Name: 森林ウッドボーラーからの昆虫病原性真菌の分離、行動同定、および病原性評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-29T12:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 58 s
Description: 学ぶ森林ウッドボーラーMonochamus alternatusから昆虫病原性真菌を分離・同定し、病原性を評価する手法。このプロトコルは生防除剤の発見と生物多様性研究に貢献します。

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<meta charset="utf8"></head><body>森林ウッドボーラーからの昆虫病原性真菌資源の探索

<table><tbody><tr><td>1.5 mL、2 mL遠心分離管バイオ</td><td>シャープ</td><td>BS-15-M</td><td></td></tr><tr><td>10 & マイクロ;Lピペットチップ</td><td>Sangon Biotech</td><td>F601216</td><td></td></tr><tr><td>10 & micro;L、20 &micro;L、100 &micro;L、200 &micro;L、1,000 &micro;Lピペット</td><td>レイニン</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1,000 & マイクロ;Lピペットチップ</td><td>Sangon Biotech</td><td>F630102</td><td></td></tr><tr><td>2 mL 極低温バイアル</td><td>コーニング</td><td>430659</td><td></td></tr><tr><td>20x PBSバッファー</td><td>Sangon Biotech</td><td>B548117-0500</td><td></td></tr><tr><td>200 &micro;L ピペットチップ</td><td>Sangon Biotech</td><td>F601227</td><td></td></tr><tr><td>2,000 bp maker</td><td>TaKaRar</td><td>SD0531</td><td></td></tr><tr><td>50 mL チューブ</td><td>Nest</td><td>602052</td><td></td></tr><tr><td>50% グルタルアルデヒド溶液</td><td>Sangon Biotech</td><td>G916054</td><td></td></tr><tr><td>50x TAE buffer</td><td>Sangon Biotech</td><td>B548101</td><td></td></tr><tr><td>6x loading buffer</td><td>TaKaRar</td><td>SD0503</td><td></td></tr><tr><td>アガロース</td><td>サンゴン バイオテック</td><td>A610013</td><td></td></tr><tr><td>無水エタノール</td><td>Jkchemical</td><td>LB10V37</td><td></td></tr><tr><td>生化学栽培キャビネット</td><td>上海 恒</td><td>LRH-250F</td><td></td></tr><tr><td>クロロホルム</td><td>ジュワ</td><td>61553</td><td></td></tr><tr><td>商業用カブトムシ トラップ</td><td>FEIMENGDI</td><td>BF-8</td><td>www.yinyouji.com</td></tr><tr><td>ゲル イメージャー</td><td>バイオ・ラッド</td><td>GelDoc XR+</td><td></td></tr><tr><td>グリセロール</td><td>サンゴンバイオテック</td><td>A600232</td><td></td></tr><tr><td>高速冷蔵遠心分離機</td><td>シグマ</td><td>D-37520</td><td></td></tr><tr><td>高圧蒸気滅菌ポット</td><td>メトラー・トレド</td><td>JA5003</td><td></td></tr><tr><td>イソプロピルアルコール</td><td>一般試薬</td><td>G75885B</td><td></td></tr><tr><td>核酸色素</td><td>サンゴンバイオテック</td><td>A616696</td><td></td></tr><tr><td>光学顕微鏡、OM</td><td>ライカ</td><td>DM2000</td><td></td></tr><tr><td>パラフィルム</td><td>パラフィルム</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>PCR メーター</td><td>Heal Force</td><td>Trident960</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン G</td><td>マークリン</td><td>GB15743</td><td></td></tr><tr><td>ポテト デキストロース 寒天、PDA</td><td>Oxoid</td><td>CM0139</td><td></td></tr><tr><td>ポテト デキストロース ブロス、PDB</td><td>Solarbio</td><td>P9240</td><td></td></tr><tr><td>プライマー</td><td>Sangon Biotech</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Primers Taq</td><td>TaKaRar</td><td>RR902A</td><td></td></tr><tr><td>迅速真菌ゲノムDNA分離キット</td><td>Sangon Biotech</td><td>B518229</td><td></td></tr><tr><td>走査型電子顕微鏡、SEM</td><td>日立</td><td>S-3400N</td><td></td></tr><tr><td>ストレプトマイシン</td><td>マークリン</td><td>S6153</td><td></td></tr><tr><td>テトラサイクリン</td><td>マークリン</td><td>T829835</td><td></td></tr><tr><td>Tween-80</td><td>Marklin</td><td>T6336</td><td></td></tr><tr><td>真空凍結乾燥機</td><td>Yamato</td><td>DC801</td><td></td></tr><tr><td>Vortex Shaker</td><td>HLD</td><td>WH-861</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Mercaptoethanol</td><td>Marklin</td><td>M6230</td><td></td></tr></tbody></table>

