板濃縮物を提供してくれた「カサ・デル・ドノ・ディ・レッジョ・エミリア」に感謝したい。

成長因子の定量的評価に使用されるPRP-Lは、AUSL-IRCCSディレッジョエミリアで実施され、2019年1月10日にエリアヴァスタエミリアノルド倫理委員会によって承認された、再生目的のPRP製品の特性評価に関するより広範な研究内で収集されました(プロトコル番号2019/0003319)。ドナーは、ヘルシンキ宣言に従ってインフォームドコンセントを行いました。ドライアイ症候群の症状を監視するために臨床医によって日常的に使用されている眼表面疾患指数(OSDI)質問票の集計された匿名データを収集するために倫理的承認は必要ありませんでした。図 1A は、従ったプロトコルの概要を示し、 図1B の写真は、手順の主なステップを示しています。
1.多血小板血漿(PRP)収集
<ol><li>PRPアフェレーシス<ol><li>このプロトコルでは、イタリアの法律に従って血小板ドナーを選択します:血小板ドナーは18〜65歳で、正常圧と血球数のパラメーターと血小板数が180 x 109 血小板/ L23以上である必要があります。適格なドナーは、寄付前1週間以内に抗血小板薬または抗凝固薬を服用することはできません。</li>
		<li>製造業者の指示および国内法23に従って、自動採血システムを用いて血漿血小板アフェレーシスを行い、1単位の単一ドナー多血小板血漿(PRP)を得た。アデニンクエン酸デキストロース溶液A(ACD-A)抗凝固剤溶液でPRPを収集します。 注:血小板アフェレーシスは連続的な手順で行われます。収集時間は40分から90分の範囲です。ドナーに送達されるACDの量と手順の時間は、ドナーの特性、例えば、ヘマトクリット値および針ゲージに依存する。</li>
	</ol></li>
	<li>PRPユニットの特性 注:次のステップは通常、血漿血小板アフェレーシス手順中に自動採血システムによって自動的に実行されます。メーカーの取扱説明書をご確認ください。<ol><li>アフェレーシスによって収集されたPRPユニットを、保存時間全体でpH>6.4を維持するために必要な最小量の残留血漿を含む適切な量の保存液に再懸濁し、抗凝固剤溶液の正味平均最終容量180 mL(約40 mL)まで再懸濁します。. 注:イタリアの法律によると、品質管理は血小板(PLT)数が少なくとも2.0 x 10 11 PLT /ユニットであり、残留白血球が1 x10 6 細胞/ユニット未満であることを評価する必要があります。</li>
		<li>ロイコデプレットし、照射したPRPを血小板振盪機で22°C±2°Cで最大5日間保存してから、さらに操作します23。</li>
	</ol></li>
	<li>PRP希釈<ol><li>PRP希釈を開始する直前に、メインバッグからピアススパイクを通して採取したサンプルを使用して、血球計算盤でPLTカウントを実行します。 注意: クラスIIバイオハザードフードの下で無菌状態で次のステップを実行します。手順中は、個人用保護具(白衣、手袋、ゴーグル)を着用してください。</li>
		<li>PRPを適切な量の滅菌0.9%NaClで最終濃度0.32 x 10 9 ± 0.03 x10 9 PLT / mLに希釈し、末梢血中の平均PLT濃度をシミュレートします。</li>
		<li>血液バッグのピアススパイクを利用して、希釈したPRPを300 mLの空の収集バッグに分割して、正味容量190 mL /バッグに到達します。</li>
		<li>残留希釈PRP(通常1 mL)のアリコートを使用して、微生物汚染の可能性を評価する品質管理を実行します。微生物学研究所で製造元の指示に従って無菌アッセイを実行します(材料表を参照)。 注:少量の血液検体から好気性微生物(主に細菌と酵母)の定性的培養と回収を行うことができる好気性血液培養に固有の培養バイアルを使用してください。</li>
		<li>解凍する前に、希釈したPRPバッグを-80°Cで最大2か月間保管してください。</li>
	</ol></li>
