Single-Molecule Diffusion and Assembly on Polymer-Crowded Lipid Membranes

Satyaghosh Maurya; Vishwesh Haricharan Rai; Aditya Upasani; Saurabh Umrao; Diksha Parwana; Rahul Roy

doi:10.3791/64243

JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry

Single-Molecule Diffusion and Assembly on Polymer-Crowded Lipid Membranes

高分子密集脂質膜上での1分子拡散と集合

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10:43 min

July 19, 2022

DOI: 10.3791/64243-v

Satyaghosh Maurya¹, Vishwesh Haricharan Rai¹, Aditya Upasani¹, Saurabh Umrao^1,2, Diksha Parwana¹, Rahul Roy^1,3

¹Department of Chemical Engineering,Indian Institute of Science, ²Holonyak Micro & Nanotechnology Lab,University of Illinois, Urbana-Champaign, ³Center for BioSystems Science and Engineering,Indian Institute of Science

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、単一分子全反射蛍光(smTIRF)顕微鏡を使用して、人工混雑した脂質膜上の単一分子の結合、移動度、および組み立てを実行および分析するためのプロトコルが提示されます。

細胞膜は、埋め込まれたタンパク質と糖の存在のために非常に混雑しています。合成の混雑した支持脂質二重層での単一分子イメージングを実証します。このプラットフォームは、膜生体分子反応に対するクラウディングの影響を分子レベルで調べるのに有用です。

このプロトコルは、膜生体分子の結合、拡散、およびアセンブリの分析を説明しています。実験の成功は、基板の厳密な洗浄、二重層への損傷の回避、および単一分子イメージングにおける高いS/N比の維持にかかっています。私と一緒に手順を実演するのは、研究室の大学院生であるアディティア・ウパサニとヴィシュウェシュ・ハリチャラン・ライです。

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