Simultaneous Imaging and Flow-Cytometry-based Detection of Multiple Fluorescent Senescence Markers in Therapy-Induced Senescent Cancer Cells

Eva Dovjak; Mario Mairhofer; Claudia W&#246;&#223;; Jingjing Qi; Dorothy N. Y. Fan; Clemens A. Schmitt; Yong Yu

doi:10.3791/63973

治療誘発性老化癌細胞における複数の蛍光老化マーカーの同時イメージングおよびフローサイトメトリーベ...

JoVE Journal
Cancer Research

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Simultaneous Imaging and Flow-Cytometry-based Detection of Multiple Fluorescent Senescence Markers in Therapy-Induced Senescent Cancer Cells

治療誘発性老化癌細胞における複数の蛍光老化マーカーの同時イメージングおよびフローサイトメトリーベースの検出

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July 12, 2022

DOI: 10.3791/63973-v

Eva Dovjak¹, Mario Mairhofer¹, Claudia Wöß¹, Jingjing Qi¹, Dorothy N. Y. Fan², Clemens A. Schmitt^1,2,3, Yong Yu¹

¹Johannes Kepler University Linz, ²Charité - University Medicine Berlin, ³Max-Delbrück-Center for Molecular Medicine in the Helmholtz Association

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、単一細胞における複数の老化関連マーカーの可視化および定量化のためのフローサイトメトリーベースの方法を提示する。

この手法は、細胞内の蛍光シグナルの空間分布の解析と定量を可能にする高解像度の画像を迅速に生成し、複数のサンプルの迅速な解析を可能にします。細胞は、高度なイメージングフローサイトメトリーシステムを使用して測定され、速度、感度、詳細な単一細胞画像と空間情報を組み合わせることで、フロー検眼や顕微鏡では提供できない独自のデータが得られます。重要なアドバイスの1つは、機器の設定を確立するのに十分なセルを提供し、測定のためにセルを高密度で吊り下げることです。

このデータ取得を除けば、従来のフローサイトメトリーと同様に簡単です。まず、原稿に記載されているようにDLBCL細胞株を生成します。次に、10ミリモルのEdU溶液を1対1000の比率でDLBCL細胞培養液に加え、プレートを穏やかに揺動させて混合した後、摂氏37度の5%二酸化炭素インキュベーターでプレートを3時間インキュベートします。

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