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10:03 分
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2023年4月21日
2023年4月21日
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ここでは、pLEXSYシステムを用いてeGFPの遺伝子を安定な統合導入遺伝子として発現するL. パナメンシス 株および L.ドノバニ 株を作製するために用いられる方法論について述べる。トランスフェクトされた寄生虫を限界希釈によってクローニングし、両方の種で最も高い蛍光強度を有するクローンを、薬物スクリーニングアッセイでさらに使用するために選択しました。
Chapters in this video
0:04
Introduction
0:27
Amplification and Insertion of the eGFP Gene into the pLEXSY‐2.1 Vector
2:39
Linearization of the pLEXSY Expression Plasmid
3:26
Transfection of L. panamensis and L. donovani by Electroporation
5:00
Polyclonal Selection in Culture
6:41
Confirmation of Genomic Integration
7:09
Cloning by Limiting Dilution
8:12
Results: Confirmation of eGFP Cassette Expression and Chromosomal Insertion
9:40
Conclusion
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