</ol>2.多血小板血漿溶解液(PRP-L)製剤
<ol><li>解凍<ol><li>解凍手順を開始する前に、温浴が37°Cに設定されていることを確認してください。 PRPバッグを温かいお風呂に入れ、完全に解凍するまで待ちます。</li>
	</ol></li>
	<li>PRP-L コレクション<ol><li>PRPバッグを3000 x g で室温で30分間遠心分離します。 注意: 次のステップは、クラスIIバイオハザードフードの下で無菌状態で実行する必要があります。</li>
		<li>トランスファーバッグのピアススパイクを利用して、遠心分離バッグを空の滅菌300mLトランスファーバッグに接続します。破片を避けながら、PRP-L上清を慎重に新しいバッグに移します。可能であれば、バッグプレスを使用してください。</li>
		<li>PRP-Lユニットの接続チューブをバッグシーラーでシールします。</li>
	</ol></li>
	<li>PRP-L アリコート 注:190 mL PRPを含む始動ユニット(ステップ1.3.3を参照)は、2つの点眼キットを充填するのに十分です(血液成分からの点眼剤の適用と保存に使用される特定の医療機器の詳細については、 材料の表を参照してください)。点眼薬キットは、事前に接続されたシリンジの上にストリングバイアル全体を配置し、抗菌フィルターを除外するために活栓の中央の矢印を左に向けて、クラスIIフードの下で開く必要があります。<ol><li>滅菌シリンジで30〜60mLのPRP-Lを収集し、シリンジを充填ラインのルアー/ロック接続にリンクします。</li>
		<li>製造元の指示に従って、活栓を半回転させて、PRP-L含有シリンジと事前に接続されたシリンジの間のラインを開きます。事前に接続されたシリンジにPRP-Lを充填します。</li>
		<li>PRP-Lシリンジを外し、ルアー/ロック接続のチューブキャップを閉じて、活栓を元の位置に回転させます。点眼キットシリンジを使用して、バイアルにPRP-Lを充填します。</li>
		<li>手順 2.3.1.-2.3.3 の手順を繰り返します。すべてのアプリケーターバイアルが満たされるまで。各アプリケーターが適切に充填されていることを確認してから、バッグシーラーで個別に密封します。</li>
		<li>新しい点眼キットで手順を繰り返します。</li>
		<li>微生物汚染の可能性を評価するために、残留希釈PRP-Lの少量のアリコートを使用してください(ステップ1.3.4を参照)。 注意: 液体が誤ってストリングの端にある抗菌フィルターに到達した場合、吸引シリンジが抵抗に反対し、充填を妨げる可能性があります。充填サイクルを続けるには、ストリングの端にある抗菌疎水性フィルターからストリングの端部を約5/6アリコート持ち上げます。この位置で、すでに空気で満たされている新しい滅菌注射器(30 mL容量)を使用します。抗菌フィルターのメスルアー/ロックを接続し、シリンジのプランジャーを強く繰り返し押して、血液成分の残留物をすべて取り除き、抗菌フィルターの膜に液体がないようにします。シリンジを取り外し、残りのバイアルを満たします。</li>
	</ol></li>
	<li>PRP-L ストレージ<ol><li>各アプリケーターに適切なラベルを付け、ビニール袋に入れます。ドナーの血液型を強調するように注意しながら、ビニール袋にもラベルを付けます。</li>
		<li>イタリアの法律23 およびガイドライン24に従って、患者の割り当て前に最大24か月間-80°Cで保管してください。</li>
	</ol></li>
</ol>3. PRP-Lディスペンセーション
<ol><li>好ましくはPRP-L血液型を一致させることによって患者割り当てを行う。クールボックスを使用してPRP-Lアプリケーターバイアルを配送し、各アプリケーターバイアルに約45滴に相当する1.45mLのPRP-Lが含まれていることを確認します。アプリケーターバイアルは、-15°Cで最大1か月間患者の自宅で保管できることを患者に指示します。</li>
</ol>

