Name: 機械的に単離されたStromal Vascular画分およびFibrinのヒドロゲルの組合せ:処理のプロトコール (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-11-17T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 30 s
Description: 学ぶ機械的単離したstromal vascular画分とフィブリンヒドロゲルを組み合わせた創傷治癒促進法。脂肪組織由来の自己細胞を用い、処理時間短縮と汚染リスク低減を実現する革新的な再生医療アプローチです。

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<meta charset="utf8"></head><body>再生医療のためのフィブリンハイドロゲル中の機械的間質血管分画

<table><tbody><tr><td>12-ウェルプレート</td><td>Sarstedt</td><td>83.3921</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-ジアミジノ-2-フェニルインドール (DAPI)</td><td>Biochemica</td><td>A1001.0010</td><td></td></tr><tr><td>50 mL-Falcon</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>吸収性タオル、2パック</td><td>ハリヤード</td><td>89701</td><td></td></tr><tr><td>アラマーブルー 25 mL</td><td>Invitrogen</td><td>DAL1025</td><td></td></tr><tr><td>Albumin, Bovine (BSA)</td><td>VWR</td><td>0332-500G</td><td></td></tr><tr><td>Biotek Cytation 5&nbsp;</td><td>Agilent</td><td></td><td>Cell Imagingマルチモードマイクロプレートリーダー&nbsp;</td></tr><tr><td>CaCl<サブ>2</サブ>&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670-500G</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Cryostat Microtome</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM with 4,5 g/L glucose, with L-Glutamine, with sodium pyruvate</td><td>VWR</td><td>392-0416</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Gibco</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>Epinephrin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E4250</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Biowest</td><td>S181H-500</td><td></td></tr><tr><td>フィブリノーゲンの人間の血漿100 mg</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>341576-100MG</td><td></td></tr><tr><td>のホルマリン</td><td>のフィッシャー科学</td><td>SF100-4</td><td></td></tr>の<tr><td>ホルマリン4%</td><td>Formafix</td><td>1308069</td><td></td></tr><tr><td>FSC 22-Einbettmedium、blau</td><td>Biosystems</td><td>3801481S</td><td></td></tr><tr><td>のヘマトキシリン及びエオシン溶液</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3136 / HT110132</td><td></td></tr><tr><td>Lactated Ringer's 溶液 1000 mL</td><td>B Braun</td><td>R5410-01</td><td></td></tr><tr><td>メルセデス カニューレ 4mm</td><td>MicroAire</td><td>PAL-R404LL</td><td></td></tr><tr><td>NaCl 0.9%</td><td>Bbraun</td><td>570160</td><td></td></tr><tr><td>OCT 埋め込みマトリックス 125 mL</td><td>CellPath</td><td>KMA-0100-00A</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>フィッシャー サイエンティフィ</td>ック <td>10342243</td><td></td></tr><tr><td>PBS 1%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4474</td><td></td></tr><tr><td>PenStrep</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Petridish 150mm</td><td>Sarstedt</td><td>83.1803</td><td></td></tr><tr><td>Phalloidin-iFluor 488 試薬</td><td>Abcam</td><td>ab176753</td><td></td></tr><tr><td>滅菌シリンジ 20 mL ルアー</td><td>HENKE-JECT</td><td>5200-000V0</td><td></td></tr><tr><td>滅菌シリンジ 30 mL ルアーロック</td><td>BD</td><td>10521</td><td></td></tr><tr><td>ヒト血漿</td><td>由来トロンビンSigma-Aldrich</td><td>T6884-100UN</td><td></td></tr><tr><td>トラネキサム酸</td><td>オルファ スイス</td><td>6837093</td><td></td></tr><tr><td>チューリップフィルター 1.2</td><td>レンシオン サージカル</td><td>ATLLLL</td><td></td></tr><tr><td>チューリップフィルター 1.4</td><td>レンシオン サージカル</td><td>ATLLLL</td><td></td></tr></tbody></table>

機械的に単離されたstromal vascular画分およびfibrinのヒドロゲルの組合せ:処理のプロトコール

The Combination of Mechanically Isolated Stromal Vascular Fraction and Fibrin Hydrogel: A Processing Protocol

レサズリンアッセイ まず、mSVF細胞の in vitro 細胞生存率を調べました。この目的のために、0日目、3日目、7日目にレサズリン細胞生存率アッセイを実施しました。合計4つのサンプルのうち、0日目、3日目、7日目の細胞生存率を 図1に示します。0 日目の値はベースラインとして機能し、100% に設定されました。3日目には、ポジティブコントロール(mSVF)は78.92%(±5.33%)とわずかに減少しましたが、mSVF-フィブリンハイドロゲルの組み合わせは96.48%(±1.89%)にとどまりました。7日目にも同様の傾向が見られ、mSVFは77.46%(±3.90%)を測定し、mSVFとフィブリンハイドロゲルの組み合わせは109.02%(±8.92%)で一定にとどまりました。対応のないt検定で3日目と7日目に得られた両方の値をウェルチ補正と比較したところ、統計的に有意な差は認められませんでした(p ≥ 0.05)。
組織学<b...

