Name: リン酸カルシウム誘発マウス腹部大動脈瘤モデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 14 s
Description: 学ぶリン酸カルシウム誘発マウス腹部大動脈瘤モデル。C57BL6Jマウスを用いた迅速かつ費用対効果の高い方法で、弾性線維の分解や大動脈拡張を観察し、腹部大動脈瘤の病態メカニズムと治療戦略を探索する。

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この研究は、中国国家自然科学財団(NSFC、81730010、91839302、81921001、31930056、91529203)および中国国家重点研究開発プログラム(2019YFA 0801600)からの資金提供によって支援されました。

動物実験は、北京大学健康科学センターの施設動物管理および使用委員会のガイドラインに準拠して実施され、北京大学の生物医学倫理委員会(LA2015142)によって承認されました。手術用のすべてのマウスをイソフルラン(1.5%〜2%)で麻酔し、マウスの痛みや不快感を避けるために麻酔を注意深く監視しました。
1. 事前準備
<ol><li>幅0.3 cmのパウダーフリーゴム手袋とガーゼを切ります。</li>
	<li>8〜10週齢のC57BL / 6Jオスマウスを購入します。12時間の明暗サイクルと食物と水への自由なアクセスを備えたエアコン付きの環境に動物を収容します。</li>
	<li>手術前にガーゼ、綿棒、はさみ、鉗子をオートクレーブします。</li>
	<li>ベタジン、70%エタノール、消毒手洗いを入手してください。</li>
	<li>マスク、ガウン、滅菌手袋を着用してください。</li>
</ol>2.外科的処置
<ol><li>チュアブルカルプロフェン錠(5 mg / kg用量)を手術の2〜4時間前に8〜10週齢のC57BL / 6Jマウスに与えます。.次に、マウスをイソフルランを含む誘導チャンバー(206 mm x 210 mm x 140 mm)に1.5%〜2%の流速で置きます。<ol><li>呼吸が目に見えて遅くなるまで、マウスを約5分間監視します。手術前にマウスが痛みの刺激に反応しないことを確認してください。</li>
	</ol></li>
	<li>眼科用軟膏を目に塗り、加熱パッドまたは毛布で熱サポートを提供します。手術中は15分ごとにつま先をつまんで麻酔の深さを確認します。</li>
	<li>電気バリカンまたは脱毛クリームを使用してマウスの腹毛を剃ります。剃った部分をベタジンで拭き取り、続いて70%エタノールを円を描くように数回拭きます。無菌性を維持するために手袋を交換してください。</li>
	<li>はさみを使用して、腹部の正中線に沿って下腹部を~1.5 cm切開します。</li>
	<li>通常の生理食塩水で湿らせた滅菌綿棒を使用して、腎下大動脈が見えるまで腸を慎重に取り除きます。</li>
	<li>腎下大動脈から結合組織と脂肪を約0.5cmの切片で解剖します。背側の小さな血管に注意し、それらを引き裂かないようにしてください。腹部大動脈を腹部主静脈から分離する必要はありません。</li>
	<li>生理食塩水に浸したゴム手袋を腹部大動脈と腹部主静脈の下に詰めます。綿棒を使用して余分な液体を拭き取ります。</li>
	<li>0.5 M CaCl2 を浸したガーゼを腎下腹部血管系の外膜に10分間詰めます。偽マウス群については、0.5 M CaCl2 を生理食塩水と交換します。</li>
	<li>ガーゼを取り出し、PBS溶液に浸した別のガーゼを5分間詰めて、大動脈の外膜にその場でCaPO4結晶を生成します。</li>
	<li>ゴム手袋ストリップとガーゼを慎重に取り外します。マウスの腸管をリセットします。</li>
	<li>腹部切開と皮膚を5-0縫合糸で縫合します。</li>
	<li>マウスが意識を取り戻すまで、マウスを加熱パッドの上に置きます。地元の動物倫理委員会によると、術後の痛みの回復住宅と鎮痛を提供します。</li>
	<li>マウスをさらに14日間収容します。手術後にマウスを注意深く監視し、その後毎日少なくとも1回観察します。この期間中にマウスが死亡した場合は、すぐに剖検を行います。</li>
</ol>3. 大動脈イメージングのための採取
<ol><li>手術の14日後に、CO2を用いてマウスを屠殺する。</li>
	<li>マウスの胸腔と腹腔を腹側に切り開き、右心房を切り開きます。</li>
	<li>心臓の左心室を通してPBS緩衝液でマウスを灌流して大動脈の血液を除去し、次に前述のように4%パラホルムアルデヒドで灌流します8。</li>
	<li>ステレオスコープの下で大動脈を収穫します。</li>
	<li>採取した大動脈を5 mLの4%パラホルムアルデヒドを含むチューブに48時間入れます。</li>
	<li>ステレオスコープの下で外膜組織と脂肪を慎重に取り除き、昆虫の針で黒いワックスプレートに大動脈を固定します。</li>
	<li>大動脈画像を取得します。</li>
</ol>4. 弾性繊維の劣化評価
<ol><li>大動脈瘤組織を連続凍結切開(厚さ7μm)に切断します。</li>
	<li>メーカーのプロトコルに従って、市販の弾性バンギーソン(EVG)染色キットを使用して弾性繊維を分析します。</li>
	<li>エラスチン分解を評価します。グレード1:<25%の劣化。グレード2:25%から50%の劣化。グレード3:50%から75%の劣化。またはグレード4:>75%の劣化。</li>
</ol>

