Name: 免疫成分を用いた基本的な3次元(3D)腸管モデルシステム (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 39 s
Description: 学ぶ 3次元腸管モデルシステムを用いた細胞生物学研究。腸管上皮細胞、線維芽細胞、免疫細胞の共培養により、スペルミジンやオイゲノールの有益効果やグルテンの有害性を評価する標準化されたin vitroモデルを構築します。

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ウンベルト・ヴェロネージ財団の研究者活動を支援するフェローシップに感謝します。

パラフィン包埋法による3次元腸管粘膜モデルの構築

<ol><li>Chelakkot, C., Ghim, J., Ryu, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+regulating+intestinal+barrier+integrity+and+its+pathological+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+%26+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mechanisms regulating intestinal barrier integrity and its pathological implications.</a> Experimental & Molecular Medicine. 50 (8), 1-9 (2018).</li>
<li>Schoultz, I., Keita, ÅV. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intestinal+barrier+and+current+techniques+for+the+assessment+of+gut+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The intestinal barrier and current techniques for the assessment of gut permeability.</a> Cells. 9 (8), 1909(1909).</li>
<li>Bednarek, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+methods+for+measuring+the+permeability+of+cell+monolayers%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+and+Protocols%22%5BJournal%5D)">In vitro methods for measuring the permeability of cell monolayers.</a> Methods and Protocols. 5 (1), 17(2022).</li>
<li>Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+the+intestinal+barrier+by+nutrients%3A+The+role+of+tight+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Science+Journal%22%5BJournal%5D)">Regulation of the intestinal barrier by nutrients: The role of tight junctions.</a> Animal Science Journal. 91 (1), e13357(2020).</li>
<li>Guibourdenche, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+contaminants+effects+on+an+in+vitro+model+of+human+intestinal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Toxics%22%5BJournal%5D)">Food contaminants effects on an in vitro model of human intestinal epithelium.</a> Toxics. 9 (6), 135(2021).</li>
<li>Panwar, S., Sharma, S., Tripathi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+barrier+integrity+and+dysfunctions+in+maintaining+the+healthy+gut+and+their+health+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Role of barrier integrity and dysfunctions in maintaining the healthy gut and their health outcomes.</a> Frontiers in Physiology. 12, 715611(2021).</li>
<li>Truzzi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pro-inflammatory+effect+of+gliadins+and+glutenins+extracted+from+different+wheat+cultivars+on+an+in+vitro+3D+intestinal+epithelium+model%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Pro-inflammatory effect of gliadins and glutenins extracted from different wheat cultivars on an in vitro 3D intestinal epithelium model.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (1), 172(2020).</li>
<li>Fedi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+models+replicating+the+human+intestinal+epithelium+for+absorption+and+metabolism+studies%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">In vitro models replicating the human intestinal epithelium for absorption and metabolism studies: A systematic review.</a> Journal of Controlled Release. 335, 247-268 (2021).</li>
<li>De Fazio, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotizing+enterocolitis%3A+Overview+on+in+vitro+models%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Necrotizing enterocolitis: Overview on in vitro models.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (13), 6761(2021).</li>
<li>Jubelin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+in+vitro+culture+models+in+oncology+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+%26+Bioscience%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional in vitro culture models in oncology research.</a> Cell & Bioscience. 12 (1), 155(2022).</li>
<li>Russell, W., Burch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+principles+of+humane+experimental+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Available+online%22%5BJournal%5D)">The principles of humane experimental technique.</a> Available online. , http://altweb.jhsph.edu/pubs/books/humane_exp/het-toc (2023).</li>
<li>Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+it+time+for+reviewer+3+to+request+human+organ+chip+experiments+instead+of+animal+validation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">Is it time for reviewer 3 to request human organ chip experiments instead of animal validation studies.</a> Advanced Science. 7 (22), 2002030(2020).</li>
<li>Jung, S. M., Kim, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+models+of+the+small+intestine+for+studying+intestinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">In vitro models of the small intestine for studying intestinal diseases.</a> Frontiers in Microbiology. 12, 767038(2022).</li>
<li>Nitsche, K. S., Müller, I., Malcomber, S., Carmichael, P. L., Bouwmeester, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implementing+organ-on-chip+in+a+next-generation+risk+assessment+of+chemicals%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Implementing organ-on-chip in a next-generation risk assessment of chemicals: a review.</a> Archives of Toxicology. 96 (3), 711-741 (2022).</li>
<li>Kekilli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Midkine+level+may+be+used+as+a+noninvasive+biomarker+in+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Turkish+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Midkine level may be used as a noninvasive biomarker in Crohn's disease.</a> Turkish Journal of Medical Sciences. 50, 324-329 (2020).</li>
<li>Truzzi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spermidine-eugenol+supplement+preserved+inflammation-challenged+intestinal+cells+by+stimulating+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Spermidine-eugenol supplement preserved inflammation-challenged intestinal cells by stimulating autophagy.</a> International Journal of Molecular Sciences. 24 (4), 4131(2023).</li>
<li>Truzzi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+supplements+safe%3F+Effects+of+gallic+and+ferulic+acids+on+in+vitro+cell+models%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Are supplements safe? Effects of gallic and ferulic acids on in vitro cell models.</a> Nutrients. 12 (6), 1591(2020).</li>
<li>Buckley, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualisation+of+multiple+tight+junctional+complexes+in+human+airway+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Procedures.+Online%22%5BJournal%5D)">Visualisation of multiple tight junctional complexes in human airway epithelial cells.</a> Biological Procedures. Online. 20, 3(2018).</li>
<li>Ghosh, R., Gilda, J. E., Gomes, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+necessity+of+and+strategies+for+improving+confidence+in+the+accuracy+of+western+blots%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Proteomics%22%5BJournal%5D)">The necessity of and strategies for improving confidence in the accuracy of western blots.</a> Expert Review of Proteomics. 11 (5), 549-560 (2014).</li>
</ol>

