Name: マウス新生児脳のマイクロCTイメージングと形態解析 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 36 s
Description: 学ぶマウス新生児脳のマイクロCTイメージングと形態解析。Lugol溶液を用いたコントラスト法で高解像度3D画像を取得し、脳の発達神経科学における定量的形態計測を可能にする。

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Wei Liu氏の技術支援に感謝します。この研究は、ANPCyT PICT 2017-2497 および PICT 2018-4113 から資金提供を受けています。

マウス新生児脳マイクロCTスキャンと画像処理

<ol><li>Altman, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+skeletal+growth%2C+modeling%2C+and+remodeling+by+in+vivo+micro-computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Quantification of skeletal growth, modeling, and remodeling by in vivo micro-computed tomography.</a> Bone. 81, 370-379 (2015).</li>
<li>Wehrle, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatio-temporal+characterization+of+fracture+healing+patterns+and+assessment+of+biomaterials+by+time-lapsed+in+vivo+micro-computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Spatio-temporal characterization of fracture healing patterns and assessment of biomaterials by time-lapsed in vivo micro-computed tomography.</a> Scientific Reports. 11 (1), 8660(2021).</li>
<li>Arístide, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+shape+convergence+in+the+adaptive+radiation+of+New+World+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Brain shape convergence in the adaptive radiation of New World monkeys.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 113 (8), 2158-2163 (2016).</li>
<li>Paluh, D. J., Stanley, E. L., Blackburn, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+hyperossification+expands+skull+diversity+in+frogs%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Evolution of hyperossification expands skull diversity in frogs.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 117 (15), 8554-8562 (2020).</li>
<li>de Crespigny, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+micro-CT+imaging+of+the+postmortem+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">3D micro-CT imaging of the postmortem brain.</a> Journal of Neuroscience Methods. 171 (2), 207-213 (2008).</li>
<li>Gignac, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusible+iodine-based+contrast-enhanced+computed+tomography+%28diceCT%29%3A+an+emerging+tool+for+rapid%2C+high-resolution%2C+3-D+imaging+of+metazoan+soft+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography (diceCT): an emerging tool for rapid, high-resolution, 3-D imaging of metazoan soft tissues.</a> Journal of Anatomy. 228 (6), 889-909 (2016).</li>
<li>Wong, M. D., Dorr, A. E., Walls, J. R., Lerch, J. P., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+3D+mouse+embryo+atlas+based+on+micro-CT%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">A novel 3D mouse embryo atlas based on micro-CT.</a> Development. 139 (17), 3248-3256 (2012).</li>
<li>Gonzalez, P. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+protein+restriction+in+mice+impacts+placental+function+and+maternal+body+weight+before+fetal+growth%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Chronic protein restriction in mice impacts placental function and maternal body weight before fetal growth.</a> PLoS One. 11 (3), 0152227(2016).</li>
<li>Watanabe, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+endocasts+good+proxies+for+brain+size+and+shape+in+archosaurs+throughout+ontogeny%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Are endocasts good proxies for brain size and shape in archosaurs throughout ontogeny.</a> Journal of Anatomy. 234 (3), 291-305 (2019).</li>
<li>Gignac, P. M., Kley, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+utility+of+diceCT+imaging+for+high-throughput+comparative+neuroanatomical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">The utility of diceCT imaging for high-throughput comparative neuroanatomical studies.</a> Brain, Behavior and Evolution. 91 (3), 180-190 (2018).</li>