<ol><li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li>
<li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li>
<li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li>
<li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li>
<li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+apolipoprotein+E%2C+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li>
<li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discovery%22%5BJournal%5D)">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21(2022).</li>
<li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564(2012).</li>
<li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li>
<li>Altobelli, E., Rapacchietta, L., Profeta, V. F., Fagnano, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+abdominal+aortic+aneurysm+in+population-based+studies%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Risk factors for abdominal aortic aneurysm in population-based studies: A systematic review and meta-analysis.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (12), 2805(2018).</li>
<li>Theivacumar, N. S., Stephenson, M. A., Mistry, H., Valenti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+mellitus+and+aortic+aneurysm+rupture%3A+A+favorable+association%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular+and+Endovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Diabetes mellitus and aortic aneurysm rupture: A favorable association.</a> Vascular and Endovascular Surgery. 48 (1), 45-50 (2014).</li>
<li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062(2016).</li>
<li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191(2015).</li>
<li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutral+sites+for+calcium+ion+binding+to+elastin+and+collagen%3A+A+charge+neutralization+theory+for+calcification+and+its+relationship+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Neutral sites for calcium ion binding to elastin and collagen: A charge neutralization theory for calcification and its relationship to atherosclerosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68 (4), 810-814 (1971).</li>
<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Runx2+%28runt-related+transcription+factor+2%29-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li>
<li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689(2019).</li>
</ol>

CaPO4の周囲への適用は、マウスにおいてAAAを誘導するための堅牢なアプローチである。いくつかの研究はCaPO4モデルを使用しており、これがマウス7,9でAAAを研究するための迅速かつ再現性のある方法であることを一貫して報告しています。このモデルは、ヒト大動脈瘤の特徴の一部を要約し、炎症や細胞外マトリックスの分解を含むAAAの病因に関する機構的な洞察を提供すると考えられています。
ヒトAAAの危険因子には、主に加齢、男性の性別、喫煙、高脂血症、高血圧、およびアテローム性動脈硬化症が含まれます10。体系的に研究されていないが、高脂血症は、CaPO4モデルを使用した場合、マウスにAAA拡大の素因があることもわかりました。ヒトとは異なり、加齢はマウスCaPO4モデル5におけるAAA形成において</su...