著者らは、利益相反がないことを宣言します。

ここで紹介する基本的な再建腸粘膜モデルシステム(図6)は、生理学的複雑さ(線維芽細胞と単球を含むECMに富む固有層支持体を持つCaco-2単層を含む、より生理学的に関連性のある3D細胞培養)と実験の単純さ(市販のヒト細胞株を使用して標準化され、再現性のあるシステムを作製する)を兼ね備えています13.そのため、このモデルシステムは、潜在的な医薬品/食品成分が腸バリアの完全性に及ぼす影響を評価することを目的としたマウスモデルの適切な代替手段と見なされています。この点に関して、以前の論文は、潜在的に有益な化合物(および用量依存性)と有害な食品成分の両方をテストする上で、現在の細胞培養モデルの有効性を実証しています7,16,17。さらに、LPSまたは代替の炎症誘発性試薬(2,4,6-トリニトロベンゼンスルホン酸またはデキストラン硫酸ナトリウム)を現在の腸...

腸管上皮関門は、異なる種類の上皮細胞を含む1細胞厚の内層であり、身体の外部環境と内部環境との間の最初の物理的防御障壁または界面を構成する1,2。円柱型腸細胞は、上皮細胞の中で最も豊富なタイプを構成します。これらは、タイトジャンクション(TJ)を含むいくつかのバリアコンポーネント間の相互作用を通じて上皮バリアの完全性を維持する役割を担っており、バリアの引き締めに重要な役割を果たしています1,3。TJ構造は、閉塞帯帯(ZO)やシングリンなどの細胞内プラークタンパク質からなり、オクルージン、クローディン、接合接着分子(JAM)などの膜貫通タンパク質と協働して、隣接する細胞を緊密につなぐジッパー状の構造を形成します3,4。膜貫通型タンパク質は、低分子化合物の受動的な傍細胞拡散を調節し、有毒な高分子を排除します。
潜在的に有毒な食品化合物や食品汚染物質は、炎症性サイトカイン産生を刺激し、上皮透過性を破壊し、免疫細胞を活性化し、慢性的な腸組織の炎症を引き起こします5,6,7。対照的に、さまざまな抗酸化および抗炎症性植物化学物質は、TJタンパク質の発現と組み立ての回復を通じて、炎症性サイトカインの発現を減少させ、腸のTJバリアの完全性を高めることが報告されています4,6,8。したがって、有益な化合物と有害な化合物の両方による上皮バリアの完全性の調節により、医薬品スクリーニングおよび毒性試験のための腸管バリアを模倣することを目的としたin vivoおよびin vitroモデルの両方の使用が増加しています。これは、腸管疾患(IBD)、壊死性腸炎、および癌の病態生理学を理解することへの関心が高まっていることを考えると、特に関連性があります8,9,10。
動物実験における「3R」の目的を達成するために、細胞ベースのin vitroモデルの開発が求められています。これらには、動物の使用に代わる代替手段、使用される動物の数の削減、および苦痛を軽減する方法の採用の改良が含まれます11,12,13。さらに、ヒトモデルとマウスモデル(げっ歯類が最も広く使用されている種)の根底にある分子、細胞、および生理学的メカニズムは独特であり、ヒトの応答における予測因子としてのマウスモデルの有効性に関する論争につながっています12,13。in vitroヒト細胞株モデルの多くの利点には、標的制限実験、直接観察、および連続分析が含まれます13。
2次元(2D)培養における単細胞型単分子膜は、強力なモデルとして役立っています。しかし、これらはヒト組織の生理学的複雑さを正確に再現することはできない8,13,14。その結果、次世代のリスク評価ツールボックスとして、健康な腸組織と病気の腸組織の両方の生理学的複雑さを再現するために、ますます改善された3D培養システムが開発されています13,14。これらのモデルには、多様な細胞株を備えた3Dトランズウェルスキャフォールド、オルガノイド培養物、細胞株とオルガノイド(健康な組織と病気の組織の両方に由来する)の両方を使用したマイクロ流体デバイス(腸管オンチップ)が含まれます8,13,14。
本研究で提示された3D「健康な組織」腸と同等のプロトコルは、生理学的複雑さと実験の単純さのバランスをとることに基づいていました13。このモデルは、3つの細胞株(腸細胞[ゴールドスタンダードの結腸腺癌Caco-2株]と支持免疫成分[U937単球およびL929線維芽細胞])で構成され、腸上皮バリアの完全性と免疫応答に関心のある食物分子の予備スクリーニングに適用可能な標準化された再現性のあるシステムを構成する3Dトランズウェルスキャフォールドの代表例です。プロトコルは固定腸の等量を使用して上皮障壁の完全性の光学顕微鏡評価のためのパラフィンの埋め込みを含んでいる。本アプローチの利点は、1回の実験で複数のパラメータについて、包埋組織の多数の切片を染色することができることである。

