ラット脛骨神経腫転位モデルにおける手術と行動検査

この方法は、神経腫の痛みに対するより良い治療法を見つけるのに役立ちます。この手法の利点は、同じ担当者モデルで神経腫の痛みと全般性の痛みの両方を個別に測定できることです。TNTモデルは、神経腫自体がVon Freyモノフィラメントで機械的に刺激できるため、神経腫の痛みの検査に特に適しています。

麻酔をかけたラットを背中に置き、頭を左または右に向けることから始めます。手術する脚を外科医の近くに置きます。内側くるぶしが上を向くるように下肢を外旋します。

ラットを6倍の倍率の実体手術顕微鏡の下に置く前に、ヨウ素ベースのスクラブとアルコールを少なくとも3回交互に使用して剃毛領域を消毒します。膝の位置を確認し、メスを使用してふくらはぎの中央から足首まで後足の内側に2〜3センチの縦方向の切開をそっと行います。必要に応じて、筋肉層が見えるまでマイクロハサミで皮膚と皮下をさらに開きます。

表在性神経血管束を、筋肉層上を自由に移動できる2〜3本の白、紫、または赤の線として識別します。神経血管束を無傷に保ちます。この束から後部を解剖します。

次に、腓腹筋の間の筋膜を開くために解剖します。筋肉の筋膜の間には、脛骨神経とのより深い神経血管束が見出され、これは表在性神経血管束の約3倍の大きさである。脛骨神経が脛骨のすぐ後ろに飛ぶので、脛骨を追加の目印として使用します。

周囲の血管束から解放された脛骨神経を解剖するには、脛骨神経を鈍く動かし、脛骨神経を動かしながらある程度の伸びを示す露出組織を切断します。脛骨神経全体が露出したら、皮下筋から脛骨前皮膚を解剖するまで神経の脱水を避けるために筋肉層を元に戻します。皮下筋層から脛骨前皮膚を解剖して皮下トンネルを作るには、皮膚を持ち上げ、鈍い顕微手術ツールを使用して、鈍い先端を皮膚に平行な組織に押し込みます。

神経腫の検査のためにその領域に簡単にアクセスできるように、トンネルの端が脛骨前または横方向に配置されていることを確認してください。足首近くの遠位端の脛骨神経を切断した後、顕微鏡の倍率を10倍または16倍に変更し、足首の近くに作られた切断の近位にある脛骨神経の上神経を特定します。または、脛骨神経のより近位分岐部の場合、足首の近くに作られた切り傷の近位にある内側および外側の両方の足底枝の上神経を特定する。

慎重に8-0を配置しますナイロンは、ピンセットで上神経を持ち、約0.5ミリメートルの咬合で神経と上神経の間に針を置くことにより、近位神経終末のエピニューリウムを通して縫合します。皮下トンネルの端で針を皮下に噛み、縫合糸を引っ張って神経を皮下トンネルに横方向に転位させます。結び目を作って縫合糸を固定します。

皮膚を貫通せずに固定された神経端にフラッシュされた暗い色で4-0のより厚い縫合糸を置きます。縫合糸が皮膚の外側に見えることを確認してください。足と筋肉を動かした後も神経が所定の位置に留まるかどうかを確認します。

縫合糸の端を4-0で少し長い縫合糸の端で切り取り、次に8-0で切り取ります縫合。顕微鏡の倍率を6倍に戻し、8-0を使用して表皮内縫合糸で皮膚を閉じます縫合。綿棒を使用して0.9%塩化ナトリウムで皮膚をやさしく洗浄します。

部屋が寒い場合は、清潔なケージの一部の下に加熱パッドを置き、快適な位置のペーパータオルの下のケージにラットを置きます。食料と水への容易なアクセスを確保します。過敏症のために滅菌神経を刺激するには、フットパッドに触れずに、髪の境界に近い外側にモノフィラメントを適用します。

低感受性のために脛骨神経を刺激するには、後足の足底面の中央にモノフィラメントを適用します。神経腫部位検査では、鼻を肘のひだに向けてラットを保持します。ラットが右手に保持されている場合、彼の左後足は右親指と人差し指の間に自由にぶら下がっているはずです。

ラットが保持している間、穏やかで快適であることを確認した後、ベースラインで、15グラムのモノフィラメントを露出した後足の脛骨前面にそっと置きます。手術後、15グラムのモノフィラメントを目に見える縫合糸の上に置き、モノフィラメントに十分な力を加えて髪を曲げ、1秒間保持します。神経腫部位のVon Freyは、ベースライン時に、ラットが15グラムのモノフィラメントの適用の10%から15%に反応したことを示した。

脛骨神経腫転位術の1週間後、奏効率は45%から50%に増加した反対側では、手術後の奏効率はベースラインと同様でした。ラットの約20%は痛みを伴う神経腫を発症せず、奏効率はベースラインと比較して増加しなかった。手術後12週間で脛骨神経断端を切除および転置した終了時に、すべてのラットが神経腫を発症した。

脛骨神経の離断は,脛骨神経に神経支配された後足の足底側中央部における機械的感受性を低下させた.術後1週間で存在した感受性低下は,術後3週間から対側およびベースラインと有意に異なり,術後12週まで残存した。無傷の腓腹神経によって神経支配された後足の足底側の外側部分では、ラットは術後1週間から反対側およびベースラインと有意に異なる機械的過敏症を発症した。

術後12週間持続した.対側足では、腓腹神経または脛骨神経のいずれかによって神経支配された領域のベースラインと比較して機械的感受性は影響を受けなかった。側方転位のための可動域のために脛骨神経の長さを外すことを忘れないでください。

また、この神経腫部位を暗い縫合糸でマークすることを忘れないでください。