Name: 肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-31T13:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: 学ぶ肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング手法。[18F]FMISOと[18F]FDGを用いて腫瘍低酸素状態をリアルタイムモニタリングし、治療応答予測と転移研究に活用する。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

私たちは、小動物イメージング実験のための香港抗がん信託基金、香港研究助成評議会共同研究基金(CRF C7018-14E)の支援に感謝します。また、[18 F]FMISOおよび[18F]FDGの提供に対する香港大学の分子イメージングおよび医療用サイクロトロンセンター(MIMCC)の支援にも感謝します。

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics+2020%3A+GLOBOCAN+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Chen, C., Lou, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+inducible+factors+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Hypoxia inducible factors in hepatocellular carcinoma.</a> Oncotarget. 8 (28), 46691-46703 (2017).</li>
<li>Lu, R. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positron-emission+tomography+for+hepatocellular+carcinoma%3A+Current+status+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Positron-emission tomography for hepatocellular carcinoma: Current status and future prospects.</a> World Journal of Gastroenterology. 25 (32), 4682-4695 (2019).</li>
<li>Larsson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adding+11C-acetate+to+18F-FDG+at+PET+examination+has+an+incremental+value+in+the+diagnosis+of+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Radionuclide+Therapy%22%5BJournal%5D)">Adding 11C-acetate to 18F-FDG at PET examination has an incremental value in the diagnosis of hepatocellular carcinoma.</a> Molecular Imaging and Radionuclide Therapy. 21 (1), 6-12 (2012).</li>
<li>Huo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+analysis+of+dynamic+11C-acetate+PET%2FCT+imaging+as+a+potential+method+for+differentiation+of+hepatocellular+carcinoma+and+benign+liver+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Kinetic analysis of dynamic 11C-acetate PET/CT imaging as a potential method for differentiation of hepatocellular carcinoma and benign liver lesions.</a> Theranostics. 5 (4), 371-377 (2015).</li>
<li>Lopci, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+radiopharmaceuticals+for+imaging+of+tumor+hypoxia%3A+A+review+of+the+evidence%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">PET radiopharmaceuticals for imaging of tumor hypoxia: A review of the evidence.</a> American Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 4 (4), 365-384 (2014).</li>
<li>Mao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+through+which+hypoxia-induced+caveolin-1+drives+tumorigenesis+and+metastasis+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanisms through which hypoxia-induced caveolin-1 drives tumorigenesis and metastasis in hepatocellular carcinoma.</a> Cancer Research. 76 (24), 7242-7253 (2016).</li>
<li>Kung-Chun Chiu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+regulates+the+mitochondrial+activity+of+hepatocellular+carcinoma+cells+through+HIF%2FHEY1%2FPINK1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">Hypoxia regulates the mitochondrial activity of hepatocellular carcinoma cells through HIF/HEY1/PINK1 pathway.</a> Cell Death & Disease. 10 (12), 934(2019).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+cell+clones+with+different+metastatic+potential+from+the+metastatic+hepatocellular+carcinoma+cell+line+MHCC97%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Establishment of cell clones with different metastatic potential from the metastatic hepatocellular carcinoma cell line MHCC97.</a> World Journal of Gastroenterology. 7 (5), 630-636 (2001).</li>