<table><tbody><tr><td>アルシアンブルー/PASキット</td><td>サイテック・ラボラトリーズ社</td><td>APS-1、APS-2</td><td>免疫組織化学染色キット</td></tr><tr><td>ブルー・トリパン溶液</td><td>サーモ・フィッシャー</td><td>15250061</td><td>細胞数解析</td></tr><tr><td>Caco-2 大腸腺癌細胞</td><td>ATCC</td><td>ATCCHTB-37</td><td>細胞株</td></tr><tr><td>シトロ・ヒスト・クリアリモネン系</td><td>ヒストリン研究所</td><td>R0050CITRO</td><td>パラフィン埋め込み用の試薬</td></tr><tr><td>ドゥルベッコ&#39;改良型イーグル中型(DMEM)</td><td>GIBCO</td><td>11965092</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>埋め込みセンター</td><td>ヒストリン研究所</td><td>TEC2900</td><td>パラフィン埋め込み用の装置</td></tr><tr><td>胎児用牛血清(FBS)</td><td>GIBCO</td><td>A5256701</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>ハンクス&#39;バランスソルトソリューション(HBSS)</td><td>GIBCO</td><td>12350039</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>ヒューマン・ミドカインELISAキット</td><td>コヘージョン・バイオサイエンス</td><td>CEK1270</td><td>キット・エリサ</td></tr><tr><td>逆立顕微鏡</td><td>エクリプスTs2、ニコン</td><td>MFA34100</td><td>顕微鏡</td></tr><tr><td>L929マウス線維芽細胞</td><td>ATCC</td><td>ATCC &#174;-CCL1</td><td>細胞株</td></tr><tr><td>LC3-II</td><td>ノバス・バイオロジカルズ</td><td>NB910-40752スーパーノーバスパック</td><td>抗体</td></tr><tr><td>L-グルタミン</td><td>GIBCO</td><td>A2916801</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>オクルディン</td><td>ノバス・バイオロジカルズ</td><td>NBP1-87402</td><td>抗体</td></tr><tr><td>パラフィンラボ・O・ワックス PLUS 56 &#176;C&#8211;58 &#176;C</td><td>ヒストリン研究所</td><td>R0040プラス</td><td>パラフィン埋め込み用の装置</td></tr><tr><td>ペニシリン・ストレプトマイシン</td><td>GIBCO</td><td>15070063</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>ペニシリン・ストレプトマイシン</td><td>GIBCO</td><td>15070063</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>ラットテールコラーゲンタイプI</td><td>GIBCO</td><td>A1048301</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>ロズウェルパーク記念研究所ミディアム(RPMI)</td><td>GIBCO</td><td>21870076</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>ピルビン酸ナトリウム</td><td>GIBCO</td><td>11360070</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>サーモフィッシャー カウンテスII FL 自動セルカウンター</td><td>サーモ・フィッシャー</td><td>TF-CACC2FL</td><td>セルカウント装置</td></tr><tr><td>トランスウェル</td><td>共演者コーニング</td><td>3413</td><td>細胞結合のためのプラスチック</td></tr><tr><td>トリプシン</td><td>GIBCO</td><td>15090046</td><td>細胞コルチャー試薬</td></tr><tr><td>U937は単球性のヒト骨髄性白血病細胞株です</td><td>ATCC</td><td>ATCC CRL-1593.2</td><td>細胞株</td></tr><tr><td>UltraTek アルクホス アンチポリバレント(永久赤)ステインキット</td><td>サイテック・ラボラトリーズ社</td><td>AMH080</td><td>免疫組織化学染色キット</td></tr></tbody></table>