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<li>De Paiva, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+TGF-%CE%B2+signaling+improves+ocular+surface+epithelial+disease+in+experimental+autoimmune+keratoconjunctivitis+sicca%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Disruption of TGF-β signaling improves ocular surface epithelial disease in experimental autoimmune keratoconjunctivitis sicca.</a> PLoS One. 6 (12), 29017(2011).</li>
</ol>

著者は利益相反を宣言しません。

近年、眼の表面病理に対する血小板ベースの製品の臨床使用が増加しているが、それらの普及は科学的堅牢性の欠如によって妨げられている。これは主に、ドナーソースと調製プロトコルの幅広い異質性によって引き起こされ、それらはしばしば完全に開示されていないか、それらが調剤される目的のために特別に設計されていません。特に、アフェレーシスによって収集された血小板ベースの製品に関する情報はまだ不足しています。したがって、本研究の目的は、DEDの治療のためのアフェレーシスによって得られた多血小板血漿溶解物(PRP-L)の段階的な処理を説明することでした。
PRP-Lは、他の血液ベースの製品よりも多くのGFを含むため、点眼剤の製造に最適な供給源であり22、血清またはPRPと比較した場合、その製造または保管は安価で簡単です。PRP-Lを得るために、血小板を溶解(通常は1回以上の凍結および融解サイクルを経て)して、その内容物を放出する。このプロセスは、組織再生を刺激する活性分子に富む溶液を保証する22,26<sup...

血液由来製品は、創傷ケア1、顎顔面および整形外科手術、およびドライアイ疾患(DED)3などのさまざまな眼表面疾患2の治療に広く使用されています。DEDでは、涙液膜の恒常性は、涙液の生成および眼の表面の完全性に関与するさまざまな要因の異常な機能の結果として損なわれます4,5。
DEDは、原因と重症度の不均一性を特徴とします6,7,8 そして、老化、性別9、コンタクトレンズ、局所または全身薬10、またはシェーグレン症候群10のような既存の状態などのさまざまな要因の結果である可能性があります。軽度の症状にもかかわらず、DEDは世界中の何百万人もの人々に影響を及ぼし、生活の質と医療システムにも影響を及ぼします6。
この病状に対して多くの治療法が報告されていますが、最も効果的な解決策についてはまだコンセンサスがありません12。今日まで、人工涙液は涙液膜の水性組成物を回復することを目的とした治療の第一線であるが、これらの代替物は天然涙液の主要な生物学的に活性な溶質を含まない6,11。血小板ベースの製品は、人工涙液の有効な代替品12,13と考えられていますが、その臨床効果、使用の推奨事項、および調製方法はまだ議論の問題です3。
血液ベースの製品は、代謝物14、タンパク質、脂質、ビタミン、イオン、成長因子(GF)、抗酸化化合物11、および浸透圧(300 mOsm / L)11の点で同様の組成を涙と共有します。それらの成分の相乗的活性を通して、それらは角膜上皮の再生を促進し、炎症性サイトカインの放出を阻害し、そして結膜における杯細胞の数およびムチンの発現を増加させる2,3。
これまでのところ、眼科用血液ベースの製品の不均一性が文献に記録されています。これらの製品は、献血者の起源、すなわち自家または同種、ならびに血液源、すなわち末梢血、臍帯血、血清、または血小板に従って分類することができる。
自家製品は最も普及していましたが3、同種異系製品は、より高い有効性と安全基準15を保証し、コストの大幅な削減を保証するため、現在、好ましい選択肢になりつつあります16,17。実際、以前の研究では、自己免疫疾患および/または全身性疾患の患者から得られた血液ベースの製品が、品質および機能の変化を示す可能性があることが証明されています6,16,17。血清ベースの点眼薬が最も普及しているという事実にもかかわらず、血小板ベースの製品は、有意なレベルの有効性を維持しながら容易に調製できるため、最近有効な代替品として確認されつつあります3,11。現在入手可能な血小板ベースの製品は、多血小板血漿(PRP)、多血小板血漿溶解物(PRP-L)、および成長因子に富む血漿(PRGF)に分けることができます3。
その中でも、PRP-Lは長寿命の冷凍品であるという利点があります。PRP-Lは、アフェレーシス、バフィーコート、さらには期限切れの血小板(PLT)18,19から調製することができ、無駄を大幅に削減します。アリコートは、-80°Cの輸血センターで数ヶ月間、または-15°Cの患者の自宅で短期間保管することができます。
PRP-LはGFが非常に豊富であり、眼の表面再生を刺激することが証明されています12,20,21。それにもかかわらず、この分野で報告された臨床研究はごくわずかであり、それらのすべてが自家源を使用していました3,22。PRP-Lは、その調製、調剤、および保管に関する標準化されたガイドラインがないため、眼表面疾患の治療に日常的に使用する前に、さらなる検証と特性評価が必要です3。
ここでは、イタリアのAUSL-IRCCSディレッジョエミリアの輸血医学ユニットで使用されるPRP-Lの製造、およびDED患者への調剤に関する詳細なプロトコルが共有されています。私たちは、科学界が標準的な調製方法を開発するのを支援することを目指しており、これにより、世界的な研究や臨床アプローチにおける均質性と一貫性が向上する可能性があります。

