セプチンの超微細構造組織、膜再形成、および曲率感度挙動をアッセイするためのボトムアップインビトロ法

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2022年8月17日

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Brieuc Chauvin^*¹ , Koyomi Nakazawa^*¹ , Alexandre Beber¹^,⁷ , Aurélie Di Cicco¹ , Bassam Hajj¹ , François Iv² , Manos Mavrakis² , Gijsje H. Koenderink³ , João T. Cabral⁴ , Michaël Trichet⁵ , Stéphanie Mangenot^*⁶ , Aurélie Bertin^*¹

¹Laboratoire Physico Chimie Curie, Institut Curie, PSL Research University, Sorbonne Université, ²Institut Fresnel, CNRS UMR7249, Aix Marseille Univ, Centrale Marseille, ³Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft, Delft University of Technology, ⁴Department of Chemical Engineering, Imperial College London, ⁵Sorbonne Université, CNRS, Institut de Biologie Paris-Seine (IBPS), Service de microscopie électronique (IBPS-SME), ⁶Laboratoire Matière et Systèmes Complexes (MSC), Université Paris Cité, ⁷Institute of Biotechnology, Czech Academy of Sciences, BIOCEV

^* These authors contributed equally

セプチンは細胞骨格タンパク質である。それらは脂質膜と相互作用し、ミクロンスケールで膜曲率を感知するだけでなく生成することもできる。このプロトコルでは、膜変形、曲率に敏感なセプチン結合、およびセプチンフィラメントの超構造を分析するためのボトムアップ インビトロ 方法論について説明します。

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Chapters in this video

0:05

Introduction

0:49

Designing Wavy NOA (Norland Optical Adhesive) Replica from Wavy PDMS (Polydimethylsiloxane) Patterns

1:49

Generation of a Supported Lipid Bilayer and Protein Incubation

3:22

Sample Fixation, Sample Dehydration, Critical Point Drying

4:43

Sample Mounting and Coating

5:54

Acquire the Images Using a Field-Emission SEM (FE-SEM) Microscope

6:56

Results: Analysis of the Self-Assembly of Septins at the Lipid Membrane

8:27

Conclusion

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