Name: 腸-脳神経コミュニケーションのリアルタイム解析:腸管グルコース刺激に応答した皮質ワイドカルシウムダイナミクス (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-29T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: 学ぶ腸-脳神経コミュニケーションのリアルタイム解析法。マウスを用いた低侵襲カテーテル固定術と皮質カルシウムダイナミクスイメージングにより、グルコース刺激応答性の神経活動変化を可視化する革新的アプローチです。

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すべての実験プロトコルは、日本のお茶の水大学の施設動物管理および使用委員会によって承認されました(動物研究プロトコル22017)。すべての動物実験は、「学術研究機関における動物実験等適正な実施に関する基本ガイドライン」(文部科学省)に準拠したお茶の水女子大学の動物実験ガイドラインに従って実施されました。使用する動物の数を最小限に抑えるための努力が払われました。この研究は、ARRIVEガイドラインに準拠して実施されました。
1. トランスジェニックマウスの作製
<ol>
	<li>この実験を行うには、成体の雄と雌のBAC GLT-1-G-CaMP7 #817トランスジェニックマウス系統、すなわち24.25匹(8週齢)のマウスG7NG817使用します。G7NG817マウス25の背景系統はC57BL/6Jである。</li>
	<li>マウスを12時間/12時間の明暗サイクルで飼育し、最大5匹のマウスのグループで育てます。</li>
</ol>
2. カテーテルの作成
<ol>
	<li>はさみを使用して、シリコンチューブ(内径0.5 mm、外径1.0 mm)を正確な長さ7 cmに調整します(図1A-a)。 注:手順の前に、はさみとシリコンチューブを滅菌しました。</li>
	<li>小さなプラスチックビーズ(内径3 mm、外径5 mm)をテーラードチューブに接着し、それらが末端から3 mmの位置にあることを確認します(図1A-b)。シアノアクリレート接着剤を使用してビーズをしっかりと貼り付けます(医療用または標準的なバリエーションでも可)。</li>
	<li>23 Gの針の頂点を切除し、続いて針先から1.5 cm切り取ります(図1A-c)。</li>
	<li>ステップ2.3で切片化された23Gの針を、ビーズが固定されている場所とは反対側のシリコンチューブの端部に導入します(図1A-d)。</li>
</ol>
3. インジェクターの作成
<ol>
	<li>滅菌ペンチを使用して、針先から1cmを切り取ります(図1B-a)。 注意: 切断された端のオリフィスが完全性を保持し、歪みが注入溶液の流れを妨げる可能性があるため、変形しないことを確認してください。</li>
	<li>ステップ 3.1.1 の適合した 23 G 注射針を 2.5 mL シリンジに結合します (図 1B-b)。</li>
	<li>シリコンチューブを必要な長さ(この実験では15cmのシリコンチューブ)にセグメント化し、23Gの注射針(図1B-c)にかぶせます。 注:分注される溶液の量は、チューブの長さに基づいて変動します。例えば、15 cmのチューブでは、約50 μLの溶液が実験後も残ります。</li>
	<li>23Gの注射針を針先から1.5cm切断します。</li>
	<li>ステップ3.4で切片化した部分を、ステップ3.3で作製したシリコンカテーテルと接合します(図1B-d)。 注意: 手順3.1および3.4で作成したオリフィスが、切開後に歪まないことを確認してください。修正が必要な場合は、ペンチを使用して円形の構成を復元します。</li>
</ol>
4. 胃の局在化
<ol>
	<li>指定されたチャンバーで3.0%イソフルラン吸入を介してマウスに麻酔を投与します。眼の乾燥を防ぐために眼科用軟膏を塗布します。</li>
	<li>麻酔をかけたマウスを吸入室から手術台に繊細に移し、マウスの麻酔状態を確認します。手順全体を通して熱サポートを提供します。</li>
	<li>マウス仰臥位を寝かせ、その口を吸入装置に近づけ、イソフルラン濃度を3.0%から2.0%に調節します。 注:イソフルランマスクの下セグメントをその優れた対応物から外し、分離したマスク(上部セグメント)を粘着テープを使用して手術台に固定します。.</li>
	<li>マウスの口腔、前肢、後肢を粘着テープを使用して手術台に補います。 注意:マウスをテーブルに固定することにより、マウスが麻酔をかけられていても、動きによる手術ミスを防ぐことができます。</li>
