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DOI: 10.3791/64212-v
Linlin Zhang1,2, Mengjia Liu1,2, Meng Zhang1,2, Junhong Ai1,2, Jiao Tian1,2, Ran Wang1,2, Zhengde Xie1,2
1Beijing Key Laboratory of Pediatric Respiratory Infectious Diseases, Key Laboratory of Major Diseases in Children, Ministry of Education, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Laboratory of Infection and Virology, Beijing Pediatric Research Institute, Beijing Children's Hospital,Capital Medical University, National Center for Children's Health, 2Research Unit of Critical Infection in Children, 2019RU016,Chinese Academy of Medical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article describes a method that combines immunomagnetic beads and fluorescence-activated cell sorting to isolate and analyze specific immune cell subpopulations from peripheral blood mononuclear cells. The method allows for the purification and analysis of magnetic and fluorescently labeled cells.
免疫磁気ビーズと蛍光活性化細胞ソーティングを組み合わせて、末梢血単核球(単球、CD4+ T細胞、CD8+ T細胞、B細胞、およびナチュラルキラー細胞)の定義された免疫細胞サブポピュレーションを分離および分析する方法について説明します。この方法を使用すると、磁気および蛍光標識された細胞を精製および分析できます。
この方法により、IM患者の同じ疾患状態にある異なる免疫細胞の特性評価が可能になり、EBV感染のメカニズムの理解が広がります。手順を実演するのは、私たちの研究室の医師であるリンリン・チャンです。まず、1.5ミリリットルのマイクロ遠心チューブで事前に分離したPBMCを取り、室温で300 Gで10分間回転させます。
上清を捨て、調製した80マイクロリットルのバッファーで細胞を再懸濁します。次に、20マイクロリットルのCD14マイクロビーズを細胞懸濁液に加え、ピペッティングによりよく混合し、氷上でチューブを15分間インキュベートする。次に、1ミリリットルのバッファーを使用してPBMCを洗浄し、室温で10分間300 Gで遠心分離します。
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