Name: ショウジョウバエの自発運動活性をアッセイする簡単な技術 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: 学ぶショウジョウバエの自発運動アッセイ法。Fijiソフトウェアを用いて成虫と幼虫の運動を追跡し、速度と移動距離を定量化します。低コストで神経科学や遺伝学研究における行動変化のスクリーニングに適した手法です。

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この研究は、東呉大学と中国国家科学財団(NSFC)(82171414)からの特別打ち上げ基金によって支援されました。Chunfeng Liu教授の研究室メンバーの議論とコメントに感謝します。

W1118 成虫のハエと3齢幼虫を本研究に用いた。
1. 実験準備
注: ショウジョウバエ の移動追跡のためのオープンフィールドアリーナは、無色無臭のシリカゲルで作られています。
<ol><li>試薬Aと試薬Bを、シリカキットの製造元の説明書に従って1:10の比率で混合します( 材料表を参照)。色が白に変わるまで攪拌することにより、重炭酸ナトリウムが混合物に添加されていることを確認します。混合物をきれいなペトリ皿に移し、40°Cのオーブンに入れて48時間乾燥させます。</li>
	<li>HDカメラ( 材料表を参照)を三脚にセットし、カメラのレンズがシリカアリーナの表面に垂直になるように調整します。カメラの焦点距離と絞りを調整し、カメラがシリカの表面に焦点を合わせ、ディスプレイが適切に照らされていることを確認します。実験のセットアップを 図1に示します。</li>
	<li>フライをオープンフィールドアリーナに移して、少なくとも61秒の連続ビデオを録画します。 注:幼虫の鈍い性質を考慮すると、10分以上のビデオ録画時間をお勧めします。<ol><li>フィジーでビデオを開き、進行状況バーを最初のフレームにドラッグして、暗黙のうちに承認します。「フリーハンド選択」ツールを使用してフライの全身を選択します(図2B、C)。</li>
		<li>画像をクリックして>明るさとコントラスト>調整し、選択した領域のグレー値が広い背景に近づくまでホワイトバランスを調整します(図2D-F)。 注:最初のフレームの背景の均質化により、ソフトウェアはオブジェクトなしで背景を区別し、ハエが存在する場合にコントラストを作成できるため、ソフトウェアがそれを追跡できるようになります。</li>
	</ol></li>
	<li>実験全体は、25°C、相対湿度60%に設定されたテスト環境で、静かで明るい光にさらされない場所で実行してください。</li>
</ol>2.ビデオ録画と前処理
<ol><li>を使用して短時間麻酔した後95%二酸化炭素(CO2)、オープンフィールドのアリーナにハエを移し、カメラアプリケーションの録画ボタンを押してビデオ録画を開始します。 注意: 移動に対する麻酔薬の影響を最小限に抑えるために、ビデオ録画を開始する前に、ハエが10分間回復するのを待ちます。冷やして冷やす麻酔もおすすめです。<ol><li>ハエが麻酔から回復したら、ハエが入ったアリーナディッシュをカメラの下に置き、プレートを左右にすばやく振って、記録の開始時にハエが動いていることを確認します。</li>
	</ol></li>
	<li>録画が完了したら、 停止 ボタンを押してビデオ録画を終了します。 注意: ビデオ録画時間が目的地の追跡時間をわずかに超えていることを確認してください。また、実験効率を向上させ、複数のハエを自発的に追跡することができる。これは、高品質のビデオトリミングを有効にするためのカメラの解像度に依存します。</li>
	<li>録画したビデオをMJPEGエンコーディングのAVI形式に変換して、フィジーを使用して開いて分析できるようにします。一方、ビデオのフレーム/秒(fps)レートを、成虫のハエの場合は15 fps、幼虫の場合は12 fpsに設定します。</li>
</ol>3.ビデオ分析
<ol><li>フィジーでビデオを開くときに、ポップアップウィンドウの2つのオプションである「仮想スタックを使用する」と「グレースケールに変換」で変換されたビデオを開きます(図2A)。</li>
	<li>上記のように、空白の最初のフレームを作成します。</li>
	<li>AnimalTrackerプラグインの「アクティブな画像の設定」ツールを使用して処理ウィンドウを取得し、「楕円形」ツールを使用して元のビデオウィンドウのアリーナを一周する追跡領域を作成します(図3A)。</li>