	<li>脱毛クリームを使用して、マウスの左上腹部(手術部位の周囲の150%)からマウスの毛を取り除きます。手術部位に局所鎮痛剤を局所的に塗布し、5分間待ってから進行します。</li>
	<li>腹部の皮膚に局所麻酔ジェルを塗布し、5〜10分待ちます。次に、ヨードフォアと70%エタノールを交互に繰り返して手術部位を3回消毒します。つま先をつまんで麻酔の深さを確認し、動物を滅菌外科用ドレープで覆います。腹部中央値の右側1 cm、剣状突起の5 mm下に、長さ約1.5 cmの皮膚切開を行います(図1C-b)。次に、最初の皮膚切開と同じ位置の腹壁に1.5cmの切開を作成します。 注意: 基礎となる肝臓に害を及ぼさないように注意してください。</li>
	<li>鈍い鉗子を使用して左肝葉を横方向に繊細に再配置し、その下の胃を明らかにします。</li>
</ol>
5. カテーテル挿入
<ol>
	<li>胃を持ち上げ、切開部から慎重に胃を抜く。 注意: 隣接する臓器、特に肝臓の完全性を維持するために細心の注意を払い、胃に過度の力を加えることを控えてください。</li>
	<li>はさみを使用して、幽門前庭に小さな穿孔(直径約1.5mm)を作成します。</li>
	<li>カテーテルの末端を穿孔に挿入し、ビードが幽門前庭に直接接触していることを確認します。 注:カテーテルは、挿入前に0.1〜0.5%グルコン酸クロルヘキシジン溶液で消毒されます。</li>
	<li>カテーテルのビードを、医療グレードのシアノアクリレート接着剤を使用して胃に接着します。 注:胃が周囲の臓器に付着していないことを確認してください。</li>
	<li>カテーテルが胃にしっかりと取り付けられていることを確認してから、胃を左肝葉の下の本来の位置に繊細に再配置します。</li>
	<li>腹壁を縫合し、ポリジオキサノン(PDS)縫合糸を使用してカテーテルを外部に伸ばします。その後、腹部閉鎖に類似した方法で皮膚切開を閉じます。</li>
	<li>マウスを消毒されたケージにそっと再配置します。 注:術後マウスは単独で飼育する必要があります。創傷閉鎖に局所鎮痛剤を局所的に適用し、地域の施設ガイドラインで推奨されている鎮痛計画に従ってください。</li>
	<li>標準環境で 48 時間の最小復旧期間を許可します。 注:マウスの胃に挿入されたカテーテルの一端は、異物の侵入を防ぎ、噛むのを防ぐために、先端が密閉された23G針で閉じられています。腹部から突き出ているカテーテルが短いため、マウスが寝具に引きずり込まれて開いたり絡まったりするのを防ぎます。</li>
</ol>
6. in vivo 経頭蓋Ca2+ イメージングの調製
<ol>
	<li>イソフルランを使用してマウスに麻酔を投与します(2%の誘導;0.8%から1.0%の間の維持)。</li>
	<li>補助イヤーバーを使用してマウスを定位固定装置プラットフォームに固定し、脈動と呼吸の影響を軽減します。続いて、マウスを蛍光実体顕微鏡下に置きます。</li>
	<li>広帯域青色蛍光フィルターセット(460-490nmで励起、520nmで発光)と水銀光源を組み合わせて使用します。</li>
	<li>カメラで撮影し、指定の撮像ソフトで現像します。</li>
	<li>電気シェーバーまたは脱毛クリームを使用して、頭皮から髪を慎重に取り除きます。 注意: かみそりを使用する場合は、完全に消毒されていることを確認し、皮膚を切らないように注意してください。</li>
	<li>綿棒または同様のツールを使用して、0.1〜0.5%に希釈したグルコン酸クロルヘキシジンの溶液で頭皮の表面を消毒します。次に、アルコールで消毒し、この交互のラウンドを3回繰り返します。</li>
	<li>局所麻酔ジェルを塗布し、5〜10分待ちます。</li>
	<li>歯科用アクリルセメントを塗布する準備をします。<ol>
		<li>滅菌メスの刃を使用して頭皮を切断します。頭皮を完全に取り除くか、後頭部から額までまっすぐに切り込みを入れます。</li>
		<li>クリップを使用して、余分な皮膚を伸ばすことで頭蓋骨を露出させます。</li>
		<li>綿棒を使用して、骨膜の結合組織を取り除きます。</li>
		<li>骨膜を取り除いた後、すぐにアクリルセメントを塗布します。露出した骨からの蒸発により頭蓋骨の表面が不透明になるのを防ぐために迅速に行動します。</li>
		<li>セメントが乾くまで約5分待ちます。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
7. 十二指腸内グルコース投与による経頭蓋Ca2+ イメージング
<ol>
	<li>実験溶液と生理食塩水の両方を周囲温度まで平衡化します。マウスに指定された期間(例:2時間)の食事制限を課します。</li>
	<li>注射を開始する前に、~0.03 mLの生理食塩水を使用してマウス側カテーテル内の残留物をすべてパージします。</li>