<li>Anderson, R., Maga, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+procedure+for+rapid+imaging+of+adult+mouse+brains+with+microCT+using+iodine-based+contrast%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A novel procedure for rapid imaging of adult mouse brains with microCT using iodine-based contrast.</a> PLoS One. 10 (11), e0142974(2015).</li>
<li>Gignac, P. M., O'Brien, H. D., Sanchez, J., Vazquez-Sanroman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiscale+imaging+of+the+rat+brain+using+an+integrated+diceCT+and+histology+workflow%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Structure+%26+Function%22%5BJournal%5D)">Multiscale imaging of the rat brain using an integrated diceCT and histology workflow.</a> Brain Structure & Function. 226 (7), 2153-2168 (2021).</li>
<li>Wong, M. D., Spring, S., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+stabilization+of+tissue+for+embryo+phenotyping+using+micro-CT+with+iodine+staining%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Structural stabilization of tissue for embryo phenotyping using micro-CT with iodine staining.</a> PLoS One. 8 (12), e84321(2013).</li>
<li>Barbeito-Andrés, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Congenital+Zika+syndrome+is+associated+with+maternal+protein+malnutrition%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Congenital Zika syndrome is associated with maternal protein malnutrition.</a> Science Advances. 6 (2), (2020).</li>
<li>Handschuh, S., Glösmann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+embryo+phenotyping+using+X-ray+microCT%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Mouse embryo phenotyping using X-ray microCT.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 10, 949184(2022).</li>
<li>Turnbull, D. H., Mori, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+in+mouse+developmental+biology%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+in+Biomedicine%22%5BJournal%5D)">MRI in mouse developmental biology.</a> NMR in Biomedicine. 20 (3), 265-274 (2007).</li>
<li>Qiu, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+MRI+shows+brain+areas+relatively+larger+in+males+emerge+before+those+larger+in+females%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Mouse MRI shows brain areas relatively larger in males emerge before those larger in females.</a> Nature Communications. 9, 2615(2018).</li>
<li>Lerch, J. P., Sled, J. G., Henkelman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+phenotyping+of+genetically+altered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">MRI phenotyping of genetically altered mice.</a> Methods in Molecular Biology. 711, 349-361 (2011).</li>
<li>Gonzalez, P. N., Kristensen, E., Morck, D. W., Boyd, S., Hallgrímsson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+growth+hormone+on+the+ontogenetic+allometry+of+craniofacial+bones%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution+%26+Development%22%5BJournal%5D)">Effects of growth hormone on the ontogenetic allometry of craniofacial bones.</a> Evolution & Development. 15 (2), 133-145 (2016).</li>
<li>Metscher, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroCT+for+developmental+biology%3A+a+versatile+tool+for+high-contrast+3D+imaging+at+histological+resolutions%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Dynamics%22%5BJournal%5D)">MicroCT for developmental biology: a versatile tool for high-contrast 3D imaging at histological resolutions.</a> Developmental Dynamics. 238 (3), 632-640 (2009).</li>
<li>Vickerton, P., Jarvis, J., Jeffery, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concentration-dependent+specimen+shrinkage+in+iodine-enhanced+microCT%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">Concentration-dependent specimen shrinkage in iodine-enhanced microCT.</a> Journal of Anatomy. 223 (2), 185-193 (2013).</li>
<li>Dawood, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reducing+soft-tissue+shrinkage+artefacts+caused+by+staining+with+Lugol%27s+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Reducing soft-tissue shrinkage artefacts caused by staining with Lugol's solution.</a> Scientific Reports. 11, 19781(2021).</li>
</ol>

