Name: 術中副甲状腺イメージングのための簡便かつ効果的なラットモデルの確立 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-17T14:05:00.000+00:00
Duration: 7 min 12 s
Description: 学ぶ 術中副甲状腺イメージングのラットモデル構築法。酸化鉄ナノ粒子を用いた負染色により甲状腺と副甲状腺を明確に区別し、甲状腺癌手術時の副甲状腺保護と手術成績向上に貢献する簡便で効果的な動物モデルです。

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この研究は、中国国家自然科学財団(NSFC)(82172598)、中国浙江省自然科学財団(LZ22H310001)、中国浙江省衛生委員会の551健康人材トレーニングプロジェクト、および中国浙江省の医療および健康科学技術プロジェクト(2021KY110)の支援を受けました。

すべての動物実験は、中国科学院の基礎医学および癌研究所の施設内動物管理および使用委員会(IACUC)によって承認されています。 これは非生存手術です。
1.動物
<ol><li>術中のPGイメージングには、体重250 gの6〜8週齢の雌SDラットを使用します。</li>
</ol>2.麻酔
<ol><li>麻酔器の電源を入れます。</li>
	<li>始める前に、麻酔気化器のイソフルランレベルがいっぱいであることを確認してください。次に、酸素をオンにして、流量を0.4〜0.8 L / minに設定します。3〜5%イソフルランで麻酔を誘発し、2%イソフルラン(流量:0.4〜0.8 L / min)に維持します。.</li>
	<li>SDラットを麻酔器の箱に入れ、 チャンネル モデルを選択して動物の麻酔を開始します。</li>
	<li>箱の中のラットの活動を観察してください。ラットが昏睡状態に陥ったら、麻酔を維持するためにノーズコーンに移動します(痛み反射と角膜反射のない無意識の仰臥位)。</li>
	<li>麻酔マスクを使用してラットの鼻を覆い、麻酔器を マスク モードに切り替えて、手術中に動物を麻酔下に置きます。</li>
</ol>3.姿勢と固定
<ol><li>麻酔をかけたラットを手術手術台の外科用ドレープに移します。手術中に動物の体温を維持するために、動物の下に予熱した加熱パッドを置きます。</li>
	<li>輪ゴムを使用して、ラットの手足を手術台に固定します。ドレープで作られた円筒形の枕をラットの肩の下に置き、頭を後ろに傾け、首の部分を完全に露出させます。</li>
	<li>麻酔中の乾燥を防ぐために、ラットの両目に人工涙液軟膏を塗布します。</li>
</ol>4.脱毛
<ol><li>脱毛クリームを首の部分に塗ります:顎下腔まで、剣状突起まで、そして胸鎖乳突筋の外側まで両側に。</li>
	<li>3分後、髪と脱毛クリームをティッシュでやさしく拭きます。</li>
</ol>5.滅菌
<ol><li>ヨードフォア綿球を使用して、首の中央から周囲まで手術部位を3回消毒します。脱毛した部分のみを消毒してください。</li>
</ol>6.外科用ドレープ敷設
<ol><li>ラットの首の手術領域を覆うために外科用ドレープを使用してください。外科用ドレープの穴を動物の消毒エリアに合わせてください。</li>
</ol>7.切開
<ol><li>切開を行う前に、つま先のつまみ反射の欠如を介して麻酔の手術面を確認します。次に、刃をメスにはめ込み、メスを使用してラットの首の前正中線を縦方向に切開します。切開の長さが約5 cmで、真皮のみであることを確認してください。</li>
