Name: 植物における典型的なトリアゾール系農薬の代謝産物の細胞毒性の評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-22T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: 学ぶ 植物カルス培養とヒト細胞系を用いたトリアゾール系農薬代謝産物の細胞毒性評価法。植物とヒトモデルを組み合わせることで、農薬代謝産物の包括的な毒性評価を実現します。

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<meta charset="utf8"></head><body>植物におけるトリアゾール系農薬の総合代謝物細胞毒性の推定

<ol><li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+of+halogenated+organic+compounds+%28HOCs%29+into+peanut+and+corn+during+the+whole+life+cycle+grown+in+an+agricultural+field%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Uptake of halogenated organic compounds (HOCs) into peanut and corn during the whole life cycle grown in an agricultural field.</a> Environ Pollut. 263, 114400(2020).</li>
<li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trace+metals+in+e-waste+lead+to+serious+health+risk+through+consumption+of+rice+growing+near+an+abandoned+e-waste+recycling+site%3A+Comparisons+with+PBDEs+and+AHFRs%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Trace metals in e-waste lead to serious health risk through consumption of rice growing near an abandoned e-waste recycling site: Comparisons with PBDEs and AHFRs.</a> Environ Pollut. 247, 46-54 (2019).</li>
<li>Liu, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tetrabromobisphenol-A%2FS+and+nine+novel+analogs+in+biological+samples+from+the+Chinese+Bohai+Sea%3A+Implications+for+trophic+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Tetrabromobisphenol-A/S and nine novel analogs in biological samples from the Chinese Bohai Sea: Implications for trophic transfer.</a> Environ Sci Technol. 50 (8), 4203-4211 (2016).</li>
<li>Awasthi, A. K., Zeng, X., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+pollution+of+electronic+waste+recycling+in+India%3A+A+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Environmental pollution of electronic waste recycling in India: A critical review.</a> Environ Pollut. 211, 259-270 (2016).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+accumulation+and+transformation+of+brominated+and+organophosphate+flame+retardants%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Plant accumulation and transformation of brominated and organophosphate flame retardants: A review.</a> Environ Pollut. 288, 117742(2021).</li>
<li>Sandermann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+plant+metabolism+of+xenobiotics%3A+the+%27green+liver%27+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogenetics%22%5BJournal%5D)">Higher plant metabolism of xenobiotics: the 'green liver' concept.</a> Pharmacogenetics. 4, 225-241 (1994).</li>
<li>Zhang, J. J., Yang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolism+and+detoxification+of+pesticides+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Metabolism and detoxification of pesticides in plants.</a> Sci Total Environ. 790, 148034(2021).</li>
<li>Debenest, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecotoxicity+of+a+brominated+flame+retardant+%28tetrabromobisphenol+A%29+and+its+derivatives+to+aquatic+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Phys+C%22%5BJournal%5D)">Ecotoxicity of a brominated flame retardant (tetrabromobisphenol A) and its derivatives to aquatic organisms.</a> Comp Biochem Phys C. 152 (4), 407-412 (2010).</li>
<li>McCormick, J. M., Van Es, T., Cooper, K. R., White, L. A., Haggblom, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbially+mediated+O-methylation+of+bisphenol+A+results+in+metabolites+with+increased+toxicity+to+the+developing+zebrafish+%28Danio+rerio%29+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microbially mediated O-methylation of bisphenol A results in metabolites with increased toxicity to the developing zebrafish (Danio rerio) embryo.</a> Environ Sci Technol. 45 (15), 6567-6574 (2011).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+metabolic+pathways+of+2%2C4%2C6-tribromophenol+in+rice+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Multiple metabolic pathways of 2,4,6-tribromophenol in rice plants.</a> Environ Sci Technol. 53 (13), 7473-7482 (2019).</li>
<li>Hou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycosylation+of+tetrabromobisphenol+A+in+pumpkin%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Glycosylation of tetrabromobisphenol A in pumpkin.</a> Environ Sci Technol. 53 (15), 8805-8812 (2019).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidating+the+metabolism+of+2%2C4-Dibromophenol+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Elucidating the metabolism of 2,4-Dibromophenol in plants.</a> J Vis Exp. (192), e65089(2023).</li>
<li>Zucco, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Inter-laboratory+study+to+evaluate+the+effects+of+medium+composition+on+the+differentiation+and+barrier+function+of+Caco-2+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Atla-Altern+Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">An Inter-laboratory study to evaluate the effects of medium composition on the differentiation and barrier function of Caco-2 cell lines.</a> Atla-Altern Lab Anim. 33, 603-618 (2005).</li>