	<li>処理ウィンドウの最初の空白フレームのフィルター(図3A,3)と2つのフィルターのパラメーター(図4A-G)を設定します。次に、元のビデオウィンドウの次のフレームを選択し、処理ウィンドウのフィルタリングされたサーフェスを選択します(図5A-C)。 注:フィルタリングステップは、画像ノイズを減らしたり、背景を削除したりするのに役立つため、フレームの二値化で前景を背景から分離するのが簡単になります。</li>
	<li>フィルタリングされた処理ウィンドウを選択したら、「しきい値の設定」ツールを使用して、処理ウィンドウで覆われた赤いプロファイルで追跡されたフライを回転させます(図3A、4、図5D-E、および図6A)。</li>
	<li>「ブロブ検出器の設定」を使用して、処理ウィンドウで覆われた赤いプロファイルでコンピューターにハエを認識させます(図3A、5および図6B)。</li>
	<li>フレーム901を、ビデオの録画時間とfpsによって計算された大人のハエの最後のフレームとして設定します(図3A、6、図6C)。 注:幼虫を使用した次の実験は10分間追跡されているため、フレーム7200が最後のフレームとして設定されています。</li>
	<li>"show blobs" ツールを使用して、元のビデオ ウィンドウにトラッキング四角形を表示します (図 3A、7 および図 6D、E)。次に、追跡を開始し、監視が完了したら追跡ファイルをエクスポートします(図3A、8、9および図7A、B)。</li>
</ol>4.追跡ファイル分析
<ol><li>動物トラッカー>トラッキングアナライザープラグインを使用して、トラックファイルとゾーンファイルをロードします(図8A)。</li>
	<li>ゾーン設定を使用して目的のインデックスを選択し、パラメータ設定を変更します(図8)。フレームレートを使用してフレーム間隔の時間を計算します。 メモ: この状態では、フレームレートは 15 fps で、フレーム間隔は約 0.067 秒で、これはデフォルト設定です(図 8D)。</li>
	<li>トラッキングアナライザーで分析した後、スプレッドシートソフトウェアとGraphPad Prismを使用して定量分析チャートを作成します(図9)。</li>
</ol>5.フレームごとの分析
<ol><li>フレーム間隔ごとに速度分析を実行します。より詳細な調査が必要な場合は、フィジーなしでトラックファイルを分析してください。<ol><li>トラック ファイルを開き、すべての座標を Microsoft Office Excel にコピーし、スペース キーを使用してセルを分割します。 注:たとえば、ファイルが「C」列と「D」列に分割されると、フレーム間隔あたりの ショウジョウバエ の速度は、「E」列に表示される式 SQRT((C5-C4)^2+(D5-D4)^2)によって計算されます(図10A)。列「E」のデータは、フライが2つのフレーム間を移動したピクセル数を示し、最初のフレームは考慮されません。すべての計算結果を選択し、折れ線グラフを挿入して、フレーム間隔ごとの直感的なフライ移動速度を示し、折れ線グラフにピークを示します(図10B)。</li>
	</ol></li>
	<li>フレーム間隔ごとの不動時間を計算します。ファイルを「C」列と「D」列に分割した後、「E」列に表示される式IF(SQRT((C6-C5)^2+(D6-D5)^2)<20, 0, 1)を使用して、フレーム間隔ごとのショウジョウバエの不動状態を計算します。(図10C)。 注: 速度解析とは異なり、最初のフレームの結果が定義されています。20ピクセル未満しか移動しないハエは不動と見なされ、列「E」に「0」として記録されました。<ol><li>すべての計算結果を選択し、縦棒グラフを挿入して、縦棒グラフ全体の余白で不動時間を視覚的に示します (図 10D)。</li>
	</ol></li>
	<li>方向の角度が変わることを確認します。 注: 方向変化角度解析は、ハエの方向選択を表します。ファイルが "C" 列と "D" 列に分割されると、方向変化の角度は式 ACOS(((SQRT((C7-C6)^2+(D7-D6)^2))^2+(SQRT((C6-C5)^2+(D6-D5)^2))^2-(SQRT((C7-C5)^2+(D7-D5)^2))^2)/(2*SQRT((C6-C5)^2+(D6-D5)^2))*( SQRT((C7-C6)^2+(D7-D6)^2)))*180/PI()) によって計算され、"E" 列に表示されます (図 10E)。計算結果は、3つの座標間の角度を示します。<ol><li>すべての計算結果を選択し、ハエの動きの方向変化の角度を示す散布図を挿入します(図10F)。</li>
	</ol></li>
</ol>

