Culturing and Genetically Manipulating Entomopathogenic Nematodes

Christa Heryanto; Ramesh Ratnappan; Damien M. O'Halloran; John M. Hawdon; Ioannis Eleftherianos

doi:10.3791/63885

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Culturing and Genetically Manipulating Entomopathogenic Nematodes

昆虫病原性線虫の培養と遺伝子操作

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07:17 min

March 31, 2022

DOI: 10.3791/63885-v

Christa Heryanto¹, Ramesh Ratnappan², Damien M. O'Halloran¹, John M. Hawdon², Ioannis Eleftherianos¹

¹Department of Biological Sciences,The George Washington University, ²Department of Microbiology, Immunology, and Tropical Medicine, School of Medicine and Health Sciences,The George Washington University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

昆虫病原性線虫は細菌と共生して生きており、一緒になって自然免疫系を損なうことによって昆虫に感染することに成功しています。線虫感染の遺伝的基盤に関する研究を促進するために、昆虫病原性線虫を維持し、遺伝的に操作する方法が記載されている。

昆虫病原性線虫を維持および増幅するための効率的なプロトコールは、線虫病原性および宿主抗線虫免疫の分子基盤を理解するために不可欠である。このプロトコルにより、昆虫宿主であるガレリア・メロネラを使用して、共生性および軸索性ヘテロラブディティス・バクテリオフォラおよびスタイネルネマ・カルポカプサエIJを大量に産生することができます。まず、ペトリ皿をろ紙で覆い、約10〜15匹のガレリアメロネラ幼虫を追加します。

ピペットを使用して、懸濁液10マイクロリットルあたり約25〜50匹の感染性幼体を含む2ミリリットルの水をワックスワームに分配する。そして、ペトリ皿を室温でキャビネットに保管する。ろ紙の水分に応じて、2日ごとに1〜2ミリリットルの水を加えます。

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