森林ウッドボーラーからの昆虫病原性真菌の分離、行動同定、および病原性評価

Isolation, Behavioral Identification, and Pathogenicity Assessment of Entomopathogenic Fungi from a Forest Wood Borer

Mからの真菌分離株の単離と同定。 オルタナタス 誘引トラップの助けを借りて、多数の(合計約500匹のカブトムシ) のM。 alternatus は5つの地理的地域から収集されました。昆虫病原性真菌による感染の典型的な症状を持つカブトムシの死体が選ばれました。次に、すべてのカブトムシの体外皮を、プロトコルステップ1.3で説明したようにいくつかの位置に解剖しました。その結果、600を超える真菌分離株がさまざまな体位から分離されました。これにより、マツノコギリハムシに対する病原体をスクリーニングするためのより豊富な真菌候補が可能になります。ITS領域の塩基配列決定により、これらの分離株は15の真菌属と39の種に分類できることが予備的に明らかになりました。さらに、 M. alternatus 成虫の地理的集団間で真菌群集の構成に大きな違いがありました。真菌種、 Aspergillus austwickii、 Akanthomyces attenuatus (syn. Lec...

Forest wood borers (FWB) cause severe tree damage and economic losses worldwide. The release of entomopathogenic fungi (EPF) during the FWB emergence ...

isolation-behavioral-identification-pathogenicity-assessment

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

ここでは、土壌サンプルから病原性真菌(EPF)を単離・選択するために用いたミミズ(テネブリオモリター)-ベイトシステムに基づくプロトコルを提示する。有効なコニディア数(ECN)式は、現場での害虫微生物制御のための生理学的特性に基づいて高い耐ストレスEPFを選択するために使用される。...

土壌サンプルからの病原性真菌の単離と選択と昆虫害虫に対する真菌性毒性の評価

昆虫病原性真菌コロニーは、 テネブリオ 餌、 ガレリア...

土壌試料からの昆虫病原性菌類の分離方法の比較

このビデオでは、バイオフィードバックを使用して強調して人の精神生理学的反応を評価する一つの方法を説明します。我々はまた、治療計画のための一般的なガイドラインを紹介します。...

バイオフィードバックを用いた精神生理学的ストレス評価

から細胞外液のヴァンパイア·アイソレーション<em&gt;線虫（Caenorhabditis elegans）</em

本稿では、腫瘍に浸潤する白血球の高度に精製された集団を単離するためのプロトコルについて説明します。このプロトコルは複雑な腫瘍組織から細胞を単離するための収率および純度を高めるためにミルテニーバイオテクプロトコルから構成されている。...

原発腫瘍から免疫細胞の分離

我々は、直接筋力、筋パワー、収縮動態との単離された骨格筋の疲労を測定する方法を説明します...

隔離された骨格筋の収縮、倦怠感や交互の ex vivo での評価

サンプル間のミトコンドリア膜電位の比較は、細胞の状態に関する貴重な情報をもたらします。ミトコンドリアを単離し、蛍光を使用して阻害剤およびアンカプラーに対する反応を評価するための詳細な手順について説明します。このプロトコルの方法と有用性は、細胞培養と細胞ストレスの動物モデルの使用によって説明されています。...

培養細胞およびマウス組織から単離とミトコンドリアの機能解析

昆虫病原性真菌は、農業害虫の生物防除剤として重要性を増している。この研究では、害虫に対する商業利用のために、 Metarhizium robertsii および M. pinghaense...

昆虫病原性真菌、メタリシウム・ロベルツィイおよびメタリシウム・ピンヘーンセの大量生産、害虫に対する商業利用

ここでは、土壌生物多様性をスクリーニングして、不本意な物質の分解に関与する真菌株を探すためのプロトコルを提示する。まず、フミン酸またはリグノセルロース上で増殖することができる真菌株が単離される。その後、それらの活性は酵素アッセイと炭化水素やプラスチックなどの汚染物質の両方でテストされます。...

難治性物質の分解に関与する菌類の土壌生物多様性からの単離とスクリーニング

このプロトコルは、マウス脂肪デポーの解剖および内皮細胞集団を遊離させてから同定するためのそれぞれの動脈の単離および消化のための方法を詳述する。ダウンストリームアプリケーションで使用される新たに単離された細胞は、血管細胞生物学と血管機能障害のメカニズムの理解を促進します。...

下流アプリケーションのための異なる脂肪デポからの血管内皮細胞の分離と同定(英語)

学ぶ森林ウッドボーラーMonochamus alternatusから昆虫病原性真菌を分離・同定し、病原性を評価する手法。このプロトコルは生防除剤の発見と生物多様性研究に貢献します。

森林ウッドボーラーからの昆虫病原性真菌の分離、行動同定、および病原性評価

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