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<li>Yarwais, Z. H., Najmalddin, H. O., Omar, Z. J., Mohammed, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+data+collection+of+Drosophila+movement+behaviour+assays+using+computer+vision+in+Python%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Innovative+Approaches+in+Science+Research%22%5BJournal%5D)">Automated data collection of Drosophila movement behaviour assays using computer vision in Python.</a> International Journal of Innovative Approaches in Science Research. 4 (1), 15-22 (2020).</li>
</ol>

著者は、競合する経済的利益はないと宣言しています。

フィジーの画像処理プログラムと互換性のあるオープンソースの AnimalTracker APIに基づいて、研究者が成虫と個々の幼虫の両方のハエを追跡することにより、自発運動活動を体系的に評価できるようにする方法を設計しました。 AnimalTracke はJavaで書かれたツールであり、既存のデータベースや他のツールに簡単に統合して、アプリケーションで設計された動物の追跡行動の分析を容易にすることができます24。成虫と幼虫の運動活動を数値化するソフトウェア計算式によるフレームごとの分析により、移動速度、移動距離、不動、方向変化角度などのいくつかのパラメータを柔軟に分析できます。行動移動のさまざまな側面を表すこれらのパラメータは、時間の経過に伴う自発運動の変化を示すためにプロットできます。さらに、グラフィカルユーザーインターフェイスを作成し、その使用法に関する詳細なドキュメントを提供し、アプリケーションプログラミングインターフェイスを提供することにより、プログラミングの経験がない研究者やカスタム実験パラダイムを作成する経験豊富なユーザーがこの方法にアクセス...