腹部大動脈瘤(AAA)は、腹部大動脈の永久的な拡張を特徴とする致命的な心血管疾患であり、破裂が発生すると死亡率が高くなります。AAAは、加齢、喫煙、男性の性別、高血圧、および高脂血症に関連しています1。細胞外マトリックス線維タンパク質分解、免疫細胞浸潤、血管平滑筋細胞の喪失など、いくつかの病理学的プロセスがAAA形成に寄与することが示されています。現在、AAAの病理学的メカニズムはとらえどころのないままであり、AAA1の治療のための証明された薬物はない。ヒトAAAの研究は、ヒト大動脈サンプルがほとんど存在しないために限られています。したがって、皮下アンジオテンシンII(AngII)注入、血管周囲または管腔内エラスターゼインキュベーション、および血管周囲リン酸カルシウムの適用を含む、いくつかの化学修飾誘発動物AAAモデルが確立され、広く採用されています2。一般的に使用されるマウスモデルは、リン酸カルシウム(CaPO4)を腎下腹部大動脈の外膜に適用することであり、これは費用効果が高く、遺伝子改変を必要としない。
動脈瘤変化を誘導するためのウサギの頸動脈へのCaCl2の直接大動脈周囲適用は、Gertzらによって最初に報告され3、後にマウスの腹部大動脈に適用された。このモデルは、マウス4のCaPO4結晶を使用して大動脈拡張を促進するために山之内らによって開発されました4。CaPO4のマウス大動脈への浸潤は、深いマクロファージ浸潤、細胞外マトリックスの分解、カルシウム沈着など、ヒトAAAで観察される多くの病理学的特徴を再現します。高脂血症などのヒトAAAの危険因子も、マウス5においてCaPO4誘導性AAAを増強する。ApoE-/-またはLDLR-/-マウスにおけるAngII灌流誘発AAAとは対照的に、CaPO4誘導性AAAは、ヒトAAAを模倣する腎下大動脈領域で生じる。現在、この方法は、遺伝子改変マウスにおけるAAA発生に対する感受性を評価し、薬物の抗AAA効果を評価するために広く適用されている6,7。

<table><tbody><tr><td>CaCl2</td><td>MECKLIN</td><td>C805225</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Biomed</td><td>SH5001-01</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>HARVEYBIO</td><td>MB5051</td><td></td></tr><tr><td>小動物用人工呼吸器</td><td>RWD</td><td>H1550501-012</td><td></td></tr></tbody></table>

リン酸カルシウム誘発マウス腹部大動脈瘤モデル

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

腹部大動脈瘤(AAA)は、世界中で発生する生命を脅かす心血管疾患であり、腹部大動脈の不可逆的な拡張を特徴としています。現在、いくつかの化学的に誘導されたマウスAAAモデルが使用されており、それぞれがAAAの病因の異なる側面をシミュレートしている。リン酸カルシウム誘導性AAAモデルは、アンジオテンシンIIおよびエラスターゼ誘導性AAAモデルと比較して、迅速かつ費用効果の高いモデルです。CaPO4 結晶をマウス大動脈に適用すると、弾性線維の分解、平滑筋細胞の喪失、炎症、および大動脈拡張に関連するカルシウム沈着が起こります。この記事では、CaPO4誘発AAAモデルの標準プロトコルを紹介します。プロトコルには、材料の準備、腎下腹部大動脈の外膜へのCaPO4の外科的適用、大動脈瘤を視覚化するための大動脈の採取、およびマウスの組織学的分析が含まれます。

CaPO4投与の14日後、C57BL/6J雄マウスを安楽死させ、大動脈を採取して洗浄した。大動脈の形態を画像化し、AAA形成を可視化した。図1A-Bに示すように、CaPO4の適用は腹部下大動脈の拡張をもたらした。組織学的には、CaPO4は、エラスチンの切断によって示されるように、弾性繊維の劇的な分解をもたらした(図1C)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64173/64173fig01.jpg"> 図1:8週齢の雄C57BL/6Jマウスを、14日後に採取した生理食塩水(偽)またはCaPO4で処理した。...