著者らは、競合する利害関係はないと宣言しています。

この研究では、造影剤を用いたマイクロCTを用いてマウスの新生児脳組織をスキャンするための簡潔なプロトコルが紹介されています。さらに、定量的および定性的な出力を得るための簡単な手順が含まれています。これらの方法に基づいて、さらに代替的または補完的な分析を実行できます。
プロトコルに示されているように、マイクロCT画像はさまざまな方法で分析できます。これまでの研究で、私たちのグループは、点の座標をデジタル化し、幾何学的形態測定技術を適用することにより、マウスの周産期脳のサイズと形状の変化を推定しました8,14。座標のデジタイズは、単純なユークリッド距離推定を使用して線形計測値を取得する場合にも役立ちます。これは、脳とROIのセグメンテーションから得られるボリュームとともに、従来の形態測定評価のための貴重なインプットです。
ここで紹介するプロトコールは、私たちが使用したような ex vivo の小さ...

マイクロコンピュータ断層撮影(マイクロCT)イメージングは、さまざまな研究分野にとって貴重なツールです。生物学では、石灰化した組織でX線を吸収するため、骨研究に特に適しています。この特徴により、骨の発達1、代謝2、進化3,4など、さまざまな疑問にマイクロCTの助けを借りてアプローチしてきました。2008年、de Crespignyらは、ヨウ素を造影剤として用いることで、成体のマウスとウサギの脳のマイクロCT画像が得られることを示しました。この研究は、ヨウ素がX線の影響を受けない軟部組織からの画像の取得を可能にしたため、このイメージング技術の新しいアプリケーションを開きました。したがって、マイクロCTとヨウ素系造影剤を組み合わせる一般的な目的は、軟部組織をメゾまたはマクロの解剖学的レベルで識別および識別できる高解像度画像を取得することです。
この手法は、実験デザインで広く使用されているマウス胚などの小さな標本の詳細なex vivo表現型特性評価を必要とする研究に顕著な可能性を秘めています6。ヨウ素造影剤とマイクロCTイメージングの組み合わせは、臓器7および画期的な3次元(3D)構造8,9の体積定量化を得るために使用されています。近年、げっ歯類の脳表現型の特徴を記述するために、染色されたサンプルのマイクロCTスキャンが適用されており10、技術に対するさまざまな改良が提案されている。成人の脳では、ヨウ素に48時間浸漬し、ヒドロゲルによる灌流の前工程を行うプロトコルにより、高品質の画像が生成されることがわかった11。Gignacら12は、ヨウ素で染色されたラットの脳を処理すれば、日常的な組織学的手法を実行できることを示し、この技術の限界を拡大しました。同様に、これらの手順は、胎児および離乳前のげっ歯類の脳に対して有望な結果を示しています8,13,14,15。
神経科学は、脳の発達のさまざまな構造的および機能的側面を評価するために主に顕微鏡ベースの技術を適用してきましたが、そのような研究は、特定の細胞集団または空間的に制限された構造を特徴付けるのに適しています。逆に、マイクロCTイメージングは、顕微鏡技術を補完する、関連する空間情報を保持する構造全体の記述と3Dモデルの取得を可能にします。磁気共鳴画像法(MRI)は、小動物の構造的特徴を調査するために適用される標準的な技術でもあります16,17,18。しかし、造影剤を使用したマイクロCTには、ex vivo固定サンプルに対する2つの主な利点があります:マイクロCTスキャナーは、MRI12よりも安価で操作が簡単で、高い空間分解能を可能にします。
この研究は、ヨウ素ベースの造影剤であるルゴール溶液で染色した後、マイクロCTスキャンを使用して新生仔マウスの脳から高解像度画像を取得する手順を説明することを目的としています。サンプルの採取や組織の固定などの前段階から始まり、染色、マイクロCT画像取得、標準処理を経る包括的なプロトコルが提示されます。画像処理には、頭部全体と脳の3Dボリュームのセグメンテーションと、形態測定分析で使用できる点座標をデジタル化するための特定の解剖学的平面の選択が含まれます。ここでは新生仔マウスの脳に焦点を当てていますが、同様の戦略を他の軟部組織にも適用できます。したがって、ここで紹介するプロトコルは、微妙な変更を加えて、他のタイプのサンプルに適用できる柔軟性があります。

