イン・ビトロ標的エピジェネティックサイレンシングのための遺伝子操作転写リプレッサーの選択

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2023年5月5日

10.3791/64403-v

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Alessandro Migliara¹ , Martino Alfredo Cappelluti¹ , Francesca Giannese² , Sara Valsoni¹ , Alberto Coglot¹ , Ivan Merelli¹^,³ , Davide Cittaro² , Angelo Lombardo¹^,⁴

¹San Raffaele Telethon Institute for Gene Therapy (SR-Tiget), IRCCS San Raffaele Scientific Institute, ²Center for Omics Sciences, IRCCS San Raffaele Institute, ³Institute for Biomedical Technologies, National Research Council, ⁴Vita-Salute San Raffaele University

ここでは、高い、長期にわたる、安定したオンターゲットサイレンシング効率と、低いゲノムワイドなオフターゲット活性を持つ、遺伝子操作された転写抑制因子(ETR)の in vitro 選択のためのプロトコルを提示します。このワークフローにより、候補となるETRの初期の複雑なレパートリーを、治療上重要な設定でのさらなる評価に適した短いリストに減らすことができます。