	<li>実験溶液(例えば、300 μL の水で調製した 10% グルコース溶液にさらに 300 μL の水を加えた溶液)をシリンジに吸引し、カテーテルにインターフェースします。特定の実験目的に合わせた溶液の最適な投与量を確認します。 注:この段階では、マウスの内部解剖学的構造を危険にさらす可能性のあるカテーテルへの過度の負担を防ぐために注意を払ってください。マウス側のチューブを最大限の優しさで操作するよう努めてください。さらに、閉じ込められた空気や気泡が胃腸の膨満を誘発する可能性があるため、シリンジに溶液後の吸引後に空気が入らないようにしてください。</li>
	<li>マウスの生理状態を評価し、ソフトウェアアプリケーションの 記録処理 ボタンをクリックして、イメージングソフトウェアの記録機能をアクティブにします。</li>
	<li>512 x 512 ピクセルの解像度、16 ビット深度、10 Hz のフレーム レートで画像をキャプチャします。 注:記録パラメータは、特定の実験要件に合わせて調整できます。</li>
	<li>自発的なデータ(例:50 s)を取得し、その後、実験に合わせた速度(ここでは0.035 mL/s)で実験溶液を徐々に注入します。 注: 実験の最後に、マウスはイソフルラン麻酔下で頸部脱臼によって速やかに安楽死されます。</li>
</ol>
8. 画像データの処理と分析
<ol>
	<li>画像データを 64 x 64 ピクセルにビンします。</li>
	<li>ImageJ を使用して手描きの関心領域 (ROI) を決定します。マウス脳アトラスを参照して、ROIを前頭野(M2)、バレルを含む体性感覚野(Somato)、後頭野(Visual)、および後脾臓領域(RSC)として指定します。</li>
	<li>MATLAB 関数 ReadImageJROI を使用して、ROI に対応する座標を抽出します。提供されているリンクからMATLAB関数にアクセスします:https://jp.mathworks.com/matlabcentral/fileexchange/32479-readimagejroi</li>
	<li>MATLAB を使用して、ROI 内の蛍光強度の平均変化率を計算します。<ol>
		<li>蛍光強度変化率 (ΔF/F) を式 (1) で定義します。 
		<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65902/65902eq01.jpg" style="margin: auto;">(1) ここで、Ftは特定の時間における蛍光強度値を表し、記録開始から注入開始までの50秒までの平均強度値はF0として表されます。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>注射液が臓器に到達するまでの遅延を考慮します。注入後 3 秒間の平均強度値をベースラインとして使用します。ベースライン強度値 + 1 SD を超えるターゲット波形は、注入後 3 秒以降に発生した場合に解析します。</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>マウスの経頭蓋カルシウムイメージングによる脳腸間相互作用の研究

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<li>Zukerman, S., Ackroff, K., Sclafani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-oral+glucose+stimulation+of+intake+and+conditioned+flavor+preference+in+C57BL%2F6J+mice%3A+A+concentration-response+study%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Post-oral glucose stimulation of intake and conditioned flavor preference in C57BL/6J mice: A concentration-response study.</a> Physiology & Behavior. 