<li>Faustino-Rocha, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+rat+mammary+tumor+volume+using+caliper+and+ultrasonography+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Estimation of rat mammary tumor volume using caliper and ultrasonography measurements.</a> Lab Animal. 42 (6), 217-224 (2013).</li>
<li>Liu, Q., Tan, K. V., Chang, H. C., Khong, P. L., Hui, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+and+quantification+of+brown+and+beige+adipose+tissues+in+mice+using+%5B18F%5D+FDG+micro-PET%2FMR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Visualization and quantification of brown and beige adipose tissues in mice using [18F] FDG micro-PET/MR imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (173), e62460(2021).</li>
<li>Lin, W. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-activated+cytotoxic+agent+tirapazamine+enhances+hepatic+artery+ligation-induced+killing+of+liver+tumor+in+HBx+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-activated cytotoxic agent tirapazamine enhances hepatic artery ligation-induced killing of liver tumor in HBx transgenic mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 113 (42), 11937-11942 (2016).</li>
<li>Wong, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRAF+methylation+by+PRMT6+regulates+aerobic+glycolysis-driven+hepatocarcinogenesis+via+ERK-dependent+PKM2+nuclear+relocalization+and+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">CRAF methylation by PRMT6 regulates aerobic glycolysis-driven hepatocarcinogenesis via ERK-dependent PKM2 nuclear relocalization and activation.</a> Hepatology. 71 (4), 1279-1296 (2020).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+cisplatin-loaded+hydrogels+for+trans-portal+vein+chemoembolization+in+an+orthotopic+liver+cancer+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Delivery%22%5BJournal%5D)">Development of cisplatin-loaded hydrogels for trans-portal vein chemoembolization in an orthotopic liver cancer mouse model.</a> Drug Delivery. 28 (1), 520-529 (2021).</li>
<li>Shi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+evaluation+of+five+nasopharyngeal+carcinoma+animal+models+on+the+microPET%2FMR+platform%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Longitudinal evaluation of five nasopharyngeal carcinoma animal models on the microPET/MR platform.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (5), 1497-1507 (2021).</li>
<li>Kilian, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+hypoxia+in+small+animals+with+F+fluoromisonidasole%5BTitle%5D)+AND+%22Nukleonika%22%5BJournal%5D)">Imaging of hypoxia in small animals with F fluoromisonidasole.</a> Nukleonika. 61 (2), 219-223 (2016).</li>
<li>Kawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+optimal+post-injection+timing+of+hypoxic+imaging+with+18F-Fluoromisonidazole-PET%2FCT%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of optimal post-injection timing of hypoxic imaging with 18F-Fluoromisonidazole-PET/CT.</a> Molecular Imaging and Biology. 23 (4), 597-603 (2021).</li>
</ol>

