2022年6月16日
複雑な解剖学的構造のため、心臓サンプルの一貫して再現可能な解剖および採取プロトコルを実装するのは難しい場合があります。この原稿は、いくつかの標準的な心臓解剖プロトコルの重要な要素を提示し、肉眼検査アプローチと組織病理学的検査に一般的に使用されるサンプリング部位の両方を強調しています。
種と個体の間の心臓の構造の違い、および文献の不一致は、心臓の解剖学の完全な理解と厳格な方法論の順守を必要とします。この技術は、観察者の均一性を改善し、実験的心血管疾患研究の比較可能性と再現性を高めることができます。このテクニックに慣れていない人は、心臓のすべての構成要素を特定するのが難しい場合があります。
私のお勧めは、心臓の解剖学に精通するために少し時間を費やすことです。心臓の複雑な解剖学的構造は理解するのが難しいため、方法の視覚的なプレゼンテーションが必要です。まず、対象の動物の体重を量ってから、左側の剖検台に置きます。
次に、皮膚と粘膜を検査して触診し、色、一貫性、および体積のすべての変化に注意して、被験者の外部検査を実行します。次に、ナイフを使用して、右腋窩に鋭い7センチの切開を行います。肛門大腿骨接合部を見つけたら、ナイフでカプセルを開き、大腿骨頭の靭帯を切断します。
腋窩頭蓋の皮膚切開を下顎結合まで、尾状に腓骨骨まで伸ばします。メスで皮膚を取り除き、胸壁と腹壁を腹側の正中線から椎骨横断突起のレベルまで露出させます。次に、メスと鉗子を使用して、腹壁、腹尾から右肋骨弓までフラップを作成します。
次に、右心気症の尾側に沿って、ハサミで腹腔を開きます。右傍腰椎領域に沿って外側腸骨稜まで切開部を尾方向に伸ばし続けます。その後、リネアアルバの恥骨挿入まで切開を伸ばし、その場で腹部臓器を簡単に調べて、色、一貫性、体積、および位置の変化に注意してください。
次に、メスと鉗子を使用して、最高点で横隔膜を穿刺します。次に、骨切断鉗子を使用して、最初に胸骨傍軟骨セグメントを切断し、次に肋骨関節の近位にある肋骨の背側セグメントを切断することにより、右胸郭を取り外します。心臓をその場で調べて、そのサイズ、色、位置、および隣接する組織との接続に注意してください。
また、触診で一貫性の変化を探します。次に、はさみを使用して、心臓の基部から頂点までの縦断面で心膜腔を開きます。心膜腔と心外膜に色、粘稠度、体積の変化がないか調べます。
次に、ハサミを使用して、右上房の入り口から少なくとも1センチメートル上の上大静脈を切片化し、クリスタ終末を保存し、大動脈、肺幹、および両方の大静脈の横断部分を生成することによって心臓を解放します。臓器の外部輪郭、心外膜の外観、心外膜の透明度による心筋の外観、および大きな血管の外観を調べます。心臓解離の流入流出法を行うには、心房を上に向けて心臓を置き、ハサミと歯のない鉗子を使用して、尾大静脈から右心房に広く切り取ります。
心臓を右耳介付属器に切断してクリスタ終末または洞房結節を露出させた後、三尖弁を背側から検査します。次に、右心房から右心室と脳室内中隔との接合部までの切片を切断して、右房室弁を表示する。次に、肺幹の起点まで脳室内中隔に沿って右心室自由壁を切片化する。
脊索腱と乳頭筋を含む右房室弁を徹底的に調べた後、脊索腱を切断します。次に、鉗子を肺幹に沿って置き、体幹を縦方向に切断して、肺流出路、肺幹の起源、および半月弁を調べます。背側から二尖弁を検査するには、左心房を肺静脈から左耳介の先端まで切り取ります。
次に、心室中隔を下に向けて心臓を置き、心室基部から心頂点までの心室自由壁を大きく切開します。次に、左房室弁の尖端の脊索腱を切断します。最後に、左心室流出路に鉗子を入れて大動脈を開きます。
生理食塩水を使用してすべての血栓を取り除き、心臓の重さを量ります。組織学用のサンプルを採取するには、まず、右心房、三尖弁、右心室自由壁を含むメスを使用して、約5ミリメートル離れた2つの縦方向の平行な切断を行います。次に、左心房、僧帽弁、背側乳頭筋、および左心室を含む2つの同様の平行な切断を行います。
心臓の背側上3分の1内で、心室中隔、右心房、大動脈、大動脈弁、三尖弁を含む、線に沿って心臓の基部を横方向に切断します。そして、大動脈の基部と心室中隔を含む2つの平行な縦方向の切り込みを入れます。次に、クリスタターミナルの周りの右心房をトリミングします。
洞房結節の6つの部分を得るには、クリスタの縦軸に対して横方向に向けられた、約3〜4ミリメートル離れたいくつかの平行なセクションを作成します。次に、得られた組織を組織学的カセットでトリミングし、組織を10%中性緩衝ホルマリンに少なくとも48時間浸します。冠状動脈をサンプリングするには、鉗子とメスを使用して傍円錐溝から冠状動脈を解剖し、10%中性緩衝ホルマリンで一晩固定します。
必要に応じて、8%ギ酸と塩酸の1対1の混合物で組織を脱灰します。次に、約3ミリメートル間隔でいくつかの横方向の切り込みを入れます。切片を組織学的カセットに入れ、カセットを10%中性緩衝ホルマリンに入れて埋め込みます。
心臓を10%中性緩衝ホルマリンで少なくとも48時間固定した後、2つの歯のないまっすぐな解剖鉗子を置きます。頭蓋大静脈、右心房、三尖弁、右心室を通るもの。そしてもう一方は肺静脈、左心房、僧帽弁、左心室を通ります。
鉗子の間のスペースをガイダンスとして利用し、切断刃を使用して心臓の基部から頂点まで切断します。約5ミリメートル離して、大動脈を含む心臓セグメントの別の縦方向の部分を切り取ります。次に、心臓基部を頂点から完全に分離します。
各組織セグメントを組織学的カセットに入れた後、包埋するまでカセットを10%中性緩衝ホルマリンに入れます。このプロトコルにより、心臓の外部の特徴と内部構造の視覚化に成功しました。この技術を使用すると、犬や猫などのさまざまな動物から組織学的研究のために心臓組織サンプルを正常に収集できます。
心臓を解放するときは、関心のある構造を損傷する可能性があるため、常に注意してください。また、洞房結節の解剖、収穫、埋め込み中。この方法は、不整脈モデリング、肥大型心筋症、心筋梗塞、心臓中毒の診断に作成されましたが、あらゆる心臓病の診断に使用できます。
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この記事では、心臓の複雑な解剖学的構造による心臓解剖の課題について議論します。解剖の標準プロトコルを提示し、組織病理学的検査の主要なサンプリング部位を強調します。
Standardized dissection and histological sampling protocols for large animal hearts are critical for reproducibility and data comparability in cardiovascular disease research. Consistent anatomical sampling reduces interobserver variability and supports robust target validation in preclinical models. These protocols underpin reliable translational insights and portfolio decision-making for cardiovascular drug discovery.
These dissection and sampling protocols are positioned at the interface of preclinical model characterization and translational research, supporting workflows from early discovery through lead identification and preclinical validation.