</ol>8.前頸部筋からの皮下組織の解剖
<ol><li>切開の両側に沿って皮膚を持ち上げます。</li>
	<li>はさみを使用して、 リネアアルバセルビカリスに沿って縦方向に切断します。</li>
	<li>鉗子を使用して、胸骨舌骨筋と胸骨甲状腺筋を分離します。</li>
</ol>9.前頸部の筋肉を両側に固定します
<ol><li>血管鉗子を使用して、分離した胸骨舌骨筋と胸骨甲状腺筋を首の前に固定し、固定された組織を外側に引き出します。</li>
	<li>リトラクターまたは針を使用して、縫合糸(3-0#)をクランプされた組織に通し、結び目を作り、縫合糸を手術台の外科用ドレープに固定します。</li>
</ol>10.甲状腺の局在
<ol><li>甲状腺軟骨と輪状軟骨を手術領域の上部境界として配置します。盾の形状に基づいて甲状軟骨を特定し、輪状軟骨をリングの形状に基づいて識別します。</li>
	<li>気管を手術領域の下側境界として配置します。管状の軟骨リングの形状に基づいて、首の前部と中央の気管を探します。</li>
	<li>上側と下側の境界の間に甲状腺を配置します-気管の反対側にある蝶の形をした赤い腺。</li>
</ol>11.PGの視覚的識別
<ol><li>甲状腺の上側と外側にあるPGを見つけます。長さ約1.2〜2 mm、幅1.0〜1.5 mmの紡錘形の2つのPGを探しますが、赤みがかっていますが、特定の境界を持つ周囲の甲状腺よりも明るいです。</li>
	<li>PGを気管、甲状腺、喉頭で正面写真を撮り、注射前後のIONPの効果を定量的に比較します。</li>
	<li>食道の後ろを解剖し、リトラクターを使用してPGの右側を露出させます。甲状腺と気管を含むPGの右側の写真を撮ります。</li>
	<li>リトラクターを交換してPGの反対側を露出させ、甲状腺と気管で左側の写真を撮ります。</li>
</ol>12.IONPの甲状腺注射
<ol><li>インスリン注射器を使用して、10 μLのIONPs懸濁液(リン酸緩衝生理食塩水中20 mg / mL)を甲状腺の中心に局所的に注入します。注射部位をガーゼで5秒間静かに押します。</li>
</ol>13.IONP注射後のPGの同定
<ol><li>注射後、甲状腺内でのIONPの急速な拡散を観察しますが、PGはPGを否定的に染色し、周囲の甲状腺と区別するため、PGは拡散しません。</li>
	<li>陰性に染色されたPGの正面写真を、気管、甲状腺、喉頭と一緒に撮ります。</li>
	<li>上記と同じ手順を使用して、負に染色されたPGの左側と右側の写真を撮ります。</li>
</ol>14.甲状腺とPGによる喉と気管の切除
<ol><li>ラットが過剰なイソフルラン(5%イソフルランを5分以上)吸入し、深部麻酔下に入ったら、0.5mLの飽和塩化カリウム溶液の心臓内注射によって安楽死させます。.</li>
	<li>死後、喉、気管、甲状腺、およびPGを取り除きます。</li>
	<li>ヒュームフードの下で、除去した喉、気管、甲状腺、およびPG検体を4%パラホルムアルデヒド溶液に24時間入れます。</li>
</ol>15.組織病理学研究
<ol><li>組織を脱水し、パラフィンに埋め込みます。厚さ5μmの切片にスライスします。切片をオーブンで37°Cで一晩焼き、65°Cで1時間焼きます。</li>
	<li>切片をヘマトキシリンとエオジン(H&E)で75%、95%、100%グラジエントアルコールで3 x 5分間洗浄し、室温で水洗した後、染色片を染色します。</li>
	<li>病理学者に光学顕微鏡でH&E染色切片を検査してもらいます。</li>
</ol>

