2023年1月13日
このプロトコルは、マウスで下顎第一大臼歯を抽出する方法の段階的な詳細を示しています。これは、顎骨の治癒と再生に焦点を当てた研究者に代替方法を提供します。
このプロトコルは、利用可能な骨再生研究ではめったに導入されないマウス下顎臼歯抽出モデルを提供します。マウス下顎臼歯抽出モデルの開発は、異なる介入グループ間でより比較可能で一貫性のある下顎骨として必要です。この技術の意味は、いかなる疾患の治療にも及ばない。
しかし、このプロセスの根底にあるメカニズムを見直すのを助けることによって、それは長期的に臨床的治癒と顎の骨の再生を助けるかもしれません。この技術は研究を助けるために開発され、利用可能な治癒と再生のメカニズムを明らかにしました。残念ながら、この方法は他のシステムには適用できません。
ピンセットで臼歯を内側に保持することにより、麻酔をかけたマウスの遠位抵抗の除去を開始します。次に、23ゲージの針を遠位根の頬側歯槽骨に押し込み、間隔をレンダリングします。次に、25ゲージの針に変更して、間隔の拡張を続行します。
針をゆっくりと前方に緩やかに回転させながら、根尖周囲に向かって繊細に進行し、歯槽窩の根元を押し出します。近心抵抗を除去するには、23ゲージの針をルートフォークに挿入し、咬合大臼歯を持ち上げます。大臼歯をしっかりと保持した後、別の23ゲージの針を取り、それを舌側近心歯周膜に押し込み、間隔を作ります。
次に、25ゲージの針を使用して、ゆっくりと前方および頬側に回転させます。いくつかの根本的な障害が大臼歯の脱臼を妨げる場合は、26ゲージの針を使用して根の頂点を貫通し、操作を繰り返します。最終抜歯時に、歯冠が咬合面より上に上がり、2つの無傷の根がはっきりと見えるように歯を抜歯します。
下顎第一大臼歯の抽出に成功したら、乾いた綿を塗って出血を止め、舌の位置を変え、鎮痛を行い、麻酔から回復するまでマウスを恒温加熱パッドに置きます。歯のソケットは、抜歯後すぐに血餅で満たされました。ソケットの治癒過程は1週間観察された。
いくつかのスポンジのような骨梁が形成されましたが、血餅は残りました。治癒過程で、ソケットは2週間後にスポンジ骨で満たされ、再生の完了を示しました。骨芽細胞分化のマスターコントロールであるSp7は、骨形成前である縁部の骨髄細胞に広く発現していた。
恒常性状態では、骨梁は一貫しており、島のように散在する骨髄細胞ブロックと合流していました。術後1週間で、多数のSp7発現細胞が抽出ソケットを満たし、新たに形成された骨梁が散らばった。術後4週間で状態は逆転し、大部分が骨梁に合併するようになりました。
Sp7発現細胞の活性は恒常性状態に近いレベルまで低下した。また、新生児再生プロセスを実証するために行うこともできる。この技術は、新しいマウスモデルを提供することにより、研究者が利用可能な治癒および再生プロセスの根底にあるメカニズムを解明するのに役立ちます。
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本プロトコルでは、マウスの下顎第一大臼歯を抜髄するための詳細な手法を提示し、顎骨の治癒および再生を研究するための新しいマウスモデルを提供します。本研究では、抜髄後の治癒過程と、骨再生に関与する細胞メカニズムを検証します。
マウス下顎大臼歯抜歯窩治癒モデルは、歯槽骨の再生および膜内骨化を調査するための標準化されたin vivoプラットフォームを提供します。このモデルは、骨治癒経路のメカニズム的なリスク低減とターゲット検証を可能にし、骨組織再生における初期段階の探索およびトランスレーショナルリサーチを支援します。その再現性と生物学的妥当性は、歯科および頭蓋顔面領域の前臨床R&Dポートフォリオにおいて、リスク調整された進展判断を容易にします。
このモデルは、初期の探索段階と前臨床検証の境界に位置しており、骨再生ワークフローにおける仮説検証およびメカニズム研究を可能にします。