<table><tbody><tr><td>Equipments</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seal Mobilea II</td><td>Fresenius Kabi(ドイツ</td><td></td>) <td>バッグシーラー</td></tr><tr><td>HeraSafeフード</td><td>ヘレウス・インスツルメンツ(ドイツ</td><td></td>) <td>Class II バイオハザードフード</td></tr><tr><td>MCS+ 9000 Mobile Platelet Collection System</td><td>Haemonetics(イタリア)</td><td></td><td>血小板、赤血球、血漿、または混合血液成分を提供するための自動血漿および多成分収集装置</td></tr><tr><td>血小板シェーカー、PF396i</td><td>ヘルマー、米国</td><td></td><td>血小板シェーカー</td></tr><tr><td>Raycell X線血液照射器</td><td>MDS ノルディオン、カナダ</td><td></td><td>X線血液照射器</td></tr><tr><td>ROTIXA 50RS</td><td>Hettich Zentrifugen、ドイツ</td><td></td><td>高速酸素分離機</td></tr><tr><td>シスメックス XS-1000i</td><td>シスメックス ヨーロッパ GMBH ドイツ</td><td></td><td>血小板数計算計算計</td></tr><tr><td>温浴 WB-M15</td><td>Falc Instruments(イタリア</td><td></td><td>) 温浴</td></tr><tr><td><ストロング>素材</ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ACD-A 抗凝固剤 A</td><td>Fenwal Inc., USA</td><td>DIN 00788139</td><td>血小板アフェレーシス (1000 ml)</td></tr><tr><td>BD BACTEC Peds Plus/F 培養バイアル</td><td>BDBiosciences, USA</td><td>BD 442020</td><td>無菌アッセイ</td></tr><tr><td>BD BACTEC Peds Plus/F 培養バイアル</td><td>BD Biosciences, USA</td><td>442020</td><td>無菌アッセイ用バイアル2</td></tr>本以上 <tr><td>BD Luer Lok Syringe</td><td>BD Plastipack, USA</td><td>300865</td><td>少なくとも4本の滅菌シリンジ(50ml)</td></tr><tr><td>Bio-Plex Human Cancer Panel 1</td><td>BioRad Laboratories, USA</td><td>171AC500M</td><td>PDGFアイソフォーム評価</td></tr><tr><td>用標準パネルBio-Plex Human Cancer Panel 2</td><td>BioRad Laboratories, USA</td><td>171AC600M</td><td>EGF評価用標準パネル</td></tr><tr><td>Bio-Plex MAGPIX Multiplex Reader</td><td>BioRad Laboratories, USA</td><td>Magpix</td><td>この装置は、機能化された磁気ビーズを使用した複数のイムノアッセイを可能にします。</td></tr><tr><td>Bio-Plex Pro TGF-b Assay</td><td>BioRad Laboratories, USA</td><td>10024984</td><td>TGFb アイソフォーム評価のためのセットとスタンダード</td></tr><tr><td>BioRet</td><td>ARIES s.r.l., Italy</td><td>A2DH0020</td><td>血液バッグ用のピアススパイクが少なくとも4本</td></tr> 採<tr><td>血チューブ</td><td>BD Vacutainer, USA</td><td>367835</td><td>血小板カウントを行うために必要チューブ1</td></tr><tr><td>本目薬キット。col medical device for application and preservation of eye drops from haemocomponents</td><td>Biomed Device s.r.l., Italy</td><td>COLC50</td><td>Eye drops kit.各PRPユニットに少なくとも2つのキットを採取</td></tr><tr><td>ヒトがん PDGF-AB/BB セット 1x96well</td><td>BioRad Laboratories, USA</td><td>171BC511</td><td>PDGFアイソフォーム評価用セット</td></tr><tr><td>Human Cancer2 EGF Set 1x96well</td><td>BioRad Laboratories, USA</td><td>171BC603M</td><td>EGF評価用セット</td></tr><tr><td>NaCl 0.9% 滅菌溶液</td><td>Baxter S.p.A., Italy</td><td>B05BB01</td><td>1000 ml</td></tr><tr><td>OSDI Questionnaire</td><td>Allergan Inc., USA</td><td>OSDI</td><td>Ocular Surface Disease Index Questionnaire</td></tr><tr><td>Piercing spike</td><td>BioRet ARIES s.r.l., Italy</td><td>BS051004</td><td>Spike Platelet</td></tr><tr><td>Additive Solution A+ T-PAS+</td><td>TERUMO BCT Inc., Italy</td><td>40842</td><td>濃縮血小板用防腐剤溶液 (1000ml)</td></tr><tr><td>Software Excel</td><td>Microsoft, USA</td><td>Excel</td><td>Data analysis software</td></tr><tr><td>Teruflex Transfer bag 1000 ml</td><td>TERUMO BCT Inc., Italy</td><td>BB*T100BM</td><td>1 for PRP dilution</td></tr><tr><td>Teruflex Transfer bag 300 ml</td><td>TERUMO BCT Inc., Italy</td><td>BB*030CM</td><td>PRPユニットごとに少なくとも6</td></tr></tbody></table>個 回収