ショウジョウバエメラノガスターは、遺伝子改変1、薬物治療2、老化3によって作成された神経疾患モデルにおける細胞および分子機能を調べるための優れたモデル生物を提供します。ヒトとショウジョウバエの間の生物学的経路、物理的特性、および疾患関連ホモログ遺伝子の高い保存により、ショウジョウバエは分子レベルから行動レベル4までの理想的な模倣になります。多くの疾患モデルにおいて、行動不全は重要な指標であり、さまざまなヒトニューロパシーに有用なモデルを提供します5,6。ショウジョウバエは現在、複数のヒト疾患、神経発達、およびパーキンソン病や筋萎縮性側索硬化症などの神経変性疾患の研究に使用されています7,8。疾患モデルの運動能力を検出することは、病原性の進行を理解するために重要であり、疾患プロセスの根底にある分子メカニズムとの表現型の相関関係を提供する可能性があります。
最近、市販のソフトウェアツールと費用対効果の高いプログラムが、グループ化されたハエ9,10でのハイスループットテストやリアルタイムでの移動の測定11,12など、ショウジョウバエの自発運動検出戦略のために開発されました。そのような従来のアプローチの1つは、クライミングアッセイとも呼ばれる迅速なインタラクティブネガティブジオタキシス(RING)であり、同じ性別と年齢の大規模なハエの個体群を封じ込めることを可能にする複数のチャネルを含み、データ収集中の変動を減らします9,13。自発運動挙動を分析するための別の事前試験方法は、TriKinetics ショウジョウバエ活動モニタ(DAM)であり、これは、薄いガラス管14内のハエ活動運動を検出するために複数のビームを使用する装置である。この装置は、位置を連続的に記録し、これは、より長い期間にわたるハエの活動および概日リズムを研究するためにビーム交差を計算することによって自動移動を表す15。これらの方法は、ショウジョウバエの行動欠陥を分析して行動移動の変化を決定する際に広く使用されてきましたが、常に特別な試験装置または複雑な分析プロセスが必要であり、限られた単純な装置で一部のモデルでは適用が制限されています。FlyGrAM11やショウジョウバエアイランドアッセイ10など、成虫のショウジョウバエをテストするための動物追跡グループベースの戦略は、事前定義された領域で社会的募集と個々の追跡を実装します。それにもかかわらず、反抗された地域での社会的個人的制限は、ハエの衝突または重なりによって引き起こされる画像内の識別に悪影響を与える可能性があります。TRex16、MARGO 12、FlyPi17などのオープンソースのマテリアルベースの方法には緊急事態がありますが、行動テストで柔軟に使用することで、ハエを迅速に追跡できます。これらのテストアプローチは、精巧な実験装置の設置、特別なソフトウェア要件、またはプロのコンピューター言語に関連しています。幼虫の場合、単位時間18あたりのグリッド境界線の数を横切って移動した総距離を測定するか、または個人の体壁収縮を手動で大まかに数えること19は、自発運動能力を評価するための主要な方法です。機器や装置、分析方法の精度が不足しているため、幼虫の行動移動が検出を逃れ、行動運動、特に微細な動きを正確に評価することが困難になる可能性があります15。
本開発手法は,画像処理プログラム「フィジー(ImageJ)」と互換性のあるアプリケーションプログラミングインターフェース(API) AnimalTracker を利用し,高精細(HD)映像からハエの追跡行動を解析し,成虫と仔魚の運動活動を系統的に評価する手法である.フィジーはオープンソースソフトウェアです ImageJディストリビューション 堅牢なソフトウェアライブラリと多数のスクリプト言語を組み合わせることができるため、画像処理アルゴリズムのラピッドプロトタイピングが可能になり、画像分析機能で生物学者の間で人気があります20。現在のアプローチでは、フィジーの AnimalTracker APIへの統合を利用して、パーソナライズされたアルゴリズム挿入を備えた独自の ショウジョウバエ 行動アッセイを開発し、自発運動行動の堅牢な分析機能をサポートするための詳細なドキュメントとチュートリアルの有用なステップを提供します(図1)。ハエの衝突または重なりによって引き起こされる画像内の客観的識別の複雑さを回避するために、各アリーナは1つのハエのみをホストするように制限されています。アプローチの追跡精度を評価した上で、パーキンソン病の動物モデルに一般的に使用されている毒性薬物ロテノンを投与された ショウジョウバエ の運動運動を追跡および定量化するために実施され、最終的に薬物治療における移動障害を発見した21。オープンソースでフリーなソフトウェアを採用したこの方法論は、高コストの計測を必要とせず、 ショウジョウバエ の行動運動を正確かつ再現性よく解析することができます。