<li>Eisenbrand, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+in+vitro+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methods of in vitro toxicology.</a> Food Chem Toxicol. 40, 193-236 (2002).</li>
<li>Sambuy, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Caco-2+cell+line+as+a+model+of+the+intestinal+barrier%3A+influence+of+cell+and+culture-related+factors+on+Caco-2+cell+functional+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The Caco-2 cell line as a model of the intestinal barrier: influence of cell and culture-related factors on Caco-2 cell functional characteristics.</a> Cell Biol Toxicol. 21, 1-26 (2005).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake%2C+translocation%2C+and+subcellular+distribution+of+three+triazole+pesticides+in+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Pollut+Res%22%5BJournal%5D)">Uptake, translocation, and subcellular distribution of three triazole pesticides in rice.</a> Environ Sci Pollut Res. 29 (17), 25581-25590 (2022).</li>
<li>Satapute, P., Kamble, M. V., Adhikari, S. S., Jogaiah, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+triazole+pesticides+on+tillage+soil+microbial+populations+and+metabolic+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Influence of triazole pesticides on tillage soil microbial populations and metabolic changes.</a> Sci Total Environ. 651, 2334-2344 (2019).</li>
<li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+possible+but+unrecognized+risk+of+acceptable+daily+intake+dose+triazole+pesticides+exposure-bile+acid+disturbance+induced+pharmacokinetic+changes+of+oral+medication%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">A possible but unrecognized risk of acceptable daily intake dose triazole pesticides exposure-bile acid disturbance induced pharmacokinetic changes of oral medication.</a> Chemosphere. 322, 138209(2023).</li>
<li>Louis, K. S., Siegel, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+analysis+using+trypan+blue%3A+manual+and+automated+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods.</a> Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,4-ジクロロフェノキシ酢酸</td><td>和光</td><td>1 mg/L</td><td></td></tr><tr><td>20% H2O2</sub</td><td>>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>10011218-500ML</td><td></td></tr><tr><td>6-ベンジルアミノプリン</td><td>WAKO</td><td>0.5 mg/L</td><td></td></tr><tr><td>75% エタノール</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>1269101-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>96ウェルプレート</td><td>サーモフィッシャー</td><td></td><td></td></tr><tr><td>アセトニトリル</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>人工気候インキュベーター</td><td>寧波東南実験装置有限公司</td><td>RDN-1000A-4</td><td></td></tr><tr><td>オートクレーブ</td><td>STIK</td><td>MJシリーズ</td><td></td></tr><tr><td>Caco-2細胞</td><td>Nuoyang Biotechnology Co.,Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CCK8試薬</td><td>南京Jianchengバイオエンジニアリング研究所、</td><td>中国G021-1-3</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機</td><td>サーモフィッシャーCO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2インキュベータ</td><td>ーLabtrip</td><td>HWJ-3-160</td><td></td></tr>ジ<tr><td>メチルスルホキシド</td><td>Solarbio</td>ライフサイエンス<td>D8371</td><td></td></tr><tr><td>ジニコナゾール、98.7%</td><td>J&K Scientific</td><td>83657-24-3</td><td></td></tr><tr><td>ダルベッコの修正されたイーグルの媒体</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>11965-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>電子天秤</td><td>Shanghai Precision Instrument Co., Ltd</td><td>FA1004B</td><td></td></tr><tr><td>Cellmax</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>蛍光分光光度計</td><td>Tecan</td><td>Infinite M200</td><td></td></tr><tr><td>フルシラゾール,98.5%</td><td>(金)Kサイエンティフィック</td><td>85509-19-9&nbsp;&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>凍結乾燥機</td><td>SCIENTZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ハイスループットティッシュグラインダー</td><td>SCIENTZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>倒立顕微鏡</td><td>ライカバイオシステムズ</td><td>DMi1</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q system</td><td>ミリポア</td><td>MS1922801-4L</td><td></td></tr><tr><td>村重 &Skoog medium</td><td>HOPEBIO</td><td>HB8469-7</td><td></td></tr><tr><td>窒素ブロー濃縮器</td><td>AOSHENG</td><td>MD200-2</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>P1022-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン-ストレプトマイシン液体</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>P1400-100 mL</td><td></td></tr><tr><td>プロピコナゾール、100%</td><td>J&Kサイエンティフィック</td><td>60207-90-1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>研究プラス</td><td>エッペンドルフ</td><td>10-1000 &mu;L</td>小指ニンジン(Daucus carota var. sativus)の種子<td></td></tr><tr><td></td><td>Shouguang Seed Industry Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Shaking Incubators</td><td>Shanghai Bluepard instruments Co.,Ltd.</td><td>THZ-98AB</td><td></td></tr><tr><td>テブコナゾール 100%</td> <td>J&K Scientific</td><td>107534-96-3</td><td></td></tr><tr><td>トリプシン EDTA 溶液</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>T1300-100 mL</td><td></td></tr><tr><td>超音波装置</td><td>ZKI</td><td>UC-6</td><td></td></tr><tr><td>UV 滅菌済みスーパークリーンベンチ</td><td>AIRTECH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vortex 機器</td><td>無錫 Laipu Instrument Equipment Co., Ltd</td><td>BV-1010</td><td></td></tr></tbody></table>