免疫成分を用いた基本的な3次元(3d)腸管モデルシステム

Basic Three-Dimensional (3D) Intestinal Model System with an Immune Component

炎症性腸疾患の病態生理学の研究、潜在的に有益な物質の薬理学的スクリーニング、および潜在的に有害な食品成分の毒性研究のために、 in vivo および in vitro 腸モデルの使用が増加しています。関連して、動物モデルに代わる細胞ベースの in vitro モデルの開発が現在求められています。ここでは、細胞株を使用した基本的な「健康な組織」の三次元(3D)腸と同等モデルのプロトコルが、実験のシンプルさ(標準化され、容易に再現可能なシステム)と生理学的複雑さ(U937単球とL929線維芽細胞の支持免疫成分を持つCaco-2腸細胞)の両方を提供するという二重の利点を備えています。このプロトコルには、固定腸当量物の光学顕微鏡評価のためのパラフィン包埋も含まれており、それによって1回の実験から複数の視覚パラメータを分析するという利点を提供します。ヘマトキシリンとエオシン(H&E)で染色した切片は、対照処理でCaco-2柱状細胞がタイトで規則的な単層を形成していることを示すもので、実験システムとしてのモデルの有効性を検証するために使用されます。グルテンを炎症誘発性食品成分として使用し、切片から分析したパラメータには、単層の厚さの減少、基礎となるマトリックス(H&E)からの破壊と剥離、オクルージン染色(統計的に定量化可能)から示されるようなタイトジャンクションタンパク質発現の減少、分化クラスター14(CD14)染色とCD11b関連のマクロファージへの分化から証明される遊走U937細胞の免疫活性化が含まれます。リポ多糖類を用いて腸の炎症をシミュレートすることによって示されるように、測定可能な追加のパラメータは、粘液染色の増加および固定前に培地から抽出することができるサイトカイン発現(ミッドカインなど)である。基本的な3次元(3D)腸粘膜モデルと固定切片は、複数の視覚的に定量化可能なパラメータを分析する可能性を備えた炎症状態とバリアの完全性の研究に推奨できます。

最初の重要な側面は、実験目的で基本的な3D腸当量粘膜の受容性を決定することです。これは、組織学および組織病理学の研究室で最も広く使用されている染色、すなわちヘマトキシリン(核物質を濃い青紫色に染色)およびエオシン(ピンクのさまざまな色合いの細胞質物質を染色)で行います。H&E染色は、まず未処理のコントロールで行い、実験的処理と同じ条件と時間枠で培養します。細胞のパターン、形状、構造を可視化することで、この腸管細胞モデルシステムの成功は、5日後にCaco-2細胞が細胞外マトリックス(ECM)に富む固有層の上にタイトで規則的な単層を形成することによって決定されます(図1A)。さらなる分析に適さないと判断されるモデル系の例には、10日後に示されているように、上皮層が乱れて過剰に増殖するものが含まれます(図1B)。別の例としては、過剰なCaco-2細胞の播種または過度のインキュベーションによって引き起こされる、厚すぎて混乱した上皮層があります(図1C)。奇形(<str...

ここでは、基本的な3次元(3D)腸細胞株モデルシステムの構築と、固定された腸当等物の光学顕微鏡的評価のためのパラフィン包埋プロトコルについて説明します。選択したタンパク質を染色することで、1回の実験で複数の視覚的パラメータを解析し、前臨床薬物スクリーニング研究に活用することができます。

免疫成分を用いた基本的な3次元(3D)腸管モデルシステム

There has been an increase in the use of in vivo and in vitro intestinal models to study the pathophysiology of inflammatory intestinal diseases, for the ...

