Epon Post Embedding 相関光電子顕微鏡
January 12th, 2024
mScarletと呼ばれる蛍光タンパク質を使用したEponの埋め込み後相関光および電子顕微鏡の詳細なプロトコルを紹介します。この方法では、蛍光と超微細構造を同時に維持できます。この技術は、さまざまな生物学的用途に適しています。
光と電子の相関顕微鏡は、完全に安定した顕微鏡技術であり、蛍光顕微鏡によって提供される局在情報を組み合わせることができ、電子顕微鏡による超構造です。しかし、この技術の考え方は、簡単な準備をした後の蛍光を維持することです。この蛍光タンパク質を用いることで、蛍光と超構造を同時に維持できる相関光と電子顕微鏡を実現することができます。
概要
この研究は、蛍光タンパク質mScarletを使用したEponポストエンベディング相関光電子顕微鏡法の詳細なプロトコルを提示しています。この方法は、蛍光と超微細構造の両方を成功裏に保存し、様々な生物学的応用に適用できることを示しています。
主要な研究要素
研究分野
- 相関光電子顕微鏡法
- 蛍光タンパク質の応用
- 顕微鏡技術
背景
- 蛍光顕微鏡と電子顕微鏡の組み合わせ
- 調製中の蛍光の保存における課題
- 強化されたイメージングのためのmScarletの使用
使用した方法
- 相関光電子顕微鏡法技術
- 生物学的モデルとしてのマウス脳組織
- EponとmScarletを使用したポストエンベディング
主要な結果
- 蛍光と超微細構造の成功的な保存
- 脳組織の詳細なイメージング
- 蛍光と電子顕微鏡信号の効果的な整列
結論
- この研究は、相関光電子顕微鏡法の信頼できる方法を示しています
- 生物学研究におけるより広範な応用の可能性を強調しています
よくある質問
Chapters in this video
0:00
Introduction
0:44
Ultrathin Sectioning for Epon Post‐Embedding Correlative Light and Electron Microscopy (CLEM)
1:33
Creating the Navigation Map for CLEM and Preparation of the Ultrathin Sections for Electron Microscopy
4:07
Image Analysis of Brightfield and Fluorescence Images of the Mouse Brain Sections for Epon Post‐Embedding Correlative Light and Electron Microscopy
6:16
Registration of the Fluorescence Microscopy Image with the Electron Microscopy Image for Correlative Light and Electron Microscopy
