Real-Time Quantitative Measurement of Tumor Cell Migration and Invasion Following Synthetic mRNA Transfection

Taeju Park; Neka Large

doi:10.3791/64274

合成mRNAトランスフェクション後の腫瘍細胞の遊走および浸潤のリアルタイム定量測定(英語)

JoVE Journal
Cancer Research

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JoVE Journal Cancer Research

Real-Time Quantitative Measurement of Tumor Cell Migration and Invasion Following Synthetic mRNA Transfection

合成mRNAトランスフェクション後の腫瘍細胞の遊走および浸潤のリアルタイム定量測定(英語)

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11:00 min

June 23, 2023

DOI: 10.3791/64274-v

Taeju Park^1,2, Neka Large¹

¹Children’s Mercy Research Institute,Children’s Mercy Kansas City, ²Department of Pediatrics,University of Missouri-Kansas City School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

多くのアップレギュレーションされた遺伝子は、腫瘍細胞の遊走と浸潤を刺激し、予後不良につながります。どの遺伝子が腫瘍細胞の遊走と浸潤を制御しているかを決定することは非常に重要です。このプロトコルは腫瘍のセルの移動そして侵入に対する遺伝子の高められた表現の効果をリアルタイムで調査するための方法を示す。

このプロトコルはインピーダンスと感覚のメッセンジャーRNAトランザクションを結合し、細胞移動および浸潤のインピーダンスによって基づく実時間測定が腫瘍細胞の移動および侵入を刺激する遺伝子の同一証明を促進することを示す。インピーダンスベースのリアルタイム細胞解析システムは、遺伝子発現変化時の腫瘍細胞の移動を定量的、連続的、包括的にモニタリングすることができます。腫瘍を過剰発現させ、腫瘍細胞の遊走を刺激する遺伝子は、がん治療における転移を阻害する潜在的な標的として特定できます。

まず、10x反応バッファー10マイクロリットル、PNE 1.5マイクロリットル、プラスミドDNA10マイクログラムをマイクロ遠心チューブに加え、プラスミドDNAを制限酵素で直鎖化します。ヌクレアーゼ遊離水を加えて、反応量を100マイクロリットルにします。反応混合物を摂氏37度で一晩インキュベートする前に、軽く叩いて回転させて混合します。

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