植物における典型的なトリアゾール系農薬の代謝産物の細胞毒性の評価

Assessing Cytotoxicity of Metabolites of Typical Triazole Pesticides in Plants

図1 は、ニンジンカルス中の農薬代謝産物の生成、抽出、および細胞毒性評価のための提案方法の概略図を示しています。 図2では、試験した農薬の取り込みと代謝の動態曲線から、培養培地中の農薬の濃度が指数関数的に減少したのに対し、ニンジンカルスの農薬の濃度は増加し始め、4時間または8時間でピークに達し、その後徐々に減少したことがわかります。これらの結果は、農薬がニンジンカルスによって迅速に取り込まれ、形質転換できることを示唆しています。カルス培養システムにおける農薬の時間的回収率を 図3に示します。72時間のインキュベーション後に残った農薬はわずか8.3%〜11.0%であり、ほとんどの農薬が代謝物に変換されていたことを示しています。
試験した農薬の取り込みと代謝動態(図2)によると、抽出溶液中の残留農薬親の濃度は、72時間のインキュベーション後に10 m...

Various organic pollutants have been released into the environment because of anthropogenic activities. These pollutants can be taken up by crop plants, ...

assessing-cytotoxicity-metabolites-typical-triazole-pesticides

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環境

この原稿は、除草剤の代謝率が双子葉植物の雑草から切り出された葉で効果的に定量化され、それによって変動性を減らし、全植物アッセイで一般的に観察される除草剤の取り込みまたは転座の可能性のある交絡効果を取り除く方法を説明しています。...

摘出葉のアッセイで双子葉雑草除草剤代謝の速度を測定します

未熟と大人の蚊殺虫剤、adulticides と endectocides の新しいクラスとして開発のために化学物質の毒性を評価するためのプロトコルを説明します。プロトコルは、高スループットのシングル...

蚊を殺虫化合物小説の毒性試験のプロトコル

本研究では、殺虫剤などの植物全体が取り込むことができる外部化合物の代謝を調べることができる茶(カメリア・シネンシスL.)葉に由来する細胞懸濁培養を確立するためのプロトコルを提示する。...

茶由来の新たに確立された細胞懸濁液培養における6種の全身殺虫剤の代謝に関する研究(カメリアシネンシスL.葉

多くの場合、培養細胞上の化合物のセットの潜在的な細胞毒性を評価する必要があります。ここでは、96ウェル形式で有毒化合物を確実にスクリーニングする戦略について説明する。...

低から中程度のスループットで培養哺乳動物細胞の細胞増殖と生存に影響を与える化合物を同定する戦略

このプロトコルは、細胞の生存率を効率的に決定するための、高速で高スループット、信頼性、安価、および公平なアッセイを記述します。このアッセイは、細胞のミトコンドリアが損傷し、他のアッセイに干渉する場合に特に有用である。このアッセイは、Hoechst...

マイトカン細胞毒性の正確な決定のための自動差動核染色アッセイ

ここでは、以前に合成したスピロ環式オキシムをテストするために、3-(4',5'-ジメチルチアゾール-2'-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド(MTT)を使用するバイオアッセイについて説明します。...

官能化スピロ環複素環合成および細胞毒性アッセイ

このプロトコルは、96ウェルプレートのゼブラフィッシュ胚(ZEM2S)および肝臓(ZFL)細胞株の細胞毒性の評価に適した、一般的に使用される細胞毒性アッセイ(Alamar Blue...

ゼブラフィッシュ細胞株を用いた細胞毒性アッセイ

本プロトコルは、植物中の2,4−ジブロモフェノール代謝産物を同定するための簡単で効率的な方法を記載する。...

植物における2,4-ジブロモフェノールの代謝を解明

チオフェネスルホンアミド化合物は、 ビブリオ クォーラムセンシングレギュレーターLuxR/HapRの強力で特異的な阻害剤であり、 in vivoでの活性を阻害し、病原性、運動性、およびバイオフィルムの遺伝子の転写を防ぎます。このプロトコールでは、これらの化合物がどのように合成され、 in silicoでモデル化され、in vivo...

ビブリオクォーラムセンシング阻害剤の合成とアッセイ

本プロトコルは、細菌殺菌活性モデリングと組合せ相互作用アッセイを用いて、微生物制御を改善し全体的な殺菌剤使用量を減らす相乗効果を特定することを目的とした、植物化学物質が従来の殺菌剤の殺菌効果をどのように強化できるかを評価する体系的な枠組みを提供します。...

in vitro 植物由来分子が従来の殺生物剤に与える増強効果の評価

学ぶ 植物カルス培養とヒト細胞系を用いたトリアゾール系農薬代謝産物の細胞毒性評価法。植物とヒトモデルを組み合わせることで、農薬代謝産物の包括的な毒性評価を実現します。

植物における典型的なトリアゾール系農薬の代謝産物の細胞毒性の評価

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