眼表面疾患の治療のための多血小板血漿ライセート

Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases

さまざまな眼の表面疾患は、血液由来の点眼薬で治療されます。それらの使用は、眼の表面再生を促進する代謝産物および成長因子含有量のために臨床診療において導入されている。血液ベースの点眼薬は、さまざまな供給源(すなわち、全血または血小板アフェレーシスの寄付)から、および異なるプロトコル(例えば、異なる希釈および凍結/解凍サイクル)で調製することができる。この変動性は、臨床プロトコルの標準化を妨げ、その結果、臨床効果の評価を妨げます。方法論的手順を詳述し、共有することは、共通のガイドラインの定義に貢献する可能性がある。過去数年間、同種異系製品は、より高い有効性基準を保証するため、自家治療の代替として普及しています。その中で、多血小板血漿溶解物(PRP-L)点眼剤は簡単な製造手順で調製されます。イタリアのAUSL-IRCCSディレッジョエミリアの輸血医学ユニットでは、PRP-Lは血小板アフェレーシスの提供から得られます。この製品は、最初に0.9%NaClで0.3 x 109 血小板/ mL(1 x 109 血小板/ mLの平均濃度から開始)に希釈されます。希釈された血小板は凍結/解凍され、その後、破片を除去するために遠心分離されます。最終容量を1.45 mLアリコートに分割し、-80°Cで保存します。 患者に調剤される前に、点眼薬は無菌性についてテストされます。患者は血小板溶解物を-15°Cで最大1か月間保存できます。成長因子組成も無作為に選択されたアリコートから評価され、平均値がここで報告されます。

