継代なしの正常および腫瘍乳腺組織からのマウスおよびヒト上皮オルガノイドの生成とイメージング

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2022年11月11日

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Serena L. Cornelius¹^,² , Megan M. Colonnetta²^,³^,⁴^,⁵ , Katherine E. Lake¹^,² , Clayton A. Smith¹^,² , Yu-An Zhang¹^,² , Evanthia T. Roussos-Torres⁶ , Sangeetha M. Reddy¹^,² , Elizabeth H. Chen²^,³^,⁴^,⁵ , Isaac S. Chan¹^,²^,³^,⁴

¹Department of Internal Medicine, Division of Hematology and Oncology, University of Texas Southwestern Medical Center, ²Harold C. Simmons Comprehensive Cancer Center, University of Texas Southwestern Medical Center, ³Department of Molecular Biology, University of Texas Southwestern Medical Center, ⁴Hamon Center for Regenerative Science and Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center, ⁵Department of Cell Biology, University of Texas Southwestern Medical Center, ⁶Division of Medical Oncology, Norris Comprehensive Cancer Center, Keck School of Medicine, University of Southern California

このプロトコルでは、一次正常および腫瘍乳腺組織から差動遠心分離によって上皮オルガノイドを生成するためのアプローチについて説明します。さらに、包埋オルガノイドの3次元培養および免疫蛍光イメージングのための説明書が含まれています。

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分画遠心分離法

オルガノイド埋込

コラーゲンマトリックス

免疫蛍光染色

腫瘍微小環境

オルガノイド浸潤アッセイ

オルガノイド共培養

オルガノイドイメージング

Chapters in this video

0:04

Introduction

0:55

Collecting, Digesting Tissue, and Differential Centrifugation

4:11

Embedding Organoids in BECM and Collagen

7:22

Results: Immunofluorescent Imaging of Embedded Organoids

8:11

Conclusion

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