109, 33-41 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2.5 mL テルモ シリンジ</td><td>テルモ</td><td>ss-02Sz</td><td></td></tr><tr><td>23 G 注射針</td><td>テルモ</td><td>4987350390691</td><td></td></tr><tr><td>麻酔薬 (イソフルラン吸入液)</td><td>ビアトリス</td><td>871119</td><td></td></tr><tr><td>綿棒</td><td></td><td></td><td>地元企業</td></tr><tr><td>シアノアクリレート接着剤 (アロンアルファ A)</td><td>東亞合成</td><td>7990700Q1022</td><td></td></tr><tr><td>歯科アクリルセメント C&B&nbsp;</td><td>サンメディカル&nbsp;</td><td>221AABZX00115000</td><td></td></tr>脱<tr><td>毛クリーム</td>クラ<td>シエ</td><td></td><td>地元企業</td></tr><tr><td>デジタルCMOSカメラ&nbsp;</td><td>浜松ホトニクス&nbsp;</td><td>オルカスパーク</td><td></td></tr><tr><td>イヤーバー</td><td>ナリシゲ</td><td>EB-5N</td><td></td></tr><tr><td>フィルターセット (U-MWB2)</td><td>エビデント</td><td>U-MWB2&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>ファインハサミ</td><td>ファインディシェンスツール</td><td>14040-10</td><td></td></tr><tr><td>G7NG817マウス</td><td>理研BRC</td><td>RBRC09650</td><td></td></tr><tr><td>イメージソフト</td><td>浜松ホトニクス&nbsp;</td><td>HC画像ソフト</td><td></td></tr><tr><td>イソフルランバポライザー</td><td>shinanoseisakusyo</td><td>SN-487-0T</td><td></td></tr><tr><td>光源 (U-HGLGPS)</td><td>Evident</td><td>U-HGLGPS</td><td></td></tr><tr><td>顕微鏡 (MVX10)</td><td>Evident</td><td></td><td></td></tr><tr><td>プラスチックビーズ (内径3mm、外径5mm)</td><td></td><td></td><td>現地企業</td></tr><tr><td>プライヤー</td><td></td><td></td><td>地元企業</td></tr><tr><td>ポリジオキサノン縫合糸、モノジオックス</td><td>アルフレッサ・ファーマ</td><td>HR1305MV45-KF2R</td><td>この吸収性モノフィラメントPDS縫合糸は、外科的切開を閉じるために使用されます</td></tr><tr><td>丸みを帯びた鉗子</td><td>F.S.T.&nbsp;</td><td>11617-12</td><td></td></tr><tr><td>生理食塩水</td><td>大塚製薬工場</td><td>35061311</td><td></td></tr><tr><td>シリコンチューブ(内径0.5mm、外径1.0mm)</td><td>AS ONE&nbsp;CORPORATIO</td><td>33151413</td><td>地元企業</td></tr><tr><td>小型手術針</td><td>夏目製作所</td><td></td><td></td>AC03DNT</tr><tr><td>定位固定装置用ステージ</td><td>ナリシゲ</td><td>MA-6N</td><td></td></tr><tr><td>キシロカインゼリー 2%</td><td>サンド(株)</td><td>614429303</td><td>手術の痛みを緩和するための局所鎮痛剤として使用されるゼリーです</td></tr></tbody></table>

腸-脳神経コミュニケーションのリアルタイム解析:腸管グルコース刺激に応答した皮質ワイドカルシウムダイナミクス

Real-time Analysis of Gut-brain Neural Communication: Cortex wide Calcium Dynamics in Response to Intestinal Glucose Stimulation

