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成熟ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞単分子膜を用いたハイスループット心毒性スクリーニング
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JoVE Journal Bioengineering
High-Throughput Cardiotoxicity Screening Using Mature Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocyte Monolayers

成熟ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞単分子膜を用いたハイスループット心毒性スクリーニング

Full Text
2,521 Views
14:03 min
March 24, 2023

DOI: 10.3791/64364-v

Andre Monteiro da Rocha1, Andrew Allan2, Travis Block3, Jeffery Creech1, Todd J. Herron1

1Frankel Cardiovascular Regeneration Core Laboratory, Cardiovascular Medicine-Internal Medicine,University of Michigan, Ann Arbor, 2CAIRN Research, 3StemBioSys, Inc.

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞(hiPSC-CM)は、前臨床心毒性スクリーニングに動物を使用する代替手段を提供します。前臨床毒性スクリーニングにおけるhiPSC-CMの広範な採用に対する制限は、細胞の未熟な胎児様表現型です。ここでは、hiPSC-CMを堅牢かつ迅速に成熟させるためのプロトコルを紹介します。

このプロトコルは、研究者が市販または自社製のhiPSC-CMを成人様表現型に成熟させ、心毒性スクリーニングにおけるhiPSC-CMの予測値を大幅に改善することを可能にするため、重要です。このプロトコルの主な利点は、成熟したhiPSC-CMを高スループットフォーマットで提供し、カルシウムまたは電圧変化の光学マッピングを行うことです。このプロトコルは、疾患メカニズムを調査したり、心毒性の薬物をスクリーニングしたりするために使用できます。

手順を実演するのは、私の研究室の研究員であるジェフリー・クリーチです。心筋細胞メッキの1時間前に、成熟を誘導する細胞外マトリックス(MECM)プレートを200マイクロリットルのハンク平衡塩溶液(HBSS)で2回洗浄することから始めます。ウェルを水和させてください。

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