この研究の範囲は、これらのin vitroの3次元ヒト細胞株モデルを使用して、腸組織上の有益で有用な化合物の事実を調査することです。このモデルは、研究の理解を深めるために、また基本的な薬物モデルとして使用することができます。植物由来の化合物であるスペルミジンとオイゲノールを別々に、またはサプリメントの形で一緒に使用し、これらのモデルを使用してオートファジーの有益な増加と炎症の減少を測定します。次に、特定の小麦品種から抽出されたグルテンが腸組織に及ぼす潜在的に有害な影響を示すこともできます。現在、動物モデルの代替として、ヒト腸の生理機能をよりよく反映した、経済的に価格が高く、標準化され、再現性が容易なin vitroシステムを使用しています。また、植物由来の細胞ではなく、市販のヒト細胞株を使用しているため、この研究からの回答は、一般の人々により適用可能です。このプロトコルは、完全に異なる回線の使用に基づいています。これにより、モデルが最も標準化され、再現性が高まります。さらに、異なる細胞株、腸細胞、線維芽細胞、免疫系細胞を同時に培養することで、患者に起こることにより近い細胞応答が可能になります。

basic-three-dimensional-3d-intestinal-model-system-with-an-immune

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

三次元（3-D）環境中で増殖する細胞は、2-D環境（ 例えば 、フラスコまたはディッシュ）で細胞培養上顕著な改善を示します。ここでは、回転-壁容器（RWV）バイオリアクターが提供する微小重力下で培養ヒト腸粘膜の多細胞3次元器官モデルの開発について説明します。...

微小重力下で増殖させたヒト腸粘膜の多細胞三次元器官型モデルの開発

本稿では、新しい腸器官培養システムを用いて、 生体 実験を行うホストとマイクロバイオームの相互作用を分析する独自の方法を紹介する。...

宿主-微生物叢相互作用を解析するための腸腸器官培養システム

生検由来の腸オルガノイドと臓器オンチップ技術は、領域特異的な腸機能を再要約するためにミクロ生理学的プラットフォームに組み合わされます。...

ヒトオルガノイドと臓器オンチップ技術を組み合わせて腸領域特異的機能をモデル化

このプロトコルは、極性が逆の小腸炎を利用し、頂端表面へのアクセスを可能にする頂端外壊死性腸炎(NEC)-in-a-dishモデルを記述する。NEC関連上皮破壊を検出するための免疫蛍光染色プロトコールと、NECインディッシュプロトコルに供するアピカルアウトエンテロイドの生存率を決定する方法を提供します。...

インビトロ 壊死性腸炎の頂端外腸炎モデル

本プロトコルは、クローディン-7ノックアウトモデルにおける結腸幹細胞の活性および機能を研究するためのマウス結腸オルガノイド系の確立を記載する。...

腸幹細胞機能をex vivoで研究するためのマウス結腸陰窩の三次元培養

イヌ腸オルガノイドとGut-on-a-Chipマイクロ流体システムの統合により、ヒトの腸疾患に関連するトランスレーショナルモデルが提供されます。提示されたプロトコルは、腸の3D形態形成と動的 in vitro モデリングを可能にし、One...

炎症性腸疾患患者由来の腸管オルガノイドを用いたイヌ腸チップの3次元形態形成

当社の詳細なプロトコルは、3D構造とさまざまな細胞タイプでヒトの腸粘膜をシミュレートし、微生物のコロニー形成に応答した免疫応答と細胞機能の詳細な分析を可能にする高度な腸オンチップモデルの作成と使用について概説しています。...

腸粘膜免疫応答を解析するための免疫適格腸内チップモデル

上皮細胞が3-D細胞凝集体の形成をもたらす生理的条件下で成長することができ、回転細胞培養システムが記載されています。凝集体は、ディスプレイを生成...

回転壁容器バイオリアクター由来3D上皮細胞モデルの培養とその応用

我々は、単一細胞の三次元共焦点蛍光から取ら未定義形状の形態の変化を測定するためにImaris神経科学、ImarisXTとMATLABを利用したソフトウェアプラットフォームを開発しました。この新しいアプローチは、受容体活性化に続く細胞形状の変化を定量化するため、創薬のための可能な追加ツールを表すために使用することができます。...

三次元蛍光画像から細胞形態の変化を定量分析ツール

ゼブラフィッシュの個体やグループを追跡できる3D自動ビデオシステムの使用について説明しています。応用例として、NMDA受容体拮抗薬MK-801がゼブラフィッシュの群れに及ぼす影響について検討します。...

自動3D追跡システムを使用して、成魚のゼブラフィッシュの個体群と群れを記録

学ぶ 3次元腸管モデルシステムを用いた細胞生物学研究。腸管上皮細胞、線維芽細胞、免疫細胞の共培養により、スペルミジンやオイゲノールの有益効果やグルテンの有害性を評価する標準化されたin vitroモデルを構築します。

免疫成分を用いた基本的な3次元(3D)腸管モデルシステム

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