血清由来の点眼薬(眼表面疾患の治療に最も頻繁に使用される血液ベースの製品)を使用する理論的根拠は、循環血小板にほぼ完全に由来するGFの含有量にあります。PRPには、末梢血血清と比較して有意に多くの血小板(およびその結果として血小板由来GF)が含まれており、0.15 x 10 9-0.45 x10 9 PLT / mLの範囲です。.イタリアの法律によると、PRP単位の血小板数は少なくとも0.9 x 10 9-1x 10 9 PLT / mLである必要があります。したがって、血清点眼薬の有効性をシミュレートする製品を得るには、ライセート調製前にPRPを生理的血小板含有量に希釈する必要があります。
それにもかかわらず、組織修復は主に血小板由来GFによって引き起こされるため、PLTカウントだけでは眼表面疾患の効果的な治療に誤解を招く可能性があります。血液由来の点眼薬で最も一般的に治療される眼疾患であるDEDでは、涙液膜の生成と恒常性が損なわれます。したがって、DEDの治療のための血小板ベースの製品も、涙...

血小板溶解物は、眼の表面疾患の治療のための新たなツールを表しています。ここでは、血小板ドナーから採取した血小板溶解液の調製、分注、保存、および特性評価の方法を提案する。

Various ocular surface diseases are treated with blood-derived eye drops. Their use has been introduced in clinical practice because of their metabolite ...

PRPライセートは、眼の表面疾患の治療のための新しい血小板ベースの製品です。ここでは、共通の方法論的ガイドラインの開発をカバーするために、生産プロトコルを共有し、詳細に説明したいと思います。ハロージェニック製品は、自家治療の代替として普及しています。彼らはより高い有効性基準を保証するので。PRPライセートには高濃度の成長因子が含まれています。その生産は安価で簡単で、長期間保存することができます。目や顔の病気の治療のための血液製剤の使用は、文献に大部分が文書化されています。それにもかかわらず、彼らのアプリケーションはまだコンセンサスを見つけていません。その理由の1つは、それらの製造に使用される方法の多様性です。私たちの目的は、共通の方法論を開発するためにプロトコルを共有することです。まず、メインバッグからピアススパイクを通して採取したサンプルを使用して、血膀胱計で血小板数を実行します。多血小板血漿を適切な量の滅菌0.9%塩化ナトリウムで希釈する。希釈した多血小板血漿を300ミリリットルの空の収集バッグに分割して、バッグあたり190ミリリットルの正味容量に到達します。残留希釈多血小板血漿のアリコートを使用して品質管理を行い、微生物汚染の可能性を評価します。微生物学研究所で試験する製造業者の指示に従って無菌アッセイを準備します。希釈した多血小板血漿バッグを摂氏マイナス80度で最大2か月間保管してから解凍します。温浴が摂氏37度に設定されていることを確認してください。多血小板血漿バッグを温浴に入れ、完全に解凍するまで待ちます。多血小板血漿バッグを3000倍Gで室温で30分間遠心分離します。トランスファーバッグのピアススパイクを利用して、遠心分離バッグを空の滅菌300ミリリットルのトランスファーバッグに接続します。破片を避けながら、PRPライセート上清を新しいバッグに慎重に移します。PRPライセートユニットの接続チューブをバッグシーラーでシールします。滅菌シリンジで30〜60ミリリットルのPRPライセートを収集し、シリンジを充填ラインのルアーロック接続にリンクします。製造元の指示に従って、活栓を半回転させて、PRPライセート含有シリンジと事前に接続されたシリンジの間のラインを開きます。事前に接続されたシリンジにPRPライセートを充填します。PRPライセートシリンジを外します。ルアーロック接続のチューブキャップを閉じ、活栓を元の位置に回転させます。点眼キットシリンジを使用して、バイアルにPRPライセートを充填します。各アプリケーターが適切に充填されていることを確認してください。次に、バッグシーラーで個別に密封します。新しい点眼キットで手順を繰り返します。少量の残留希釈PRPライセートを使用して、微生物汚染の可能性を評価します。各アプリケーターに適切なラベルを付け、ビニー

platelet-rich-plasma-lysate-for-treatment-of-eye-surface-diseases

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

ヒト血小板溶解液は、増殖因子や細胞培養における強力なサプリメントの豊富な情報源となります。このプロトコルは、多血小板血漿から始まるいくつかの凍結融解サイクルを実行し、血小板の断片を枯渇させることによってヒト血小板溶解物の大規模なプールを準備するプロセスを示します。...

