非アルコール性脂肪性肝疾患の進行を評価するための新しい in vivo マイクロコンピュータ断層撮影イメージング技術

このプロトコルは、肝疾患の診断のための重要な指標を経時的に評価するための非侵襲的でシンプルで簡単な方法を示しているため、重要であると考えています。このイメージング方法論は、肝臓の状態の経時的な分析、相対血液量の評価、門脈の直径、血管網の強度、肝臓病理学のすべての重要なパラメータを可能にする。NAFLDの進行中の肝血管網の適応を理解し、これを脂肪症、炎症、線維症などの特定のマーカーと相関させることは、新しい効率的な治療計画を確立するのに役立ちます。

この技術は、そのようなマーカーの同定に役立ち、疾患の進行に対する新しい治療法の開発に焦点を当てた前臨床試験におけるマウスの価値も向上させます。まず、麻酔をかけた動物をCTスキャナークレードルに入れます。眼科用軟膏を塗布し、鼻錐を固定し、CTスキャナーでスキャンパラメータを設定します。

尾静脈カテーテルを準備し、マウスをベッドに置いて尾を温水で温めます。カテーテルを尾静脈に挿入し、注射を介して最初の造影剤を投与し、1〜3分の持続時間でゆっくりと手動で行う。次に、さまざまな時点で全身と肝臓のスキャンを取得します。

第1の造影剤による最終読み取りの10日後に、第2の造影剤の投与について同じ手順に従う。造影前のスキャンのDICOMファイルをロードした後、コントラストを調整して、肝臓、脾臓、および白い脂肪組織をはっきりと確認します。3D ROIツールで、[ROIの追加]を選択して複数のROIを生成し、肝臓、脾臓、脂肪組織が明らかな血管や脂肪がなく鮮明に見える領域でサンプリングを実行します。

ペイント モードで、[球] を選択します。[2D のみ] ボックスにチェックマークを付け、ドロップダウン メニューから直径 8 ピクセルを選択して、データに ROI をペイントします。侵食拡張機能から、マイナス 1 侵食を選択します。

横断面の [球] ツールを使用して対象地域の 2D ROI をセグメント化することにより、サンプリングを実行します。ナビゲーションに移動し、[テーブルの表示] を選択して、各 ROI の計算された猟犬フィールド単位値を含む定量化テーブルを表示します。次に、値をこの式に代入します。

肝脂肪の割合を計算します。eXIAスキャンDICOMファイルをロードし、コントラストを調整して、肝臓、脾臓、左心室をはっきりと見ることができます。3D ROI ツールで、[ROI の追加] を選択して、肝臓の複数の ROI をセグメント化します。

[ペイント モード] で [2D のみ] を選択し、[球体] を選択して直径 8 ピクセルを追加して、データに ROI をペイントします。侵食拡張機能から、マイナス 1 侵食を選択します。各ROIの名前と色を指定し、テーブルを表示を選択して、各ROIの計算されたHU値を含む定量化テーブルを表示します。

これらのステップを繰り返してPV器官t0を得た後、画面上に示された式に値を挿入し、機能的組織取り込み脂質移動に対応するパーセンテージコントラストを抽出する。ExiTronスキャンDICOMファイルをロードし、肝臓血管網をはっきりと見るようにコントラストを調整します。[ROI の追加] を選択して、肝臓の 3D ROI を生成します。

目的の領域をマークして肝臓のROIを定義します。次に、ROIセレクターからバックグラウンドROIを選択します。クリックしてください カットを実行する アイコン、肝臓のROIを変更せずに背景を削除します。

最大強度投影ビューアをアクティブにします。次に、魔法の杖のアイコンで示されるセグメンテーションアルゴリズムの下で、接続されたしきい値を選択して肝臓のROIを再セグメント化します。最小値と最大値を入力してしきい値を設定し、血管網を取得します。

繰り返しますが、血管網の明確な表現を得るために背景の肝臓組織を取り除きます。ExiTronスキャンDICOMファイルをロードした後、コントラストを調整して、肝臓、脾臓、左心室をはっきりと確認します。[ROI の追加] を選択し、肝臓と大血管の ROI をセグメント化します。

セグメンテーション レイヤーを定義して、各組織の 2D ROI を生成します。造影剤注入前の肝臓の平均輝度を得るために、造影剤前のDICOMファイルに対して手順を繰り返します。門脈の直径については、上腸間膜静脈と脾静脈の接合部の上に3〜4スライスの横面を配置し、ナビゲーションに移動してから距離衛生に移動し、線を選択して2点間の正確な距離を測定します。

平均コントラスト値は、このグループ化されたデータによって表されます。機能的組織取り込みアッセイは、健康な対照と比較して、非アルコール性脂肪性肝疾患のマウスにおけるeXIA造影剤のより高い蓄積および遅いクリアランスを示した。これらの代表的な結果は、非アルコール性脂肪性肝疾患のマウスと健常対照者との間の肝脂肪の割合、肝血管網容積、門脈径、および肝相対血液量の違いを示しています。

造影剤を含まないマイクロCTイメージングは、対照と比較して非アルコール性脂肪性肝疾患を有するマウスにおいてより高い肝脂肪の割合を示した。同様に、健康な対照と比較して、非アルコール性脂肪性肝疾患のマウスでは、より高い肝血管網容積、肝相対血液量、およびより大きな門脈直径が見出された。このテクニックを試す際に覚えておくべき最も重要なことは、選択された解剖学的領域を常に正確にすることです。

間違った解剖学的スポットを選択すると、不正確な結果につながる可能性があります。この方法論とプロトコルに従うことにより、肝疾患の病期分類の正確な評価を行うことができます。したがって、それは新薬の効率を評価するための特定のプラットフォームとして機能することができます。

この技術は、肝臓の病状を評価し、関連する医薬品開発アッセイを開始するための、新しく、より簡単で、より正確な方法への道を開きます。