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DOI: 10.3791/64364-v
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ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞(hiPSC-CM)は、前臨床心毒性スクリーニングに動物を使用する代替手段を提供します。前臨床毒性スクリーニングにおけるhiPSC-CMの広範な採用に対する制限は、細胞の未熟な胎児様表現型です。ここでは、hiPSC-CMを堅牢かつ迅速に成熟させるためのプロトコルを紹介します。
このプロトコルは、研究者が市販または自社製のhiPSC-CMを成人様表現型に成熟させ、心毒性スクリーニングにおけるhiPSC-CMの予測値を大幅に改善することを可能にするため、重要です。このプロトコルの主な利点は、成熟したhiPSC-CMを高スループットフォーマットで提供し、カルシウムまたは電圧変化の光学マッピングを行うことです。このプロトコルは、疾患メカニズムを調査したり、心毒性の薬物をスクリーニングしたりするために使用できます。
手順を実演するのは、私の研究室の研究員であるジェフリー・クリーチです。心筋細胞メッキの1時間前に、成熟を誘導する細胞外マトリックス(MECM)プレートを200マイクロリットルのハンク平衡塩溶液(HBSS)で2回洗浄することから始めます。ウェルを水和させてください。
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