<table><tbody><tr><td>&nbsp;&マイクロ;CT 35</td><td>Scanco Medical AG</td><td></td><td>Scancoは&nbsp; &CT35はもう。彼らの最小のスキャナーは現在&nbsp;&マイクロ;CT45&nbsp;</td></tr><tr><td>Avizo</td><td>Visualization Sciences Group, VSG</td><td></td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6 Mice</td><td>Bioterio Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad Nacional de La Plata</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Conical tubes</td><td>Daigger</td><td>CH-CI4610-1856</td><td></td></tr><tr><td>フラックスキャビネット</td><td>Esco</td><td>AC2-458&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>ガラスビーカー&nbsp;</td><td>Glassco</td><td>GL-229.202.10</td><td></td></tr>ガラス<tr><td>びん</td><td>Simax</td><td>CFB017</td><td></td></tr><tr><td>ガラス漏斗</td><td>HDA</td><td>VI1108</td><td></td></tr><tr><td>HCl</td><td>Carlo Erba</td><td>403872</td><td>フラックスキャビネットの下で操作し、個人用保護具(マスク、ガラス、手袋)を使用しますI</td></tr><tr><td>2</td><td>Cicarelli</td><td>804211</td><td>I2KIを準備するときは、フラックスキャビネットの下で操作し、個人用保護具(マスク、ガラス、手袋)を使用しますKI</td></tr><tr><td></td><td>シカレリ</td><td>PA131542.1210</td><td>I2KIを準備するときは、フラックスキャビネットの下で操作し、個人用保護具(マスク、ガラス、手袋)を使用してください磁気</td></tr><tr><td>攪拌アル</td><td>カノ</td><td>4925</td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>チカレリ</td><td>1580110</td><td>フラックスキャビネットの下で操作し、個人用保護具(マスク、ガラス、手袋)を使用しますオー</td></tr><tr><td>ビタルシェー</td><td>カーBiomint</td><td>BM021</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド&nbsp;</td><td>バイオパック</td><td>2000959400</td><td>フラックスキャビネットの下で操作し、個人用保護具(マスク、ガラス、手袋)を使用しますパ</td></tr><tr><td>トンスパチュラ</td><td>Glassco</td><td>GL-377.303.01</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>バイオパック</td><td>2000988800</td><td></td></tr><tr><td>プラスチックパスツールピペット</td><td>Daigger</td><td>9153</td><td></td></tr><tr><td></td><td>RRプロジェクト</td><td></td><td>Rのパッケージジオモーフは、プロトコル(https://cran.r-project.org/web/packages/geomorph/index.html)</td></tr><tr><td>はさみ&nbsp;</td>で使用されました。<td>Belmed</td><td></td><td></td></tr>ア<tr><td>ジ化ナトリウム</td><td>バイオパック</td><td>2000163500</td><td></td></tr><tr><td>温度計</td><td>Daigger</td><td>7650</td><td></td></tr></tbody></table>

マウス新生児脳のマイクロctイメージングと形態解析

Micro-CT Imaging and Morphometric Analysis of Mouse Neonatal Brains

ニューロイメージは、動物モデルを用いた実験で脳の形態を研究するための貴重なツールです。磁気共鳴画像法(MRI)は軟部組織の標準的な方法となっていますが、空間分解能が低いため、小動物には限界があります。ここでは、マイクロコンピュータ断層撮影(マイクロCT)を使用して、マウス新生児の脳と頭蓋骨の高解像度3次元(3D)情報を取得するためのプロトコルについて説明します。プロトコルには、サンプルの解剖、脳の染色とスキャン、および臓器全体と関心領域(ROI)の形態測定値を取得するために必要な手順が含まれています。画像解析には、構造物のセグメンテーションとポイント座標のデジタイズが含まれます。要するに、この研究は、マイクロCTと造影剤としてのルゴール溶液の組み合わせが、小動物の周産期脳をイメージングするための適切な代替手段であることを示しています。このイメージングワークフローは、発生生物学、生物医学、および脳の発達に対する多様な遺伝的および環境的要因の影響の評価に関心のあるその他の科学に応用されています。

ここでは、新生仔マウスの脳の高解像度画像を取得するための基本的なプロトコルが提示されます。頭部はルゴール溶液に浸漬した後にスキャンした。サイズが小さいにもかかわらず、嗅球、皮質、中脳、小脳、後脳などの主要な脳の解剖学的構造を区別することができます(図1)。
これらの画像を入力として使用して、さまざまな分析を実行できます。2つの異なる解剖学的平面のランドマークとセミランドマークのセットがデジタル化されました。 図2に見られるように、点は脳の境界に沿って選択された平面に配置されています。デジタイズが終了すると、ポイントの座標を.txtファイルで読み取ることができます(図3)。ポイントのデジタイズの目的は、幾何学的形態解析でさらに使用できる生の座標を取得することでした。提示されたプロトコルは単一の標本に焦点を当てており、形態測定分析はより大きなサンプルに適していますが、同じポイントのセットを使用して得られた結果...

この研究では、マイクロコンピュータ断層撮影(micro-CT)と造影剤をex vivo サンプルで組み合わせて、新生仔マウスの脳の高解像度画像を取得する手順について説明します。これらの画像で脳の大きさと形状を定量化するための基本的な形態測定分析について説明します。

マウス新生児脳のマイクロCTイメージングと形態解析

Neuroimages are a valuable tool for studying brain morphology in experiments using animal models. Magnetic resonance imaging (MRI) has become the standard ...

