Name: マウス左肺ヒラークランプモデル 肺虚血再灌流損傷 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-12T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: 学ぶ マウス左肺ヒラークランプモデルを用いた肺虚血再灌流損傷の手法。好中球とB細胞の役割を解明し、肺移植の転帰改善に向けた治療戦略の基礎を築きます。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この研究は、公共、商業、または非営利セクターの資金提供機関から特定の助成金を受けていません。

肺虚血再灌流障害の研究のためのマウスモデル

<ol><li>Bharat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+link+between+primary+graft+dysfunction+and+chronic+lung+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Immunological link between primary graft dysfunction and chronic lung allograft rejection.</a> Ann Thorac Surg. 86 (1), 189-195 (2008).</li>
<li>Daud, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+immediate+primary+lung+allograft+dysfunction+on+bronchiolitis+obliterans+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Impact of immediate primary lung allograft dysfunction on bronchiolitis obliterans syndrome.</a> Am J Respir Crit Care Med. 175 (5), 507-513 (2007).</li>
<li>Halazun, K. J., Al-Mukhtar, A., Aldouri, A., Willis, S., Ahmad, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Warm+ischemia+in+transplantation%3A+search+for+a+consensus+definition%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Warm ischemia in transplantation: search for a consensus definition.</a> Transplant Proc. 39 (5), 1329-1331 (2007).</li>
<li>Warnecke, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Warm+or+cold+ischemia+in+animal+models+of+lung+ischemia-reperfusion+injury%3A+is+there+a+difference+%5BTitle%5D)+AND+%22Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Warm or cold ischemia in animal models of lung ischemia-reperfusion injury: is there a difference .</a> Thorac Cardiovasc Surg. 52 (3), 174-179 (2004).</li>
<li>Hasenauer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+cold+or+warm+ischemia+and+ex-vivo+lung+perfusion+on+the+release+of+damage+associated+molecular+patterns+and+inflammatory+cytokines+in+experimental+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effects of cold or warm ischemia and ex-vivo lung perfusion on the release of damage associated molecular patterns and inflammatory cytokines in experimental lung transplantation.</a> J Heart Lung Transplant. 40 (9), 905-916 (2021).</li>
<li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+versus+cold+ischemic+donor+lung+preservation+on+the+underlying+mechanisms+of+injuries+during+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of warm versus cold ischemic donor lung preservation on the underlying mechanisms of injuries during ischemia and reperfusion.</a> Transplantation. 102 (5), 760-768 (2018).</li>
<li>Santos, P., Teixeira, P. J. Z., Moraes Neto, D. M., Cypel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death+and+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bras+Pneumol%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death and lung transplantation.</a> J Bras Pneumol. 48 (2), e20210369(2022).</li>
<li>Moskowitzova, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transplantation+enhances+murine+lung+viability+and+recovery+after+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transplantation enhances murine lung viability and recovery after ischemia-reperfusion injury.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 318 (1), L78-L88 (2020).</li>
<li>Nakata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+blockage+of+S100A8%2FA9+ameliorates+ischemia-reperfusion+injury+in+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Functional blockage of S100A8/A9 ameliorates ischemia-reperfusion injury in the lung.</a> Bioengineering (Basel). 9 (11), 673(2022).</li>
<li>Nakata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+anti-HMGB1+monoclonal+antibody+on+lung+ischemia+reperfusion+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Protective effects of anti-HMGB1 monoclonal antibody on lung ischemia reperfusion injury in mice.</a> Biochem Biophys Res Commun. 573, 164-170 (2021).</li>
<li>Wang, Q., Li, Y., Wu, C., Wang, T., Wu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aquaporin-1+inhibition+exacerbates+ischemia-reperfusion-induced+lung+injury+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Aquaporin-1 inhibition exacerbates ischemia-reperfusion-induced lung injury in mouse.</a> Am J Med Sci. 365 (1), 84-92 (2023).</li>