<table><tbody><tr><td>アニマルトラッカー</td>ハンガリー<td>脳研究プログラムバージョン</td><td>:1.7</td><td>pfficialウェブサイト:http://animaltracker.elte.hu/main/downloads</td></tr><tr><td>カメラソフトウェア</td><td>Microsoft</td><td>バージョン:2021.105.10.0</td>組み込み<td>Windows10システム</td></tr><tr><td>コンピューターDELL</td><td>Vostro-14-5480win10</td><td>システムを実行しているコンプレッサーが利用可能です</td><td></td></tr><tr><td>ショウジョウバエ二酸化炭素麻酔ワークステーション</td><td>Wu han Yihong technology</td> <td>#YHDFPCO2-018</td>公式サイト<td>:http://www.yhkjwh.com/</td></tr> <tr><td>フィジーソフトウェア</td><td>フィジーチーム</td><td>バージョン:1.53v</td><td>公式サイト:https://fiji.sc/</td></tr> <tr><td>フォーマット工場ソフトウェア</td><td>Pcfreetime</td><td>バージョン:X64 5.4.5</td><td>公式サイト:http://www.pcfreetime.com/formatfactory/CN/index.html</td></tr><tr><td>グラフパッドプリズム</td><td>GraphPadソフトウェア</td><td>バージョン:8.0.2</td><td>公式サイト:https://www.graphpad-prism.cn</td></tr><tr><td>高精細カメラ</td><td>TTQ</td><td>Jingwang2(HD1080P F1.6 6-60mm)</td><td>公式サイト:http://www.ttq100.com/product_show.php?id=35</td></tr><tr><td>Officeソフトウェア</td><td>Microsoft</td><td>バージョン:office 2019</td><td>公式サイト:https://www.microsoftstore.com.cn/software/office</td></tr><tr><td>シャーレ</td><td>Bkman</td><td>110301003</td><td>サイズ:60mm</td></tr><tr><td>シリカゲル</td><td>ダウ</td><td>シルガード184シリコーンエラストマーキット</td><td>指示に従ってよく混ぜ</td></tr>る <tr><td>重炭酸ナトリウム</td><td>マックリン</td><td>#144-55-8</td><td>シリカゲルとよく混ぜる</td></tr></tbody></table>

ショウジョウバエの自発運動活性をアッセイする簡単な技術

A Simple Technique to Assay Locomotor Activity in Drosophila

ショウジョウバエは 、高度な遺伝子操作技術が豊富で、多様な行動特徴があるため、さまざまな疾患を研究するための理想的なモデル生物です。動物モデルにおける行動不全の特定は、例えば、患者が運動機能の障害を経験することが多い神経変性疾患において、疾患の重症度の重要な尺度である。しかし、薬物治療やトランスジェニック個体など、ハエモデルの運動障害を追跡および評価するためのさまざまなシステムが利用できるため、複数の角度から正確に評価するための経済的でユーザーフレンドリーなシステムはまだ不足しています。ここでは、フィジーの画像処理プログラムと互換性のある AnimalTracker アプリケーションプログラミングインターフェース(API)に基づく手法を開発し、記録されたビデオから成虫と幼虫の両方の個体の移動活動を体系的に評価し、追跡行動の分析を可能にします。この方法は、行動を記録および分析するために高解像度カメラとコンピューター周辺機器の統合のみを必要とするため、トランスジェニックまたは環境行動障害のあるハエモデルをスクリーニングするための手頃な価格で効果的なアプローチになります。薬理学的に処理されたハエを用いた行動試験の例を挙げて、成虫のハエと幼虫の両方の行動変化を再現性の高い方法で検出する方法を示します。

本研究では、ロテノンで処理された成虫のハエと3齢幼虫の自発運動障害を調べ、薬物溶媒ジメチルスルホキシド(DMSO)を与えられた対照ハエの運動活動と比較しました。ショウジョウバエにおけるロテノンによる治療は、脳22においてドーパミン作動性ニューロン喪失を引き起こし、重大な自発運動障害23を引き起こすことが示されている。図11および図12に示すように、ロテノンで処理された成虫のハエおよび3齢幼虫は、DMSOを与えられた対照のハエと比較して有意な自発運動障害を有する。図11および図12B-Eは、ロテノンの有無にかかわらず処理されたハエ間の移動パラメータの距離、速度、および不動時間の相対的な変化を示しています。図<strong c...

本プロトコルは、オープンソースソフトウェアフィジーを使用して手作りのアリーナでのハエの動きを追跡および分析することにより、ショ ウジョウバエ の自発運動を評価し、高解像度ビデオ録画に基づいて各フレームのピクセルをセグメント化し、速度、距離などのパラメータを計算するプラグインと互換性があります。

Drosophila melanogaster is an ideal model organism for studying various diseases due to its abundance of advanced genetic manipulation techniques and ...