<ol><li>Cope, O., Donaldson, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relation+of+thyroid+and+parathyroid+glands+to+calcium+and+phosphorus+metabolism.+Study+of+a+case+with+coexistent+hypoparathyroidism+and+hyperthyroidism%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Relation of thyroid and parathyroid glands to calcium and phosphorus metabolism. Study of a case with coexistent hypoparathyroidism and hyperthyroidism.</a> The Journal of Clinical Investigation. 16 (3), 329-341 (1937).</li>
<li>Mansberger, A. R., Wei, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+embryology+and+anatomy+of+the+thyroid+and+parathyroid+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Surgical embryology and anatomy of the thyroid and parathyroid glands.</a> Surgical Clinics of North America. 73 (4), 727-746 (1993).</li>
<li>Koch, A., Hofbeck, M., Dorr, H. G., Singer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypocalcemia-induced+heart+failure+as+the+initial+symptom+of+hypoparathyroidism%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+f%C3%BCr+Kardiologie%22%5BJournal%5D)">Hypocalcemia-induced heart failure as the initial symptom of hypoparathyroidism.</a> Zeitschrift für Kardiologie. 88 (1), 10-13 (1999).</li>
<li>Shoback, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presentation+of+hypoparathyroidism%3A+etiologies+and+clinical+features%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Endocrinology+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Presentation of hypoparathyroidism: etiologies and clinical features.</a> The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 101 (6), 2300-2312 (2016).</li>
<li>Arneiro, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-report+of+psychological+symptoms+in+hypoparathyroidism+patients+on+conventional+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Endocrinology+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Self-report of psychological symptoms in hypoparathyroidism patients on conventional therapy.</a> Archives of Endocrinology Metabolism. 62 (3), 319-324 (2018).</li>
<li>Olson, E., Wintheiser, G., Wolfe, K. M., Droessler, J., Silberstein, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+thyroid+cancer%3A+a+review+of+the+national+cancer+database%2C+2000-2013%5BTitle%5D)+AND+%22Cureus%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of thyroid cancer: a review of the national cancer database, 2000-2013.</a> Cureus. 11 (2), 4127(2019).</li>
<li>Du, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+thyroid+cancer%3A+incidence+and+mortality+in+China%2C+2015%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Oncology%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of thyroid cancer: incidence and mortality in China, 2015.</a> Frontiers in Oncology. 10, 1702(2020).</li>
<li>Barrios, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidental+parathyroidectomy+in+thyroidectomy+and+central+neck+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Incidental parathyroidectomy in thyroidectomy and central neck dissection.</a> Surgery. 169 (5), 1145-1151 (2021).</li>
<li>Sitges-Serra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inadvertent+parathyroidectomy+during+total+thyroidectomy+and+central+neck+dissection+for+papillary+thyroid+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Inadvertent parathyroidectomy during total thyroidectomy and central neck dissection for papillary thyroid carcinoma.</a> Surgery. 161 (3), 712-719 (2017).</li>
<li>Sakorafas, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidental+parathyroidectomy+during+thyroid+surgery%3A+an+underappreciated+complication+of+thyroidectomy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Incidental parathyroidectomy during thyroid surgery: an underappreciated complication of thyroidectomy.</a> World Journal of Surgery. 29 (12), 1539-1543 (2005).</li>
<li>Sahyouni, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rate+of+incidental+parathyroidectomy+in+a+pediatric+population%5BTitle%5D)+AND+%22OTO+Open%22%5BJournal%5D)">Rate of incidental parathyroidectomy in a pediatric population.</a> OTO Open. 5 (4), (2021).</li>
<li>Erickson, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence%2C+survival+time%2C+and+surgical+treatment+of+parathyroid+carcinomas+in+dogs%3A+100+cases+%282010-2019%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Veterinary+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Incidence, survival time, and surgical treatment of parathyroid carcinomas in dogs: 100 cases (2010-2019).</a> Journal of the American Veterinary Medical Association. 259 (11), 1309-1317 (2021).</li>
<li>Bi, R., Fan, Y., Luo, E., Yuan, Q., Mannstadt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+techniques+to+create+hypoparathyroid+mice%3A+parathyroidectomy+using+GFP+glands+and+diphtheria-toxin-mediated+parathyroid+ablation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Two techniques to create hypoparathyroid mice: parathyroidectomy using GFP glands and diphtheria-toxin-mediated parathyroid ablation.</a> Journal of Visualized Experiments. (121), e55010(2017).</li>
<li>Soulsby, S. N., Holland, M., Hudson, J. A., Behrend, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonographic+evaluation+of+adrenal+gland+size+compared+to+body+weight+in+normal+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Radiology+%26+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Ultrasonographic evaluation of adrenal gland size compared to body weight in normal dogs.</a> Veterinary Radiology & Ultrasound. 56 (3), 317-326 (2015).</li>
<li>Zheng, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biodegradable+iron+oxide+nanoparticles+for+intraoperative+parathyroid+gland+imaging+in+thyroidectomy%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS+Nexus%22%5BJournal%5D)">Biodegradable iron oxide nanoparticles for intraoperative parathyroid gland imaging in thyroidectomy.</a> PNAS Nexus. 1 (3), 087(2022).</li>
</ol>

