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DOI: 10.3791/64099-v
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The peel-blot technique is a cryo-EM grid preparation method that allows for the separation of multilayered and concentrated biological samples into single layers. This method reduces thickness, increases sample concentration, and facilitates image processing.
ピールブロット法は、多層および濃縮された生物学的サンプルを単層に分離して、厚さを減らし、サンプル濃度を高め、画像処理を容易にするクライオEMグリッド調製法です。
ピールブロット法により、多層および濃縮された生物学的クライオEMサンプルを単層に分離して、厚さを減らし、濃度を高め、画像処理を容易にすることができます。グリッド調製前にサンプル濃度を上げることができ、ピールブロットを調整して単層標本の密な分布を実現し、非常に効率的なデータ収集を行うことができます。まず、20〜25マイクロメートルの孔径のろ紙を2枚積み重ね、紙を上に向けて長いパラフィンフィルムを隣に置きます。
サブミクロンのろ紙を、さらに2枚のろ紙の上に置きます。曲がった脚を上に向けてまっすぐな脚を下に向けて毛細管防止鉗子を配置し、滑らかな面または光沢のある面を上にして600メッシュグリッドを選択します。きれいなグリッドが他のアイテムと接触しないように、鉗子をペトリ皿または他の隆起した面に置きます。
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