膵β細胞におけるマイトファジーフラックスを調べるための補完的アプローチ

このプロトコルは膵臓のβ細胞のmitophagyの量的な分析のための2つの方法を輪郭を描く: 最初に、細胞透過性のミトコンドリア特定の染料の組合せ、および二番目に、遺伝的にコードされたmitophagyのレポーター。これら2つの手法は補完的であり、特定のニーズに基づいて展開できるため、ミトコンドリアの品質管理に定量的に取り組む際の柔軟性と精度を高めることができます。

私たちのプロトコルは、フローサイトメトリーを介して単一細胞分解能でベータ細胞マイトファジーフラックスを研究するための2つの補完的な方法を説明しています。mt-Keimaプロトコルは遺伝子マイトファジーレポーターを利用しますが、MtPhagyプロトコルは3つの蛍光色素を組み合わせるため、ヒトサンプル中のトランスフェクションが困難な細胞への外挿が容易です。従来の生化学的アプローチとイメージングアプローチを用いたマイトファジーの評価は、時間がかかり、困難を伴います。

したがって、ベータ細胞のマイトファジーフラックスを研究するための新しい頑健で効果的な方法を開発することが重要です。mt-Keima法とMtPhagy法はどちらも、膵臓ベータ細胞のマイトファジーフラックスを研究するのに効率的な定量的評価です。そこで、ソレイマンプール研究室は、膵臓のベータ細胞不全と糖尿病を引き起こすさまざまなメカニズムに焦点を当てています。

また、特にマイトファジーを含むミトコンドリアのライフサイクルのさまざまな側面に焦点を当て、ミトコンドリア機能の欠陥が糖尿病の発症をどのように促進するかを理解しています。