<li>Gielis, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+lung+ischemia+and+reperfusion+injury%3A+tricks+of+the+trade%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A murine model of lung ischemia and reperfusion injury: tricks of the trade.</a> J Surg Res. 194 (2), 659-666 (2015).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitogen-activated+protein+kinases+regulate+HO-1+gene+transcription+after+ischemia-reperfusion+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mitogen-activated protein kinases regulate HO-1 gene transcription after ischemia-reperfusion lung injury.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 283 (4), L815-L829 (2002).</li>
<li>Sharma, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenosine+A2A+receptor+activation+on+CD4%2B+T+lymphocytes+and+neutrophils+attenuates+lung+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Adenosine A2A receptor activation on CD4+ T lymphocytes and neutrophils attenuates lung ischemia-reperfusion injury.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 139 (2), 474-482 (2010).</li>
<li>Yang, Z., Sharma, A. K., Linden, J., Kron, I. L., Laubach, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+lymphocytes+mediate+acute+pulmonary+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">CD4+ T lymphocytes mediate acute pulmonary ischemia-reperfusion injury.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 137 (3), discussion 702 695-702 (2009).</li>
<li>Sayah, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+extracellular+traps+are+pathogenic+in+primary+graft+dysfunction+after+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Neutrophil extracellular traps are pathogenic in primary graft dysfunction after lung transplantation.</a> Am J Respir Crit Care Med. 191 (4), 455-463 (2015).</li>
<li>Okazaki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+orthotopic+vascularized+aerated+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">A mouse model of orthotopic vascularized aerated lung transplantation.</a> Am J Transplant. 6 (7), 1672-1679 (2007).</li>
<li>Hsiao, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spleen-derived+classical+monocytes+mediate+lung+ischemia-reperfusion+injury+through+IL-1beta%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Spleen-derived classical monocytes mediate lung ischemia-reperfusion injury through IL-1beta.</a> J Clin Invest. 128 (7), 2833-2847 (2018).</li>
<li>Sharma, A. K., Mulloy, D. P., Le, L. T., Laubach, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NADPH+oxidase+mediates+synergistic+effects+of+IL-17+and+TNF-alpha+on+CXCL1+expression+by+epithelial+cells+after+lung+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">NADPH oxidase mediates synergistic effects of IL-17 and TNF-alpha on CXCL1 expression by epithelial cells after lung ischemia-reperfusion.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 306 (1), L69-L79 (2014).</li>
<li>Zanotti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+critical+role+of+Toll-like+receptor+4+in+lung+ischemia-reperfusion+injury+and+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Novel critical role of Toll-like receptor 4 in lung ischemia-reperfusion injury and edema.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 297 (297), L52-L63 (2009).</li>
<li>National Research Council. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+care+and+use+of+laboratory+animals%22">Guide for the care and use of laboratory animals</a>. , The National Academies Press. Washington, DC. (2011).</li>
<li>Saito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pirfenidone+alleviates+lung+ischemia-reperfusion+injury+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Pirfenidone alleviates lung ischemia-reperfusion injury in a rat model.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 158 (1), 289-296 (2019).</li>
<li>Tanaka, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+Imatinib+on+ischemia%2Freperfusion+injury+in+rat+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effects of Imatinib on ischemia/reperfusion injury in rat lung.</a> Ann Thorac Surg. 102 (5), 1717-1724 (2016).</li>