イソフルラン麻酔G7NG817マウスによる経頭蓋皮質ワイドCa2+ イメージング カテーテルは、図1に示す手順に従って作成しました。胃の位置を慎重に特定した後、その位置にカテーテルを取り付けました(図1)。カテーテル挿入後の十分な回復時間(約48時間)を考慮した後、軽度のイソフルラン麻酔下(0.8-1.0%)で自発神経活動を測定し、その後の腸刺激観察のためのベースライン蛍光強度変化を確立しました。その結果、皮質全体に広がるランダムなCa2+振動パターンを確認しました(図2A)。図2は、事前にカテーテルを挿入した状態での自発的な脳活動の代表的な例を示しています。注入後の M2 領域で最初に観測可能な Ca2+ 過渡ピークの時間を 0.0 秒と定義しました。疑似カラー表現では、この Ca2+ トランジェントのピークを最大値として表示し、平均値に 1 標準偏差 (1 SD) を加えた値を最小値として表示しました。左半球と右半球がすべての領域で同期した活動を示していることは明らかでした。
次に、各機能領域内の波を特徴付けるためのROIを確立しました。 図2Bに示すように、 各ROIの蛍光強度率の時間的変化 を示しました(図2B)。これらの観測された表面Ca2+ 振動は、バースト抑制パターンに従い、低活性の期間と高振幅の蛍光変化を交互に繰り返しました。この活動パターンは、皮質表面EEGとCa2+ ダイナミクス26を同時に測定した以前の知見と一致しています。
抑制状態とバースト状態の間の全球的または局所的な表面Ca2+の変動にもかかわらず、カルシウムの急増を開始する特定の皮質領域は異なる場合があります。以前に報告されたように、信号が局所的な皮質領域を刺激すると、その領域は活性化すると予想され、その後、皮質状態27,28の全体的なシフトを駆動する。
胃内グルコース注射後の皮質Ca2+ ダイナミクスの変化 次に、グルコースや水の投与が皮質活動にどのような影響を与えるのかを解明するために、注射中および注射後の皮質全体のCa2+ダイナミクスをモニタリングしました。その結果、胃内グルコース注射後の皮質Ca2+ダイナミクスの変化が見出されました。皮質活性化の多様な領域で示される自発的な活動とは対照的に、カテーテルを介してグルコースを直接腸に注入すると、前頭前野または二次運動皮質(M2)での即時活性化が観察されましたが、これは胃水注入では誘発されない効果です(図3A-C)。さらに、これらの一過性の顕著なCa2+イベントは、胃内グルコース注射後約10秒にわたって連続して発生する傾向があることが観察されました。このような持続的な現象は、水を投与したときには明らかになりませんでした(図3D-F)。
各ROIにおけるCa2+ イベントは、グルコース投与の完了後4〜8秒以内に発生する最初のピークで、聴覚皮質(参照)を参照として使用して、蛍光強度変化率の比率を計算することによって特徴付けられました。その結果、注入前後の聴覚皮質を基準にM2領域での反応を比較した上で、グルコースを注入した際に有意な変化が観察されました。
対照的に、水を注入した場合、そのような変化は観察されませんでした(図3G、水N=7:注射前、2.38±2.53対2.05±1.84、p &gt; 0.05;グルコースN = 7:注射前、2.48 ± 0.97 vs. 3.76 ± 2.76、p &lt; 0.01、Wilcoxon符号順位検定)。次に、各皮質領域における活性化レベルを注射後と注射前の値の比で定義すると、M2領域のみで有意差が認められた(図3H、M2:0.92 ± 0.89対1.30 ± 0.32、p = 0.006;ソマト: 0.95 ± 0.076 対 1.04 ± 0.13, p = 0.27;ビジュアル: 0.92 ± 0.3 対 1.00 ± 0.06、p = 0.89;RSC: 0.97 ± 0.27 対 1.10 ± 0.27、p = 0.60、 t検定)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65902/65902fig01.jpg"> 
図1:方法の概要 (A)カテーテルの作成:(a)シリコンチューブを切断します。(b)医療用シアノアクリレート接着剤を使用して、シリコンチューブにプラスチックビーズを貼り付けます。(c)23Gの針を先端から1.5cm切り取ります。(d)針の切断端をシリコンチューブに取り付けます。(b)インジェクターアセンブリ:(a)23Gの注射針を1cmトリミングします(b)トリミングした注射針を2.5mLの注射器に接続します。.(c)注射針の切断部分をシリコンチューブで覆います。(d)23Gの針を先端から1.5cmカットします。(e)針の切断端をシリコンチューブに取り付けます。(C)外科的処置:(a)手術部位を脱毛します。(b)皮膚と腹壁を約1.5cmの長さに切開します。(c)ハサミで幽門前道に小さな穿孔(直径約1.5mm)をあけ、カテーテル(シリコンチューブ)を挿入します。医療用シアノアクリレート接着剤を使用してカテーテルを幽門前庭に固定します。(d)5/0シルク縫合材と針を使用して腹壁と皮膚を縫います。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65902/65902fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65902/65902fig02.jpg"> 