P.G.とW.Z.は、中国科学院がん病院(浙江がん病院)がプロジェクトに基づいて提出した特許出願の共同発明者です。他の著者は利益相反を宣言しません。

我々は、甲状腺の中心に局所的に注入され、甲状腺内で拡散されたがPGではなく、甲状腺内に拡散された黒色IONPを用いたラットPGのIONPs誘導陰性イメージング技術を実証する。顕微鏡を使用せずに肉眼でPGを明確に識別できます。緑色蛍光タンパク質をPGで選択的に発現させたトランスジェニックマウスが報告されているが13、この論文に記載されているモデルはより簡単に実行できる。注射後、ラット1匹あたり~1分しかかからず、甲状腺とPGの明らかな違いは肉眼で観察できます。
さらに、このモデルの別の利点は、新しいPG同定方法を評価するために前臨床試験で現在使用されている大型動物モデル(例えば、イヌ12)よりも、このラットモデルの方がコストおよび操作上の困難さがかなり低いことである。SDラットの平均コストはBALB / Cマウスの平均コストに近く、犬の30倍以上安価です。ラットモデルのこの低コストの利点により、大型動物モデルでは困難な前臨床研究で被験者数を増やし、テストを繰り返すことができます。一方、SD...

副甲状腺(PG)は、ヒトや他の脊椎動物の首にある小さな楕円形の内分泌腺であり、副甲状腺ホルモンを産生および分泌して、血液および骨中のカルシウムおよびリンレベルを調節およびバランスさせます1。人間は通常、甲状腺葉の後ろのさまざまな場所に2対のPGを持っています。ヒトPGのサイズは通常6 mm x 4 mm x 2 mmで、重量は約35〜40 mg2です。PGの除去または損傷は、低カルシウム血症および低または検出不能レベルの副甲状腺ホルモンを特徴とする内分泌障害である副甲状腺機能低下症(HP)を引き起こし、けいれん様のけいれんから奇形の歯、慢性腎臓病まで幅広い症状を引き起こします。これらの合併症のいくつかは致命的です(例:.、心不全および発作)3,4,5;したがって、PGは体の代謝を調節し、生命を維持するのに不可欠です。
HPは、前頸部手術後の最も一般的な合併症の1つであり、特に甲状腺摘出術において、世界で最も一般的な内分泌癌である甲状腺癌の確立された治癒的治療法です6,7。甲状腺摘出術後のHPは、手術室でPGを甲状腺葉やその他の周辺組織(リンパ節や末梢脂肪粒子など)からリアルタイムで確実に識別する能力が著しく欠如しているため、手術におけるPGの直接的な外傷、虚血、または除去によって主に引き起こされます。2021年、Barriosらは、1,114人の甲状腺摘出症例の中で平均PGのミスセクション率が22.4%であり、最小エラー率が7.7%であった経験豊富な外科医でさえ報告しました8。このような高いPG誤切開率は、他の同様の報告9、10、11と一致している。したがって、誤った副甲状腺摘出術は、一過性および永続的な術後HPの独立した危険因子です。
効果的な術中PG同定法の開発は、この重要な満たされていない医療ニーズに対処するための鍵を握っています。しかし、前臨床研究における動物モデルの欠如によって、それは厳しく制限されてきました。これまで、術中のPG同定調査のほとんどは、ヒト患者や大型動物(イヌなど)12に対して行われており、費用がかかり、倫理的承認を得るのが難しく、被験者数を拡大し、検査を繰り返すことが困難でした。一方、生物学研究で最も一般的に使用される脊椎動物モデルであるマウスは、PGが非常に小さく、サイズが1mm未満です13。この制限により、マウスPGモデルは術中のPG同定研究にはほとんど使用されていません。
この論文は、術中のPG同定研究のためのシンプルで簡単で効果的なラットモデルの確立を報告します。甲状腺摘出手術におけるPGイメージング造影剤IONPをテストするための信頼できる動物モデルとして、外科的改変や遺伝子工学を伴わないネイティブSprague-Dawley(SD)ラットの使用を調査しました。このラットモデルは、PGとその周囲の微小環境の生理学的構造がヒトと非常に類似していることを示しており、ラットPGのサイズはマウスと比較して視覚的に検出できるほど大きい。ほとんどのラットは甲状腺の両側に1つのPGを持っています。このラットモデルの単純さと有効性は、甲状腺摘出術手術で術中のIONP増強PGイメージングを行うことによって実証されています。