動物の無血清ヒト幹細胞培養のための効率的なサプリメントとしてプールしたヒト血小板可溶化物（pHPL）の調製

このビデオでは、血小板数のスクリーニング、採血と遠心分離、血小板の単離による高品質の多血小板血漿(PRP)の調製を実演しています。このPRPは、組織の再生と治癒の治療用途に使用されます。...

ヒト末梢血からの多血小板血漿の調製

インプラント関連感染は重要な臨床合併症である。この研究は、インプラント関連感染を防ぐために、多血小板血漿（PRP）を用いたアプローチを説明し、一定の血小板濃度でPRPを調製するためのプロトコルを提示して、PRPの新たに同定された抗菌性や抗菌性を調べるための関連プロトコルを報告...

感染を防ぐための新しいアプローチとして、PRP：準備と<em&gt;インビトロ</emPRPの&gt;抗菌特性

白血球血小板リッチフィブリン(L-PRF)は、FDAが承認した自家血小板濃縮物の調製物で、独自のフィブリン構造、濃縮血小板、豊富な成長因子を備えています。ここでは、L-PRFのチェアサイド生成のプロトコルを提示するとともに、一軸試験や縫合糸保持強度試験などの機械的特性を評価します。...

白血球、血小板リッチフィブリン、新規生体材料の特性評価

膝変形性関節症は整形外科でよく見られています。多血小板血漿注入、準備、手順、評価など全体膝変形性関節症治療の過程を詳しく紹介します。...

準備・手順・膝変形性関節症の治療における多血小板血漿注入の評価

このプロトコルは、100%自家線維芽細胞培養システムにおける細胞のin...

in vitroヒト線維芽細胞増殖を促進するための自己多血小板血漿の産生

非ヒト霊長類(NHP)は、解剖学的および遺伝的類似性によるヒトの細胞疾患治療を研究するための理想的なモデルである。本稿では、NHP眼における網膜色素上皮細胞の脳下移植法と、黄斑操作に伴う術中合併症を予防するための戦略を記載する。...

ヒト以外の霊長類モデルにおける変性網膜疾患の網膜色素上皮移植

この記事では、プロセスを簡素化し、自家コンディショニング血清(ACS)の調製をより安価にするプロトコルについて説明します。特別な注射器や表面コーティングされたガラスビーズは必要ありません。さらに、修飾ACS(mACS)は、マウス眼の角膜創傷治癒において、...

改変自家馴化血清の作製とマウス角膜上皮における治癒能の ex vivo 評価

凝固促進剤の血小板形成は、血栓症のリスク増加と相関しています。.ここに提示されるのは、ヒトの血液から洗浄された血小板を単離するための正確なプロトコルであり、凝固促進剤の血小板の特徴であるホスファチジルセリンおよび微小胞放出の曝露を定量化することを目的としています。...

ヒト精製血小板からのホスファチジルセリン曝露と微小胞放出の測定による凝固促進血小板の特性評価

多血小板血漿 (PRP) は、ウマの筋骨格系疾患の治療に使用されます。さまざまな技術により、血小板と白血球の濃度が異なる PRP...

ウマの血液から多血小板血漿を得るための簡単な二重遠心分離チューブ法

学ぶ眼表面疾患治療のための多血小板血漿ライセート調製法。ドナー由来血小板から成長因子を含む製剤を調製し、長期保存と品質管理のプロトコルを確立する方法を解説します。

眼表面疾患の治療のための多血小板血漿ライセート

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