著者は開示する利益相反を持っていません。

本研究では,皮下腫瘍を用いた肝同所性HCC異種移植片のHAL実施手順と,[18F]FMISOおよび[18F]FDG PET/MRを用いた同所性異所性異種移植片における腫瘍低酸素症の非侵襲的モニタリング方法について説明しました。私たちの関心は、早期診断と治療反応評価のためのさまざまな癌および疾患モデルの代謝イメージングにあります11,13,14,15。これまで、HAL HCC異種移植片の作製とin vivo腫瘍代謝は文献にほとんど記載されておらず、PETイメージングを用いてこれらの腫瘍モデルの代謝特性を調べることになりました。
HCCにおける低酸素を研究するための堅牢なマウスモデルとしてHALを用いた同所性異種移植片の確立に成功したことは、 in vivoでの<...

肝細胞がん(HCC)は、世界で6番目に診断されたがんであり、がんによる死因として3番目に多く、2020年には90万人以上の新規症例と80万人以上の死亡があります1。主な危険因子は肝硬変であり、これはウイルス感染(B型およびC型肝炎ウイルス)、アルコール乱用、糖尿病、および非アルコール性脂肪性肝炎2の結果として発生します。HCCの管理はかなり複雑であり、疾患の病期分類に応じて、外科的切除、熱的または化学的アブレーション、移植、経動脈化学塞栓術、放射線、化学療法など、いくつかの治療オプションが利用可能です2,3。HCCは化学療法に難治性の腫瘍であり、治癒目的の治療を受けた患者の最大70%に疾患が再発します2。
高度の腫瘍の不均一性にもかかわらず、HCCは2つの一般的な結果に関連しています:(i)HCCは非常に低酸素であり、(ii)腫瘍低酸素症は腫瘍の攻撃性および治療の失敗の増加に関連しています。HCC細胞の制御されない増殖は、血管新生に先行する高い酸素消費率をもたらし、したがって低酸素微小環境を作り出す。腫瘍内酸素レベルが低いと、腫瘍の攻撃性と治療反応に影響を与えるさまざまな生物学的反応が引き起こされます。低酸素誘導因子(HIF)は、低酸素症への応答において必須の転写調節因子として認識されることがよくあります2,3。したがって、低酸素症を検出する能力は、腫瘍性組織を視覚化し、侵襲的な手順を必要とするアクセスできない部位を特定するために重要です。また、腫瘍の攻撃性につながる分子変化をよりよく理解し、患者の治療結果を改善するのにも役立ちます。
陽電子放出断層撮影(PET)を使用した分子イメージングは、HCCを含む多くの癌の診断と病期分類に一般的に使用されています。特に、[18 F]フルオロデオキシグルコース([18F]FDG)と[11C]アセテートを含むデュアルトレーサーPETイメージングを組み合わせて使用すると、HCC診断における全体的な感度が大幅に向上する可能性があります4,5。一方、低酸素症のイメージングは、一般的に使用される低酸素マーカー[18 F]フルオロミソニダゾール([18F]FMISO)を使用して達成できます。臨床診療では、低酸素症の非侵襲的評価は、放射線治療計画のためにさまざまな種類の腫瘍と領域を区別するために重要です6。
前臨床イメージングは、さまざまな疾患のマウスモデルの非侵襲的および縦断的評価に不可欠なツールになっています。堅牢で再現性の高いHCCモデルは、ヒトHCCの病態生理学および新規治療法の評価に関する前臨床およびトランスレーショナル研究のための重要なプラットフォームです。PETイメージングとともに、in vivoの挙動を解明して、任意の時点で分子レベルで重要な洞察を提供することができます。ここでは、[18F]FMISOおよび[18F]FDG PET/MRを使用した肝動脈結紮(HAL)同所性HCC異種移植片の生成とそれらのin vivo腫瘍代謝の分析のためのプロトコルについて説明します。HALの組み込みは、HALが腫瘍内低酸素症を誘発するために動脈血供給を効果的に遮断することができるので、in vivoで腫瘍低酸素症を研究するためのトランスジェニックまたは化学的に誘導されたHCCマウス異種移植片の適切なモデルを作る7,8。さらに、ピモニダゾールを用いたex vivo免疫組織化学染色とは異なり、低酸素の結果としての腫瘍代謝の変化は、PETイメージングを使用して非侵襲的に容易に視覚化および正確に定量することができ、治療反応の縦断的評価または耐性の出現の測定を可能にします3,7,8.ここに示す方法は、PET/MRイメージングを用いた腫瘍低酸素の非侵襲的モニタリングとともに、堅牢な低酸素HCCモデルの作成を可能にし、in vivoでのHCC生物学を研究することができます。