<table><tbody><tr><td>アルコール</td><td>李風</td><td>9400820067</td><td></td></tr><tr><td>麻酔器</td><td>RWD会社</td><td>R520IE</td><td>機械番号</td></tr><tr><td>ブレード</td><td>ダオピアン</td><td>TB-JZ-10#</td><td></td></tr><tr><td>円筒形枕</td><td></td><td></td><td>は自分で作った</td></tr>脱<tr><td>毛クリーム</td><td>ナイール</td><td>TMG-001</td><td></td></tr><tr><td>電子スケール</td><td>ホンシンダ</td><td>CN-HXD2</td><td></td></tr><tr><td>eosin</td><td>Thermo Fisher(ウォルサム、米国)。</td><td>C0105S-2</td><td></td></tr><tr><td>エリスロマイシン</td><td>翔吉(北京、中国)</td><td>200409</td><td></td></tr><tr><td>ガーゼ</td><td>Fulanns</td><td>YY0331-2006</td><td></td></tr><tr><td>加熱パッド</td><td>Johon(深セン、中国)</td><td>JH-36-2006</td><td></td></tr><tr><td>ヘマトキシリン</td><td>サーモフィッシャー(ウォルサム、米国)。</td><td>C0105S-1</td><td></td></tr><tr><td>インスリン注射針</td><td>江陰南泉高分子20170702</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ヨードフォア綿球</td><td>HOYON</td><td>19-6007</td><td></td></tr><tr><td>酸化鉄ナノ粒子溶液</td><td>Zhongke Leiming Technology(北京、中国)</td><td>Mag9110-05</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>Sigma Aldrich(米国セントルイス)。</td><td></td><td></td>21112801</tr><tr><td>ニードルホルダー</td><td>Meijun</td><td>MH0587</td><td></td></tr><tr><td>手術台</td><td>BioJane</td><td>BJ-P-M</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド溶液</td><td>Biosharp</td><td>21269333</td><td></td></tr><tr><td>ゴム</td><td>G-CLONE</td><td> XT41050</td><td></td></tr><tr><td>スキャンマシン</td><td>Olympus</td><td>Slideview VS200</td><td></td></tr><tr><td>外科用鉗子</td><td>Suping</td><td>SPHC-0676</td><td></td></tr><tr><td>外科用ナイフハンドル</td><td>Aladdin</td><td>S3052-06-1EA</td><td></td></tr><tr><td>外科用リトラクター</td><td>TOCYTO</td><td>18-4010</td><td></td></tr><tr><td>手術用ハサミ</td><td>Suping</td><td>SPHC-0795</td><td></td></tr><tr><td>手術用タオル</td><td>技術に沿って</td><td>YCKJ-RJ-036205</td><td></td></tr><tr><td>縫合</td>糸 <td>Ethicon</td><td>SA84G</td><td></td></tr><tr><td>縫合糸針</td><td>金環(上海、中国)</td><td>F301</td><td></td></tr><tr><td>血管鉗子</td><td>技術に沿って</td><td>YCKJ-RJ-016218</td><td></td></tr><tr><td>ウォーターバススライドドライヤー</td><td>華須(金華、中国)</td><td>HS-1145</td><td></td></tr></tbody></table>

術中副甲状腺イメージングのための簡便かつ効果的なラットモデルの確立

Establishment of a Simple and Effective Rat Model for Intraoperative Parathyroid Gland Imaging

副甲状腺(PG)の同定は、甲状腺摘出術における重要なアンメットニーズです。PGの同定は、甲状腺と色が似ているため、甲状腺手術では困難です。前臨床研究における効果的な動物モデルの欠如は、PG同定技術の開発にとって深刻な制限です。このプロトコルは、PG同定のための簡単で効果的なラットモデルの確立を可能にする。このモデルでは、黒色酸化鉄ナノ粒子(IOMP)が甲状腺に局所的に注入され、甲状腺内で急速に拡散しますが、PGは拡散しません。陰性に染色されたPGと陽性に染色された甲状腺は、外部顕微鏡を必要とせずに肉眼で簡単に識別できます。PGの位置は、黒いIONPの色に基づいて、甲状腺とPGの間の色のコントラストを上げることによって識別できます。このラットモデルは低コストでPG同定に便利であり、IONPは新しいPG造影剤です。