このプロトコルは、AAAの病理学的特徴と分子メカニズムを研究するためのリン酸カルシウム誘発腹部大動脈瘤(AAA)マウスモデルについて説明しています。

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

このプロトコールは、腹部大動脈瘤の分子機構における病理学的特徴を研究するためのリン酸カルシウム誘発腹部大動脈瘤トリプルAマウスモデルを記載する。リン酸カルシウム誘発腹部大動脈瘤モデルは、アンジオテンシンチューブおよびエラスターゼ誘発腹部大動脈瘤モデルと比較して迅速で費用効果の高いモデルです。手順を実演するのは、私たちの研究室のフェローであるここのポスドクターであるZeyu Caiです。開始するには、幅0.3センチのパウダーフリーゴム手袋とガーゼをカットします。次に、8〜10週齢のC57BL6Jメイヨーマウスを購入し、12時間の明るい暗サイクルと食物と水への自由なアクセスを備えたエアコン付きの環境に動物を収容します。次に、手術前にガーゼ、綿棒、はさみ、鉗子をオートクレーブし、ベタジン、70%エタノール、消毒手洗い液を入手します。麻酔をかけたマウスの腹毛を電気バリカンまたは脱毛クリームで剃ります。次に、ベタジンで剃った部分を綿棒で拭き取り、続いて70%エタノールを円を描くように数回拭きます。次に、ハサミを使用して腹部の正中線に沿って下腹部を約1.5センチメートル切開します。通常の生理食塩水で湿らせた滅菌綿棒を使用して、腎下大動脈が見えるまで腸を慎重に取り除きます。次に、腎下大動脈の結合組織と脂肪を約0.5センチメートルの切片で解剖し、背側の小血管の裂け目を避けます。次に、生理食塩水を染み込ませたゴム手袋ストリップを腹部大動脈と腹部主静脈の下に詰め、綿棒を使用して余分な液体を拭き取ります。その後、0.5モルの塩化カルシウムを浸したガーゼを腎下腹部血管系の外膜に10分間詰めます。ガーゼを取り出し、PBS溶液に浸した別のガーゼを5分間詰めて、大動脈の外膜にC2にオルトリン酸カルシウム結晶を生成します。次に、ゴム手袋のストリップとガーゼを慎重に取り外します。マウスの腸管をリセットした後、腹部切開部と皮膚を5ゼロ縫合糸で縫合する。次に、マウスが意識を取り戻すまで、マウスを加熱パッドの上に置きます。マウスをさらに14日間飼育し、手術後にマウスを注意深く監視し、その後は少なくとも毎日観察します。手術の14日後、安楽死させたマウスの胸腔と腹腔を腹側に切り開き、右心房を切り開いた。心臓の左心室を通してPBSバッファーをマウスに大量に注入して大動脈の血液を除去し、原稿に記載されているように4%パラホルムアルデヒドを灌流します。外膜組織と脂肪を実体顕微鏡で慎重に取り除きます。次に大動脈を採取し、5ミリリットルの4%パラホルムアルデヒドを含むチューブに48時間入れます。次に、昆虫の針で黒いワックスプレートに大動脈を固定し、大動脈画像の取得に進みます。オルトリン酸カルシウムの塗布の14日後、大動脈の形態を画像化し、腹部大動脈瘤の形成を視覚化した。オルトリン酸カルシウムは腹部下大動脈の拡張を引き起こし、エラスチンの切断に代表されるように弾性線維の劇的な劣化をもたらすことが観察された。通常の生理食塩水で湿らせた滅菌綿棒を使用して、腎下大動脈が見えるまで腸を取り除き、次に腎下大動脈から結合組織と脂肪を抽出します。全体として、リン酸カルシウム誘発マウス腹部大動脈瘤モデルは、腹部大動脈瘤の分子メカニズムと治療戦略を探求するための迅速かつ費用効果の高いアプローチであり、他のモデルと並行して適用して、人間の腹部大動脈瘤の特徴を完全に模倣することができます。

a-calcium-phosphate-induced-mouse-abdominal-aortic-aneurysm-model

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

このビデオでは、腹部大動脈の大動脈セグメントにブタ膵臓エラスターゼの過渡腔内注入を介してマウスでは腹部大動脈瘤（AAA）を誘導する方法を示しています。モデルは、多数のトランスジェニックやノックアウトマウスの進展に伴い、AAAの病理に広範な洞察を追加する機能を持っています。...