<table><tbody><tr><td>0.9% 滅菌生理食塩水</td><td>BBraun</td><td>N/A</td><td>0.9% 塩化ナトリウム 静脈内注入液 500 mL</td></tr><tr><td>10# メス刃</td><td>RWD ライフサイエンス株式会社</td><td>S31010-01</td><td>動物手術器具</td></tr><tr><td>10% ポビドンヨード溶液</td><td>バニトーレ</td><td>6.425.678</td><td>消毒用</td></tr><tr><td>25G 針と 1mL シリンジ</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>N/A</td><td>細胞懸濁液注射用25G針付き1mLシリンジ</td></tr><tr><td>5mLシリンジ</td><td>テルモ</td><td>SS05L</td><td>5mLシリンジ ルアーロック</td></tr><tr><td>70%エタノール</td><td>メルク</td><td>1.07017</td><td>消毒用</td></tr><tr><td>自動セルカウンター</td><td>Invitrogen</td><td>AMQAF2000</td><td>自動細胞計数用</td></tr><tr><td>ブプレノルフィン</td><td></td><td>HealthDirect N/A</td><td>皮下注射 (0.05-0.2 mg/kg/12 時間)手術後鎮痛剤</td></tr><tr><td>細胞培養ディッシュ(直径60mm)</td><td>Thermo Scientific</td><td>150462</td><td>腫瘍組織処理用</td></tr><tr><td>遠心分離</td><td>機Sigma</td><td>3-16KL、固定角ローター 12311</td><td>細胞懸濁液収集用</td></tr><tr><td>遠心分離機コニカルチューブ</td><td>エッペンドルフ</td><td>EP0030122151</td><td>細胞懸濁液収集用</td></tr><tr><td>培養培地(ダルベッコ'修正されたイーグル」中)</td><td>Gibco</td><td>10566024</td><td>高グルコース、GlutaMAX&trade;サプリメント</td></tr><tr><td>デジタルキャリパー</td><td>RS PRO</td><td>841-2518</td><td>皮下腫瘍サイズ測定用</td></tr><tr><td>ダイレクトヒート CO2 </>subインキュベーター</td><td>Techcomp Limited</td><td>NU5841</td><td>細胞培養用</td></tr><tr><td>用量キャリブレーター</td><td>Biodex</td><td>&nbsp;N/A</td><td>Atomlab 500</td></tr><tr><td>DPBS(ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水)</td><td>Gibco</td><td>14287072</td><td>細胞洗浄および注射用</td></tr><tr><td>眼用潤滑剤</td><td>Alcon Duratears</td><td>&nbsp;N/A</td><td>滅菌眼潤滑剤軟膏、3.5 g</td></tr><tr><td>ウシ胎児血清 (FBS)</td><td>Gibco</td><td>A4766801</td><td>幅広い細胞タイプ、特に敏感な細胞株に使用されます</td></tr><tr><td>鉗子 (湾曲した微細でまっすぐな鈍い)</td><td>RWD Life Science Co.,ltd</td><td>F12012-10 &F12011-13</td><td>動物手術用ツール</td></tr><tr><td>加熱パッド</td><td>ALA Scientific Instruments</td><td>N/A</td><td>手術中のマウス用ヒートパッド</td></tr><tr><td>インスリン注射器</td><td>テルモ</td><td>10ME2913</td><td>放射性トレーサー注射用針付き1mLインスリン注射器</td></tr><tr><td>InterView 融合ソフトウェア</td><td>Mediso</td><td>バージョン3.03</td><td>後処理・画像解析ソフトウェア</td></tr><tr><td>倒立顕微鏡</td><td>Yu Lungサイエンティフィック株式会社</td><td>BM-209G</td><td>細胞形態可視化用</td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>シャネルファーマ</td><td>&nbsp;N/A</td><td>Iso-Vet、吸入麻酔薬、250 mL</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Alfasan International B.V.</td><td>HK-37715</td><td>ケタミン 10% 注射液 10 mL&nbsp;</td></tr><tr><td>医療用酸素</td><td>Linde HKO</td><td>101-HR</td><td>圧縮ガス、純度99.5%</td></tr><tr><td>のnanoScan PET / MR</td><td>スキャナーMediso</td><td>&nbsp;N/A</td><td>3 Tesla MR</td></tr><tr><td>ニードルホルダー</td><td>RWD Life Science Co.,ltd</td><td>F31026-12</td><td>動物手術ツール</td></tr><tr><td>Nucline nanoScan software</td><td>Mediso</td><td>Version 3.0</td><td>スキャナー オペレーティングソフトウェア</td></tr><tr><td>ナイロン縫合糸 (6/0 および 5/0)</td> <td>Healthy Medical Company Ltd</td><td>000524 & 000526</td><td>動物手術ツール</td></tr><tr><td>ペニシリン-ストレプトマイシン</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>最終濃度が50〜100 I.U./mLのペニシリンと50〜100μの培地。g / mLストレプトマイシン。.</td></tr><tr><td>ペンタバルビタール</td><td>アルファメディック</td><td>13003</td><td>マウスの呼吸停止を誘発する腹腔内注射 (330 mg/kg)</td></tr><tr><td>シャープハサミ</td><td>RWD ライフサイエンス株式会社</td><td>S14014-10</td><td>動物手術ツール</td></tr><tr><td>スプリングハサミ</td><td>RWD ライフサイエンス株式会社</td><td>S11005-09</td><td>動物手術ツール</td></tr><tr><td>トリパンブルー溶液、0,4%</td><td>Gibco</td><td>15250061</td><td>細胞計数用</td></tr><tr><td>トリプシン-エチレンジアミン四酢酸(EDTA、0.25%)、フェノールレッド。</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td>細胞消化用</td></tr><tr><td>キシラジン</td><td>アルファサン インターナショナル B.V.</td><td>HK-56179</td><td>キシラジン2%注射液、30mL</td></tr></tbody></table>

肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的pet/mrイメージング

Non-Invasive PET/MR Imaging in an Orthotopic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma

ヒト疾患を再現する肝細胞癌(HCC)の前臨床実験モデルは、腫瘍形成を研究し、新しい治療アプローチを評価するための重要なツールとなります。陽電子放出断層撮影(PET)を使用した非侵襲的な全身イメージングは、組織のin vivo特性に関する重要な洞察を分子レベルでリアルタイムで提供します。ここでは、腫瘍低酸素症を誘発するための肝動脈結紮(HAL)の有無にかかわらず、同所性HCC異種移植片を作成するためのプロトコルと、[18 F]フルオロミソニダゾール([18 F]FMISO)および[18F]フルオロデオキシグルコース([18F]FDG)PET /磁気共鳴(MR)イメージングを使用したin vivoでの腫瘍代謝の評価を紹介します。腫瘍低酸素症は、低酸素マーカー[18 F]FMISOを使用して容易に視覚化でき、[18 F]FMISOの取り込みは、HALを受けたHCCマウスで非HAL群よりも高かったが、[18F]FDGは2つのグループ間で腫瘍低酸素症を区別できなかったことがわかりました。HAL腫瘍はまた、低酸素に応答してより高いレベルの低酸素誘導因子(HIF)-1α発現を示した。HAL腫瘍の定量化は、標準化値取り込み(SUV)アプローチに基づく[18F]FMISO取り込みの2.3倍の増加を示した。

連続的な同所性移植に適した腫瘍ブロックを得るために、最初に、ヌードマウスの下脇腹にDPBS(MHCC97L細胞を含む)中の200μLの細胞懸濁液を皮下注射することによって安定したクローンを生成しました(図1A)。腫瘍の成長をモニターし、腫瘍サイズが800〜1000mm3に達したとき(注射後約4週間)、マウスを安楽死させ、得られた腫瘍ブロックを約1mm3断片に切断し、その後の肝臓同所性腫瘍を別のバッチのヌードマウスに移植した(n = 6)。マウスを2つの群に無作為化した:対照(C1、n=3)および肝動脈結紮(H2、n=3)。HALは肝動脈の主枝の周りに細い糸を結ぶことによって行われました。C1マウスは、同所性移植の前にHALから温存した。この操作は、H2マウスでは腫瘍低酸素症を引き起こしましたが、C1マウスでは引き起こさず、PET低酸素トレーサー[18F]FMISOを使用して腫瘍低酸素状態を非侵襲的に監視することができました。PET / MR研究では、腫瘍[18 F]FMISO取り込みの増加はH2マウスでのみ観察さ...