この動物モデルでは、SDラットの首を外科的に切開し、気管、喉頭、および周辺組織を露出させました。次に、甲状腺は気管の両側に視覚的に位置していました。蝶の形をしており、大きさは約3mm×5mmです。PGは通常、甲状腺の上部にあり、その色は甲状腺葉の色と非常に似ているため、肉眼で区別することは非常に困難です(図1)。
注射後、造影剤(図1 および 図2)であるIONPは甲状腺内で容易に拡散し、黒色に染色されますが、組織密度が高いためPGに浸潤することはできません。PGと甲状腺の間のIONPの不均衡な分布は、顕著なコントラストをもたらし、外部機器を必要とせずに肉眼で容易に視覚化することができます。 図2 は、ラットの左甲状腺のIONPsで陰性染色されたPGの代表的な画像であり、PGと甲状腺のコントラストが顕著であり、ラットPGのサイズは約2mm×1mm...

今日まで、副甲状腺(PG)同定法の開発は、前臨床研究における動物モデルの欠如によって制限されています。本研究では、術中のPGイメージングのための簡便かつ効果的なラットモデルを確立し、酸化鉄ナノ粒子を新規PG造影剤として用いることでその有効性を評価します。

Parathyroid gland (PG) identification is a critical unmet need in thyroidectomy. The identification of the PG is challenging in thyroid surgery as it is ...

副甲状腺は非常に重要な機能を持つ小さな臓器です。私たちのプロトコルは、甲状腺癌の甲状腺摘出術中に外科医がPGを保護するのに役立つ新しいPG識別技術の開発に使用できます。このモデルの主な利点は、IONPのネガティブイメージングを通じて甲状腺とPGの明確な違いを観察できることです。さらに、このラットモデルのコストと操作の難しさは、大型動物モデルよりもかなり低くなります。まず、手術中に動物の体温を維持するために、予熱した加熱パッドを手術台に置き、麻酔をかけたラットを手術台に置かれた手術用ドレープに移します。輪ゴムを使用して、ラットの手足を手術台に固定し、ドレープで作られた円筒形の枕をラットの肩の下に置き、頭を後ろに傾け、首の領域を完全に露出させ、次に脱毛クリームを首の領域、顎下腔まで、剣状突起まで、および胸鎖乳突筋の両側に塗布します。3分後、髪と脱毛クリームをティッシュでやさしく拭きます。次に、ヨードフォア綿球を使用して、首の中央とその周辺を滅菌します。そこから髪が取り除かれます。動物を外科用ドレープで覆い、穴を消毒した領域に合わせます。メスを使用して、ラットの首の前正中線に約5センチメートルの縦方向の切開を行います。切開部の両側に沿って皮膚を持ち上げ、ハサミを使用して、線状アルバ頸管に沿って縦方向に切断します。鉗子を使用して、胸骨舌骨筋と胸骨甲状腺筋を分離します。血管鉗子を使用して首の前で分離した筋肉を固定し、固定された組織を外側に引き出します。針を使用して、固定された組織に縫合糸を通します。結び目を作り、縫合糸を手術台の外科用ドレープに固定します。甲状軟骨を盾状から、輪状軟骨を手術領域の上側境界として、頸部の前後の管状軟骨の輪状形状を中心として気管の位置を特定する。上部と下部の境界の間の気管の反対側にある赤い蝶の形をした腺である甲状腺を見つけます。次に、赤みがかっているが周囲の甲状腺よりも明るい紡錘形の2つの副甲状腺を見つけ、甲状腺の上側と外側に特定の境界があります。気管、甲状腺、喉頭のある副甲状腺の正面写真を撮ります。食道の後ろを解剖し、開創器を使用して、副甲状腺の右側を露出させます。甲状腺と気管のある副甲状腺の右側写真を撮り、同様に腺の左側を露出させてキャプチャします。インスリン注射器を使用して、10マイクロリットルの黒色酸化鉄ナノ粒子懸濁液を甲状腺の中心に局所的に注入し、注射部位をガーゼで5秒間静かに押し、次に、副甲状腺を負に染色し、周囲の甲状腺と区別するため、甲状腺内の黒色酸化鉄ナノ粒子の急速な拡散を観察しますが、副甲状腺は観察しません。陰性に染色された副甲状腺の正面、左、右側の写真を、気管、甲状腺、喉頭とともに撮影します。注入後、造影剤である黒色酸化鉄ナノ粒子は甲状腺内で容易に拡散し、黒色に染色されますが、組織密度が高いため副甲状腺に浸潤することはで

