Epimediiフォリウムマトン油加工技術の最適化とゼブラフィッシュ胚発生への影響の検証

本研究では、広く用いられている処理方法を採用し、安定した信頼性の高い持続技術を獲得した。結果は、処理されたEpimediiの毒性が減少したことを示した。応答曲面法は、実験が少なくて済み、サイクルが短いため、従来の数学的統計に存在する問題を回避できるだけでなく、ユーザーが最適な条件を選択するのにも役立ちます。

この方法は、化学工業、生物工学、食品産業、漢方薬の調製、漢方薬の抽出などでも広く使用できます。溶液を調製し、クロマトグラフィーを実行した後、影響要因として、羊肉油の量、羊肉油の温度、揚げ物温度など、EF処理の主要なパラメーターを選択します。評価指標として、イカリイン、EA、EB、EC、およびBIコンテンツの包括的なスコアを使用します。

応答曲面解析ソフトウェアを使用して、Box-Behnken応答曲面実験を設計し、2次応答曲面を探索し、2次多項式モデルを構築します。新しいBox-Behnken計画を選択し、数値因子オプションを3に設定します。因子A、B、Cを設定し、続行をクリックしてから応答オプションを1に設定し、続行をクリックして計画を完了します。

特定のパラメータに従ってEFを処理し、たとえば、注文番号1の場合、精製されたマトンオイルを体積で15%とし、摂氏50度に加熱して溶かします。溶かしたマトンに粗EFを加えます。穏やかに光沢があるまで穏やかな火で炒め、EFを取り出して冷まします。加工品の試験液を調製し、原稿に記載のHPLCで分析します。

各化学組成の保持時間とピーク面積を記録し、外部標準曲線に対して各試験溶液中のイカリイン、EA、EB、EC、およびBIの含有量を計算します。総合得点計算式を用いて17の実験群の総合得点を算出する。17グループの実験の包括的なスコアリング結果をデータ分析ソフトウェアにインポートして、実験データを分析します。

評価項目で、2次プロセス次数オプションと多項式モデルタイプオプションを選択します。マトン油量と揚げ温度の応答面は他の因子に比べて急峻であり,等高線は楕円形になる傾向があり,これら2因子の交互作用が他の因子間の交互作用よりも有意であることが示された。混合標準物質、粗エピメディフォリウムおよびエピメディフォリウム加工品のHPLCクロマトグラムは、生EF中のBI含有量が低いが、処理後に増加することを示している。

粗群は、1ミリリットル当たり150マイクログラムの薬物濃度で明らかな脊椎変形、体の湾曲、心膜浮腫、および肝変形を示すが、これらの変化は処理群の幼魚ではまれであった。生薬群のゼブラフィッシュはすべて、200マイクログラム/ミリリットルの薬物投与後24時間で死亡したが、処理群の死亡率はわずか6.67%であったEF1ミリリットルあたり200マイクログラムの投与は、72時間後に生薬群のすべてのゼブラフィッシュの死を引き起こしたが、処理群では、EFのミリリットルあたり500マイクログラムは、すべてのゼブラフィッシュの死を引き起こした。受精後72時間における2つの実験群の致死濃度の中央値は、LC 50が粗群で151.3マイクログラム/ミリリットル、処理群で219.8マイクログラム/ミリリットルであることを示した。

実験で最も重要なことは、応答曲面法の因子を選択し、これらの因子のパラメータを決定することです。