図2:カテーテルを装着したマウスにおける皮質幅の自発的なCa2+振動G7NG817(A)0.2秒間隔で表示された皮質幅のCa2+振動の代表的な例。蛍光強度の変化は、疑似カラーオーバーレイで表されます。B の破線で囲まれたタイム ウィンドウは、最初に出現する Ca2+ トランジェントを示しており、そのピークは時間 0 に設定されています。擬似カラー表現では、その Ca2+ トランジェントのピークを最大値として使用し、平均 +1 SD を最小値として使用します。(B)例の各ROIの蛍光強度の時系列変化。線の色はさまざまな皮質領域に対応しています:赤はM2を表します。マゼンタは体性感覚野(ソマト)を表します。青は視覚領域(ビジュアル)を表します。緑はレトロな脾臓の領域を表しています。サーモン色の帯は注入時間を示しています。(C)破線のアウトライン内の単一のピークが分離され、拡大図で表示されます。略語:SD =標準偏差;ROI = 関心領域RSC = レトロ脾臓領域。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65902/65902fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65902/65902fig03.jpg"> 
図3:グルコースまたは水の注入中/注入後のCortexワイドCa2+ 応答。 (A)0.2秒間隔で示したグルコース投与の代表例。蛍光強度の変化は、疑似カラーオーバーレイで表されます。 B の破線で囲まれた時間ウィンドウは、注入後に最初に現れる Ca2+ トランジェントを示しており、そのピークは時間 0 に設定されています。疑似カラー表現は、注入後の最初の Ca2+ トランジェントのピークを最大値とし、平均 +1 SD を最小値として基づいています。(B)例の各ROIの蛍光強度の時系列変化。線の色はさまざまな皮質領域に対応しており、赤はM2、マゼンタは体性感覚領域(Somato)、青は視覚領域(Visual)、緑はレトロな脾臓領域を表しています。(C)破線のアウトライン内の単一のピークが分離され、拡大図で表示されます。ターゲットカルシウム波の分析は、注入後4〜8秒以内に現れた最も早い波です。(D)血糖コントロールデータとしての水注入の代表例。(E)例の各ROIの蛍光強度の時系列変化。線の色は Bと同じです。(F)破線のアウトライン内の単一のピークが分離され、拡大図で表示されます。ターゲットカルシウム波の分析は、注入後4〜8秒以内に現れた最も早い波です。(G)M2の自発活動(注入前)と注入後の反応(注入)の比較。平均蛍光強度は注入前の50秒にわたって変化し、聴皮質を基準として、注射後4秒から8秒後のM2領域のピーク応答を計算しました。(H)水またはグルコースが投与されたときの各皮質領域の活性化レベルの比較。注入後と注入前の値の比率は、 Gで決定され、各領域について計算されました。N.S. は非有意 (p &gt; 0.05) を表します。** &lt;0.01.エラーバーは、平均の標準誤差として定義されます。略語:SD =標準偏差;ROI = 関心領域RSC = レトロ脾臓領域。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65902/65902fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

Communication between the gastrointestinal tract and the brain after nutrient absorption plays an essential role in food preference, metabolism, and ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

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急性海馬スライスにおけるシナプス誘発アストログリアとニューロン活動の二重の電気生理学的記録

出典:Fried, D. E., Gulbransen, B. D.In Situ Ca2+ 腸神経系のイメージング J. Vis. Exp.

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