ここでは、肝動脈結紮の有無にかかわらず同所性肝細胞癌異種移植片を作成し、[18 F]フルオロミソニダゾール([18 F]FMISO)および[18 F]フルオロデオキシグルコース([18F]FDG)を使用して腫瘍低酸素症の非侵襲的陽電子放出断層撮影(PET)を行うためのプロトコルを提示します。

肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング

Preclinical experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate human disease represent an important tool to study tumorigenesis and ...

私たちの方法は、腫瘍低酸素症の非侵襲的イメージングのための信頼性の高い低酸素肝細胞癌モデルを作成し、in vivoでのHCC生物学を研究し、ヒトの癌発生をよりよく再現することができます。信頼性の高いHCCモデルと再現性の高いイメージング法は、ヒトHCCの病態生理学へのトランスレーショナル研究の重要なプラットフォームとして機能します。腫瘍低酸素症のリアルタイムモニタリングは、腫瘍の攻撃性につながる分子変化に関する洞察を提供し、低酸素症の領域を特定し、治療に対する反応を予測することを可能にします。腹腔内手術は技術的に困難な場合がありますが、適切な計画と動物の世話は、全体的な手術の成功率と小動物の幸福を改善します。まず、麻酔をかけた6〜8週齢のマウスの背側領域を下脇腹の左側または右側に70%エタノールで滅菌します。次に、鉗子を使用して皮膚を持ち上げ、注射針を下にそっと挿入します。針の引き抜き中に注入された細胞懸濁液の偶発的な漏れを避けるために、皮下面に沿って穿刺部位から針を4〜5ミリメートル進めます。鉗子を解放した後、反対側を貫通せずにシリンジの内容物を慎重に排出します。皮下担癌マウスを安楽死させた後、メスの刃で腫瘍部位の皮膚を切開する。その後、腫瘍ブロックを切除し、直ちに培地に移します。次に、鋭利な外科用ハサミを使用して、腫瘍ブロックの中心領域を避けて、腫瘍ブロックを小さな1立方ミリメートルの立方体に切断します。すべてのキューブを培地に入れます。同所性肝移植の場合は、麻酔をかけたマウスの手足を伸ばし、テープで固定して、腹側の腹部と胸部を最大限に露出させます。次に、腹部の皮膚全体を10%ポビドンヨード溶液で滅菌し、続いて70%エタノールで滅菌します。次に、最初に鋭いハサミを使用して10ミリメートルの正中線切開を行い、腹膜にアクセスして開腹術を行います。次に、鉗子で剣状突起を頭に向かってクランプして引っ張り、肋骨下開創器を使用して手術野を開きます。湿ったガーゼ綿棒を使用して、正中葉と左肝葉を上向きに引っ込めます。次に、腹部の外側の腸をマウスの左側に移動し、湿ったガーゼ綿棒で覆います。次に、最適な視覚化のための拡大鏡の下で、膵臓の頭から肝茎の根元まで発生する総肝動脈に肝動脈結紮を行います。濡れたガーゼ綿棒で中央葉と左葉の背中を引っ込めて左葉を露出させます。次に、滅菌メス刃を用いて、左葉に長さ約2ミリ、深さの切開を行い、直ちに滅菌鉗子で肝切開部に腫瘍片を挿入します。腫瘍を肝臓にしっかりと埋めてから、8の字縫合糸を適用し、切開部位に6-0ナイロン縫合糸を付けて、適切な腫瘍移植と止血を確保します。次に、中断された5-0縫合で腹部切開を閉じます。18-FMISOのアリコートをチューブに分注し、滅菌生理食塩水で希釈して、100マイクロリットル中18〜20メガベクレルの総活性濃度

non-invasive-petmr-imaging-an-orthotopic-mouse-model-hepatocellular

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

のための免疫担当マウスにおける漿液性卵巣癌の同所性モデル in vivoで</em腫瘍免疫応答の>腫瘍イメージングとモニタリング

このビデオは、マウスモデルにおける腫瘍のin...