この方法は、オープンソースソフトウェアに基づいており、記録されたビデオから成虫と幼虫のハエの追跡行動について局所的な運動活動を体系的に評価します。この方法は、行動を記録および分析するための低コストのデバイス統合を必要とするため、ハエの移動をスクリーニングするための手頃な価格で効果的なアプローチになります。この技術は、局所運動障害のあるヒト疾患のハエモデルにおける行動変容の同定に用いられているが、疾患、障害、困難の治療には適していない。分析プロセス中に関連するビデオウィンドウ、つまり元のビデオウィンドウと処理中のビデオウィンドウをクリアすることが不可欠です。まず、製造元の指示に従って、シリカキットの試薬Aと試薬Bを1対10の比率で混合し、ショウジョウバエの移動追跡用のオープンフィールドアリーナを準備します。次に、HDカメラを三脚にセットし、カメラのレンズがシリカアリーナの表面に垂直になるように調整します。次に、フィジーでビデオを開きます。進行状況バーを最初のフレームにドラッグし、暗黙のうちに承認します。フリーハンド選択ツールを使用してフライの全身を選択します。画像、調整、明るさとコントラストをクリックして、選択した領域のグレー値が広い背景に近づくまでホワイトバランスを調整します。麻酔をかけたフライをオープンフィールドアリーナに移します。ハエが麻酔から回復したら、ハエと一緒にアリーナディッシュをカメラの下に置き、左右にすばやく振って、記録の開始時にハエが動いていることを確認します。カメラアプリケーションの録画ボタンを押して、ビデオ録画を開始します。録画が完了したら、停止ボタンを押してビデオ録画を終了します。録画したビデオをMJ異教徒コーディングでAVI形式に変換して、フィジーを使用して開いて分析できるようにします。また、ビデオのフレーム/秒を、成虫のハエの場合は15 fps、幼虫の場合は12 fpsに設定します。フィジーでビデオを開くには、ポップアップウィンドウで2つのオプションを選択し、仮想スタックを使用してグレースケールに変換します。動物トラッカープラグインのアクティブな画像の設定ツールを使用して処理ウィンドウを取得し、楕円形ツールを使用して元のビデオウィンドウのアリーナを一周する追跡領域を作成します。処理ウィンドウの最初の空白フレームのフィルターと 2 つのフィルターのパラメーターを設定します。次に、元のビデオウィンドウの次のフレームを選択し、処理ウィンドウのフィルタリングされたサーフェスを選択します。フィルタリングされた処理ウィンドウを選択したら、[しきい値の設定]ツールを使用して、処理ウィンドウで覆われた赤いプロファイルでトラクトフライを回転させます。次に、set blob 検出器を使用して、処理ウィンドウで覆われた赤いプロファイルでハエをコンピューターに認識させます。テキスト原稿に記載されているように、成虫のハエまたは幼虫の最後のフレームを設定します。BLOB の表示ツールを使用して、元のビデオ ウィンドウに追跡用の四角形を表示します。追跡を開始し、監視が完了したら追跡ファイルをエクスポートします。動物トラッカーと追跡アナライザープラグインを使用して、追跡ファイルとゾーンファイルをロードします。ゾーン設定を使用して目的のインデックスを選択し、パラメーター設定を変更します。フレームレートを使用してフレーム間隔の時間を計算します。トラッキングアナライザーで分析した後、スプレッドシートソフトウェアとグラフパッドプリズムを使用して定量分析チャートを作成します。トラックファイルを開きます。すべての座標を Microsoft Office Excel にコピーし、スペース キーを使用してセルを分割します。フレーム間隔あたりの不動時間を計算するには、すべての計算結果を選択し、縦棒グラフを挿入して、縦棒グラフ全体の余白で不動時間を視覚的に表示します。方向角度の変化を示すには、すべての計算結果を選択し、散布図を挿入します。ロテノンで処理された成虫のハエと3齢幼虫は、溶媒DMSOを与えられた対照のハエと比較して有意な自発運動障害を持っていました。成虫のロテノン処理の定量分析では、移動距離と平均速度の有意な減少が示されました。そして、不動時間の大幅な増加。代表的なグラフは、対照のものと比較して、ロテノンを給餌したハエのフレーム間隔あたりの移動速度のピークが少ないことを示し、自発運動活動障害の重症度を示しています。フレームあたりの移動ピクセルの制度的不動列も、対照ハエと比較して、ロテノン給餌ハエの1分以内の動きが有意に少ないことを示しました。ロテノン給餌動物および対照動物における移動方向角変化を示す代表的なグラフも、ハエが選択した方向の変化を明らかにした。同様の結果は、3齢幼虫についても観察されました。その結果、ロテノンを給餌した追跡幼虫の行動運動は、対照と比較して著しく損なわれていることが明らかになりました。分析プロセスの最も重要なステップは、ソフトウェアが効果的にチェックできるかどうかを証明するため、最初の空白フレームを形成することです。この技術により、研究者は神経や筋肉の損傷などの複数の欠陥の根底にあるメカニズムをより深く掘り下げることができます。