エラスターゼによるマウス実験的腹部大動脈瘤の作成

放射線不透過性鉛ベースのシリコーンゴムを使用して大動脈径の大動脈瘤マウスモデルで定量化のためマウスの血管を灌流する詳細な方法について説明します。...

Aortopathy β-アミノプロピオニ トリルによる大動脈瘤と解離のマウスモデルでのマイクロ CT 定量分析

この新しいモデルは、バルーン血管形成術、エラスターゼ/コラゲナーゼ灌流、局所エラスターゼ適用、およびコラーゲン架橋を妨害する経口化合物β-アミノプロピオンニトリル投与の組み合わせを使用して、豚中の堅牢な腹腹部大動脈瘤を作成します。...

尿毛腹部大動脈瘤の豚モデル

本プロトコールは、マウスの腹部内大動脈の外側へのエラスターゼの直接適用によるエラスターゼ誘導AAAモデルのための標準化された外科的方法を記載する。...

エラスターゼの血管周囲適用により誘導されるマウス腹部大動脈瘤モデル

この原稿では、塩化カルシウムとエラスターゼを使用してマウス腹部大動脈瘤モデルを確立するためのプロトコルを提示し、以前のモデリング方法の利点を組み合わせています。このモデルは、腹部大動脈瘤の根底にある病態生理学的メカニズムを調査するために利用できます。...

アドベンチアル塩化カルシウムとエラスターゼ浸潤によるマウス腹部大動脈瘤モデル

このプロトコルは、エラスターゼを腎下大動脈に直接適用し、飲料水を通じてβ-アミノプロピオニトリルを投与することの組み合わせにより、マウスの進行性腹部大動脈瘤をモデル化するための系統的な外科的アプローチを説明しています。...

局所エラスターゼと経口β-アミノプロピオニトリルの組み合わせによるマウスにおける高度な腹部大動脈瘤モデリング

このプロトコルは、エラスチン感作と血管周囲エラスターゼの適用を用いてC57BL/6マウスにおける腹部大動脈瘤(AAA)を繰り返しかつ信頼性の高い誘導方法として提供し、免疫増細成分を含むAAAモデルとして提供します。...

エラスチン感作および血管周囲エラスターゼを用いたマウス腹部大動脈瘤モデルの信頼性の高い作成

血管新生は、既存の血管か​​らの血管の出芽は、自然および病理学的プロセスの両方に関連付けられています。ここでは、血管新生増強と阻害剤が直接文化の大動脈輪に追加できる大動脈リングアッセイを示す。発芽しneovessel伸長は6-12日の期間にわたって大動脈リングを調べることによって決定することができます。...

大動脈リングアッセイ

卵巣癌の同所性動物モデルは、より良い人間の病気を複製し、従って、癌の進行と治療に対する腫瘍の反応の理解を高める。マウスモデルでは、ルシフェラーゼを発現する卵巣腫瘍細胞のintrabursal注射を受け取ります。治療は、経口胃管栄養法により投与される。腫瘍の成長はによって監視されています...

生体イメージングおよび卵巣癌の同所性マウスモデルにおける治療的処置の

血管内皮細胞は、多くの重要な心血管疾患において重要な役割を果たしています。この記事では、特別な機器を使用せずにマウス大動脈から内皮細胞を分離および増殖する簡単な方法について説明します。私たちのプロトコルは、内皮細胞の生理病理学におけるメカニズムを特定する効果的な手段を提供します。...

マウス大動脈内皮細胞の単離および初代培養

学ぶリン酸カルシウム誘発マウス腹部大動脈瘤モデル。C57BL6Jマウスを用いた迅速かつ費用対効果の高い方法で、弾性線維の分解や大動脈拡張を観察し、腹部大動脈瘤の病態メカニズムと治療戦略を探索する。

リン酸カルシウム誘発マウス腹部大動脈瘤モデル

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