放射性標識抗体を用いたマウスモデルにおける腫瘍検出のためのin vivo PETイメージング技術

乳癌脳転移マウスモデルをMDA-MB231/Br-GFP細胞の超音波画像誘導の心臓内注射で確立される。多焦点頭蓋内転移の発生は、高解像度の9.4 T MRIを用いて長手方向にモニタされた。...

縦MRIが続く乳がんの脳転移のマウスモデルを開発するために、超音波画像誘導心臓内注射

このプロトコルの目標は、マウスの同所性膵臓腫瘍異種移植片に対して動的コントラスト増強磁気共鳴画像法(DCE-MRI)を適用することです。DCE-MRIは、標的組織の微小血管系を非侵襲的に解析する方法であり、新規治療後の腫瘍の血管反応を評価するのに役立ちます。...

同所膵臓癌マウスモデルのダイナミックコントラスト強化磁気共鳴画像

癌の転移拡散は、癌関連死の主要な原因です。私たちは、固形臓器腫瘍で転移のメカニズムを研究するための「患者様」同所同系マウスモデル系を確立するための私たちの生存の手術方法の詳細な説明を提供します。...

肝細胞癌転移の「患者様」同所同系マウスモデル

前立腺癌は、米国で癌関連の死亡原因として2番目に多いものです。同所性がんモデルは、前立腺がんの生物学を理解し、治療レジメンの有効性を評価するための有用なアプローチを提供します。このプロトコルでは、同所性前立腺がんマウスモデルを確立するために必要な詳細な手順について説明します。...

ヒト前立腺癌の前臨床同所性マウスモデル

ここでは、肝細胞癌(HCC)の典型的な免疫特徴を要約した肝癌の臨床的に関連するマウスモデルの開発について述べた。...

肝炎症と線維症の設定に起因する肝細胞癌の腫瘍性肝細胞誘発性オルコトピックマウスモデル

本稿では、免疫不全歯立マウスの胸膜腔にH2052/484中皮腫細胞を移植することにより、ヒト胸膜中皮腫の直交マウスモデルの生成について説明する。胸腔内腫瘍の発症の縦方向モニタリングを非侵襲的マルチモーダル[18F]-2-フルオロ-2-デオキシ-D-グルコース陽電子放射断層撮影およびコンピュータ断層撮影法によって評価した。...

アチミックマウスにおけるヒト胸膜中皮腫の正形細胞モデルのPET/CTによる移植とモニタリング

本プロトコルは、マウス甲状腺全体を視覚化し、未分化甲状腺癌の成長を監視するための高周波超音波検査を記載しています。...

遺伝子改変マウスモデルにおける同所性ATC腫瘍の解析のための高解像度超音波検査

このプロトコルでは、マウスにおける同所性肝移植(OLT)の成功モデルの実装について説明します。さらに、マウスでOLTが成功した後の同種移植片の開存性をさらに分析するためのアジュバントについても、特にマイクロコンピューター断層撮影(microCT)スキャンを利用して説明します。...

マイクロコンピュータ断層撮影血管造影を用いたマウスの同所性肝移植の成功

このプロトコルは、最大4匹の動物を対象に多チャンバーベッドを用いて、遺伝子組み換えマウスモデルにおける膵腺癌腫瘍を検出するために最大4隻の動物の並行磁気共鳴画像法(MRI)を行います。この多動物型MRIプロトコルは、腫瘍の検出と測定に迅速かつコスト効率が高く、前臨床試験のための動物選択や腫瘍成長の縦断的モニタリングを促進します。...

膵臓がんマウスモデルにおける腫瘍測定のための多動物磁気共鳴画像法

学ぶ肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング手法。[18F]FMISOと[18F]FDGを用いて腫瘍低酸素状態をリアルタイムモニタリングし、治療応答予測と転移研究に活用する。

肝細胞癌の同所性モデルマウスにおける非侵襲的PET/MRイメージング

さらに動画を探す