ウシ肝細胞における脂肪滴サイズと融合の評価

本プロトコルでは、オイルレッドOを使用して脂肪滴(LD)を染色する方法、脂肪酸誘発脂肪肝細胞モデルでLDのサイズと数を計算する方法、およびBODIPY 493/503を使用して小さなLDが大きなLDに融合するプロセスを観察する方法について説明しますライブセルイメージングによる。

私たちの研究は、肝細胞におけるリノール酸によって誘導される脂肪滴数とサイズに焦点を当てています。さらに、脂肪肝のメカニズムについての洞察を提供することを目指しています。この分野の研究における最近の進歩は、コリン、CCTアルファ、確立された誘導オートファジーが、ウシ肝細胞の脂肪滴サイズを調節できることを示唆しています。

さらに、生細胞ワークステーションの観察により、リン脂質が脂肪滴融合にかなりの影響を与えることが示されています。現在、遺伝子支援、蛍光ピンセット、液体クロマトグラフィー、オミックス分析、シングルクロマトグラフィー、フローサイトメトリー、およびその他の技術を使用して、この分野の膨大な研究をグループ化しています。実験方法にはいくつかの制限があります。

例えば、限られた場の現象は、脂肪滴場についておよび特定の廃棄物の飛行下でのみ観察することができる。Oil Red O染色は、脂肪滴蛍光染色よりも便利で安価であり、脂肪滴の見かけのサイズを測定するために広く使用されています。操作が簡単で、必要な機器も少なくて済みます。

さらに、この驚異的な脂質融合を生細胞ステーションから直接観察します。本研究は、脂肪滴の大きさと融合を観察するための簡便で再現性のある方法を提供し、細胞脂質代謝研究における脂肪滴分析に広く適用することができます。今後も乳牛における脂肪滴融合のメカニズムや脂肪肝の構造変化に着目し、脂肪滴の研究を集中的に進めていきます。