実験神経科学では、特に発生に関する問題に取り組む研究では、胎児および出生前の標本の脳の定量的特性評価に頼ることが適切です。一般的な造影剤と組み合わせたマイクロコンピュータ断層撮影は、さらなる形態分析に適した高溶液画像を生成することができます。マイクロコンピュータ断層撮影は、石灰化した組織にX線を吸収するため、骨などの硬組織のイメージングに適用されています。しかし、過去数十年の間に、造影剤としてのルゴールの溶液の使用は、軟部組織に機械技術を使用する用途をアップグレードしました。このプロトコルは、小動物の出生前の脳を研究するためのマイクロコンピュータ断層撮影の大きな可能性を実証するために、フィールドを使用して手順とツールを組み合わせたものです。試料作製から形態測定データ処理までの工程を的確に描写した提案の強み。マイクロコンピュータ断層撮影法から得られた画像は、標準的な組織学的手法では困難な特別な情報を保持します。さらに、造影剤を使用したマイクロコンピュータ断層撮影には、磁気共鳴と比較して2つの利点があります。スキャナーは安価で操作が簡単で、より高い空間分解能を可能にします。ここで紹介するプロトコルは、多様な種に由来するさまざまな臓器のサンプルを固定するために、微妙な変更を加えて適用できます。そうすれば、さまざまな科学的な疑問にアプローチすることができます。造影剤はエマージョンによって投与されるため、主な制限はサンプルサイズに関連しているはずですが、潜在的な用途は膨大です。

micro-ct-imaging-and-morphometric-analysis-of-mouse-neonatal-brains

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

出典: Choi, J. P. et al. マウスモデルにおける脳海綿状奇形の誘導およびマイクロCTイメージング。 J. Vis. Exp.

マウス脳における脳海綿状奇形病変の造影マイクロCTイメージング

出典: Mizuno, H., et al. In Vivo 新生児マウスの皮質ニューロンの2光子イメージング J. Vis. Exp.

マウスの子犬の神経形態をイメージングするための2光子顕微鏡法

この記事では、高分解能、蛍光標識したマウスの脳の微細脳解剖と、再構築するための完全な実験手順について説明します。説明されたプロトコルは、試料調製及び清算、画像化、データ後処理およびマルチスケール視覚化のための取付片を備えている。...

共焦点光シート顕微鏡全体マウスの脳のミクロンスケールの分解能光トモ

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誘導およびマウス モデルにおける脳海綿静脈奇形のマイクロ CT イメージング

ここで組織をクリア、蛍光標識と、それによって、大脳新皮質の細胞型の三次元組織の可視化を可能にするマウスの脳組織の大規模なイメージング手順をについて説明します。...

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生体内で新生仔マウスの大脳皮質ニューロンの 2 光子イメージング

マイクロ ct 画像に基づく法病変を特徴と、小動物の脳に電極を配置

透過型電子顕微鏡と子宮内で伝達の組み合わせは、開発中に神経系の細かい微細構造の形態学的変化を研究するための強力なアプローチです。これらの併用は、神経可塑性の地形表現に関しての基になる構造の詳細の変更への深い洞察をことができます。...

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このプロトコルでは、iDISCO+を使用して無傷のマウス脳の磁気共鳴イメージング、クリアリング、および免疫標識を行う方法について説明し、その後、ライトシート顕微鏡を使用したイメージングの詳細な説明、およびNuMorphを使用したダウンストリーム分析について説明します。...

MRI、組織透明化、ライトシート顕微鏡を用いた無傷新生児マウス脳の全脳単一細胞イメージングと解析

ここでは、マイクロコンピューター断層撮影法に基づく方法で、マウスの頭蓋顎顔面骨の3Dモデルをセグメント化して測定する方法について詳しく説明します。これにより、現在の方法よりもマウスの頭蓋顎顔面骨の発達をより適切に評価できます。...

3次元マイクロコンピュータ断層撮影法によるマウス頭蓋顎顔面奇形の解析

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