機械的に単離されたStromal Vascular画分およびFibrinのヒドロゲルの組合せ:処理のプロトコール

The regenerative potential of adipose-derived stromal cells (ASCs) has gained significant attention in regenerative and translational research. In the ...

the-combination-mechanically-isolated-stromal-vascular-fraction

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Medicine

医学

我々は、新生児の心筋細胞と組織工学のためのフィブリンハイドロゲルの構造でカプセル化するための細胞の調製の分離を説明します。我々は、電気刺激と細胞の生存および免疫組織染色により発生する活性力を含む培養期間後に心筋培養組織を分析するための方法を説明します。...

心臓組織工学のためのフィブリンゲルにおける心筋細胞のカプセル化

この作品の詳細3Dフィブリンの調製は、培養およびplutipotent幹細胞を区別するための足場。このような足場は、同様の薬物送達システムを含むように修正された幹細胞の挙動に及ぼす種々の生物学的化合物の作用をスクリーニングするために使用することができます。...

幹細胞培養アプリケーションのための3Dフィブリン足場の調製

このプロトコルは、その周囲の細胞外マトリックスからヒントを得るために、複数の表現型に分化するよう誘導される幹細胞の固有の能力を活用に焦点を当てています。このメソッドの原稿は、同時に脂肪由来幹細胞を共区別するために、PEG-フィブリンおよびコラーゲンから成る二層ハイドロゲルを利用したモデルでは、我々の説明とその特性を拡張する...

ASCの分化を制御するための二層ゲルをエンジニアリング

時間経過顕微鏡と画像処理技術は、48時間の期間にわたって環境制御バイオリアクターにおける線維芽細胞媒介ゲル圧縮およびフィブリン線維再調整を観察し、分析するために使用された。...

線維芽細胞媒介フィブリンゲル圧縮の観察と定量

このモデルシステムは、非破壊における内因性コラーゲン（再）組織実時間を研究するために使用することができる筋線維芽細胞にポピュレートフィブリンゲルから始まる。モデル系は、それが別のセルソース、媒体添加剤と共に使用することができるように、非常に可変であり、特定のニーズに容易に適合させることができる。...

エンジニアリングフィブリンベースの組織の筋線維芽細胞と制約の適用からの構築と細胞とコラーゲン（再）組織を誘導するためにひずみ

複雑な組織の高度に組織化された構造を作成するためには、複数の材料と細胞タイプを統合された複合材料に組み立てる必要があります。...

組織工学：層状細胞シートの送達のための多細胞3D足場の構築

プロトコルでは、回転楕円体の perfusable...

マイクロ流体デバイスにおける組織モデルと perfusable の血管ネットワーク

提示された方法は、ライブ共焦点顕微鏡を可能にしながら、シリコーンゴムに埋め込まれた3Dソフトヒドロゲルの単軸ストレッチを含む。繊維のアライメントと同様に、外部および内部ヒドロゲル株の特性評価が実証されている。開発された装置およびプロトコルはさまざまなひずみのレジームに対する細胞の応答を査定できる。...

ライブ顕微鏡イメージング下での3Dヒドロゲルの制御株

ここでは、マイクロマシンマイクロ流体プラットフォームを用いて、3次元の簡易および未分化皮膚モデルを生成するプロトコルを提示する。平行流アプローチは上の上の上皮細胞の播種のための真皮のコンパートメントの その場の 堆積を可能にし、すべてシリンジポンプによって制御される。...

マイクロマシンマイクロ流体プラットフォームにおける簡単な3次元スキンオンチップモデルの生成

ウサギの角膜間質創傷修復のための現場ブルーライト交差ゲラチンリボフラビンハイドロゲルの調製、濃縮、適用に関する再現可能なプロトコルを提示し、手術的取り扱い、部分的な足蘠切除術、術後ケアの手技手順を含みます。...

ウサギの角膜創傷修復のための強化光交連ゲラチン–リボフラビンハイドロゲルの製造および外科的応用

学ぶ機械的単離したstromal vascular画分とフィブリンヒドロゲルを組み合わせた創傷治癒促進法。脂肪組織由来の自己細胞を用い、処理時間短縮と汚染リスク低減を実現する革新的な再生医療アプローチです。

機械的に単離されたStromal Vascular画分およびFibrinのヒドロゲルの組合せ:処理のプロトコール

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