establishment-simple-effective-rat-model-for-intraoperative

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

出典:Shannonhouse, J., et al.In vivo 無傷の背根神経節における一次感覚ニューロンのネットワークにおけるニューロン集団のカルシウムイメージング。J. Vis. Exp. （2023年).このビデオは、トランスジェニックマウスの後根神経節(DRG)のニューロン活動を監視するためのin...

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Hypoparathyroidマウスを作成するための2つのテクニック：副甲状腺GFP腺およびジフテリア毒素媒介副甲状腺アブレーションを使用して

本研究は、ブタモデルにおける甲状腺手術の術中神経モニタリングの標準的なプロトコルの開発を目指します。ここでは、電極の種類を比較して通常と負傷者の反回神経の電気生理学的特性を調査するため、全身麻酔を実証するプロトコルを提案します。...

ブタモデルにおける甲状腺手術の術中神経モニタリング

甲状腺/副甲状腺手術における新しく開発された外科用エネルギーデバイスの安全な適用は、外科医の注目を集めています。動物実験モデルは、人間の手術における不必要な試行錯誤を避けることができます。このレポートは、甲状腺/副甲状腺手術におけるSEDの安全性パラメーターを評価するための電気生理学的およびサーモグラフィー方法を実証することを目的としています。...

ブタモデルにおける甲状腺・副甲状腺手術における手術エネルギーデバイスの電気生理学的およびサーモグラフィー安全パラメータの検討

後天性副甲状腺機能低下症(HypoPT)の動物モデルは、HypoPTがミネラルイオン恒常性にどのように影響するかを理解し、新しい治療法の有効性を検証するために重要です。ここでは、カーボンナノ粒子を用いた副甲状腺摘出術(PTX)により後天性副甲状腺機能低下症(AHypoPT)ラットモデルを生成する技術を提示する。...

炭素ナノ粒子支援副甲状腺摘出術 による 副甲状腺機能低下ラットの作製

このプロトコルは、後根神経節(DRG)の外科的曝露とそれに続くGCaMP3(遺伝的にコードされたCa2+ インジケーター;緑色蛍光タンパク質-カルモジュリン-M13タンパク質 3)Pirt-GCaMP3マウスを用いて、同側後肢に様々な刺激を加えながら神経細胞集合体をCa2+...

インビボ 無傷の背根神経節における一次感覚ニューロンのネットワークにおけるニューロンアンサンブルのカルシウムイメージング

このプロトコルは、ブタから副甲状腺を調達するための迅速かつ非致死的な方法を提示します。この手順は、麻酔によるブタの準備、片側胸腺回収、胸腺内副甲状腺の ex vivo 同定と抽出の 3 つの主要なステップで構成されます。...

生体ブタからの副甲状腺の調達と 生体外 同定

この記事の目的は、喉頭神経モニターがない場合に口腔前庭アプローチを介してロボット甲状腺摘出術中に反回神経を特定して保護する方法を提示することです。...

経口ロボット甲状腺摘出術中の反回神経の同定と保護

血液脳関門（BBB）のマイクロバブル媒介集束超音波の乱れは、脳の非侵襲的な標的薬物送達のための有望な技術です。...

ラットモデルでの経頭蓋集束超音波を用いた血液脳関門のMRI誘導破壊

動物モデルは、生物医学研究において深刻な骨損傷を模倣するために頻繁に使用されます。マウスはサイズが小さいため、ほとんどの研究グループの能力を超えています。ここでは、マウスの実験的大腿骨欠損を確立および分析するための簡単な方法について説明します。...

マウスの簡単な重要なサイズの大腿欠陥モデル

学ぶ 術中副甲状腺イメージングのラットモデル構築法。酸化鉄ナノ粒子を用いた負染色により甲状腺と副甲状腺を明確に区別し、甲状腺癌手術時の副甲状腺保護と手術成績向上に貢献する簡便で効果的な動物モデルです。

術中副甲状腺イメージングのための簡便かつ効果的なラットモデルの確立

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