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Research

JoVE Journal

Behavior

行動

アダルトキイロショウジョウバエのロコモーションの高解像度のビデオトラッキング

私たちは、毎日の運動活性のリズムを記録するための手順を説明します...

に概日リズムと睡眠のパラメータを研究するために運動活性を測定するショウジョウバエ</em

キイロショウジョウバエでは、世紀の1以上にわたり、多くの重要な生物学的過程の分子および細胞基盤を理解するために使用されている遺伝的に行動的に扱いやすいモデル系である。...

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このビデオでは、ハエの移動を定量化する簡単な方法と、実施されたクライミングアッセイを示しています。フライクライミングアッセイは、ジオタクシスの負の反応に依存する運動機能の一般的なテストです。...

フライクライミングアッセイ:Drosophila melanogasterの一般的な移動をテストする方法

このビデオでは、自由に歩くハエを追跡して一般的な移動能力を評価する方法を説明しています。注目のプロトコルは、ビデオ追跡ソフトウェアを使用したアッセイのセットアップとデータ解析を示しています。...

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ショウジョウバエ活動量モニター(DAM):ハエの自発運動を測定する方法

ここでは、ハイスループットスクリーニングを可能にする、 ショウジョウバエの飛行性能を迅速かつ正確に測定するための方法を記載している。...

飛行性能の正確かつ迅速な測定のための改善された方法での<em&gt;ショウジョウバエ</em

キイロショウジョウバエでは、自発運動などの行動に影響を与える遺伝的または環境的操作を研究するのに有用である。ここでは、赤外線ビームと自発運動を定量化するためのデータ解析ソフトウェアのモニターを利用したプロトコルを記述します。...

における自発運動量の測定<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

ウェブカメラとフリーで安価なソフトウェアプログラムの組み合わせを使用して、 キイロショウジョウバエ（Drosophila melanogaster）における機関車のパターンは速度、距離、および様々な運動活動の時間差を検出するために分析することができる。...

における発作様活性を分析し、移動のための低コストの方法<em&gt;ショウジョウバエ</em

このレポートは、TriKinetics Drosophila Activity...

幼虫活性の測定<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;アクティビティモニタ

このプロトコルは、従来の哺乳類モデルに代わるものとして、自発運動機能障害の定量化を通じてショウジョウバエの神経毒性を評価するためのハイスループットで費用対効果の高い方法を提供します。これは、高感度で再現性があり、倫理的に有利なモデルを使用して、医薬品化合物、環境剤、または遺伝子組み換えの神経毒性効果を評価することを目的としています。...

神経毒性のリードアウトとしての Drosophila melanogaster の自発運動機能障害の行動解析

学ぶショウジョウバエの自発運動アッセイ法。Fijiソフトウェアを用いて成虫と幼虫の運動を追跡し、速度と移動距離を定量化します。低コストで神経科学や遺伝学研究における行動変化のスクリーニングに適した手法です。

ショウジョウバエの自発運動活性をアッセイする簡単な技術

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