<li>Kreisel, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+two-photon+imaging+reveals+monocyte-dependent+neutrophil+extravasation+during+pulmonary+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">In vivo two-photon imaging reveals monocyte-dependent neutrophil extravasation during pulmonary inflammation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (42), 18073-18078 (2010).</li>
<li>Koletsis, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+cooling+in+a+lung+hilar+clamping+model+of+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Biol+Med+%28Maywood%29%22%5BJournal%5D)">In situ cooling in a lung hilar clamping model of ischemia-reperfusion injury.</a> Exp Biol Med (Maywood). 231 (8), 1410-1420 (2006).</li>
<li>Hermsen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+landscape+of+rat+strain+and+substrain+variation%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Genomic landscape of rat strain and substrain variation.</a> BMC Genomics. 16 (1), 357(2015).</li>
<li>Beck, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genealogies+of+mouse+inbred+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Genealogies of mouse inbred strains.</a> Nat Genet. 24 (1), 23-25 (2000).</li>
<li>Liao, W. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+orotracheal+intubation+and+ventilated+lung+ischemia+reperfusion+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A mouse model of orotracheal intubation and ventilated lung ischemia reperfusion surgery.</a> J Vis Exp. (187), 64383(2022).</li>
<li>Murata, T., Nakazawa, H., Mori, I., Ohta, Y., Yamabayashi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reperfusion+after+a+two-hour+period+of+pulmonary+artery+occlusion+causes+pulmonary+necrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Reperfusion after a two-hour period of pulmonary artery occlusion causes pulmonary necrosis.</a> Am Rev Respir Dis. 146 (4), 1048-1053 (1992).</li>
<li>Ukita, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+animal+model+for+pulmonary+hypertension+and+right+ventricular+failure%3A+Left+pulmonary+artery+ligation+and+progressive+main+pulmonary+artery+banding+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A large animal model for pulmonary hypertension and right ventricular failure: Left pulmonary artery ligation and progressive main pulmonary artery banding in sheep.</a> J Vis Exp. (173), 62694(2021).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+right+ventricular+failure+by+pulmonary+artery+constriction+and+evaluation+of+right+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Induction of right ventricular failure by pulmonary artery constriction and evaluation of right ventricular function in mice.</a> J Vis Exp. (147), 59431(2019).</li>
<li>Welbourn, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+ischaemia+reperfusion+injury%3A+central+role+of+the+neutrophil%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of ischaemia reperfusion injury: central role of the neutrophil.</a> Br J Surg. 78 (6), 651-655 (1991).</li>
</ol>

著者らは、関連する開示を報告していない。

肺動脈と静脈、気管支を閉塞して温かい虚血を誘発し、その後再灌流する左の肺門にスリップノットを適用する肺門クランプ技術について説明します。肺門クランプ後、左肺を採取して、組織学、フローサイトメトリー、バルクまたはシングルセルシーケンシング、定量的ポリメラーゼ連鎖反応などのさまざまな実験技術を行うことができます。さらに、血液と脾臓は全身の影響を研究するために使用され、非虚血性の右肺は内部制御として機能する可能性があります。このプロトコルでは、ABG測定値を取得したり、細胞外漏出を決定したりするための詳細な方法についても説明します。
マウスの肺門クランプ技術は、肺IRIの研究および肺移植のより広い分野にとって重要です。例えば、この肺門クランプモデルを用いて、私たちのグループは、脾臓由来のCCR2+古典的単球がIRI18後の肺への好中球の血管外漏出を媒介することを発見しました。別のグループは、II型肺胞上皮細胞が、肺門クランプモデル19を使用してNADPHオキシダーゼ-IL-17-TNFα依存的にCXCL1(好中球化学誘引剤)を産生することを示しました。TLR4は、肺門クランプ20のマウスモデルで浮腫の発症に関与していることがわかりました。
同所性マウス肺移植は臨床的に適用しやすく、温虚血と冷虚血の両方をシミュレートできますが、血管および気管支の吻合による外科的外傷や、ドナーとレシピエントの不一致による同種刺激も導入します。したがって、肺門クランプ技術の主な利点は、肺 IRI の影響をこれらの他の要因から分離する能力です。さらに、経験の浅いマウス顕微外科医にとって、肺門クランプ手術は技術的にそれほど要求が厳しくなく、肺移植と比較してより迅速に習得できます。肺門クランプモデルの 1 つの制限は、低温虚血を達成するのが難しいことです。in situ冷虚血は、左肺動脈25を介した順行性フラッシュ灌流を伴うブタで行われてきましたが、これはマウスではサイズが小さく、手術中に常温症を維持する必要があるため、はるかに困難です。それにもかかわらず、孤立した温性虚血の研究は、一般的に冷性虚血4,5,6よりも臓器機能に有害であるため、重要です。さらに、移植センターはDCD肺移植をますます採用しており、従来のDBD肺移植よりもはるかに長い温存虚血時間を伴います7。したがって、温性虚血とその後の再灌流期間中のイベントの詳細な研究は非常に重要であり、この肺門クランプモデルで達成できます。
肺門クランプ技術の多くのバリエーションは、過去数十年にわたって作成されてきました。これらには、非外傷性微小血管クランプ8,9,10,11,12,13、ルメル止血帯14,15、および門16の周りのスリップノット付きタイの使用が含まれる。マウスにおけるスリップノット技術の適応について説明します。この技術が他の肺門クランプ技術に比べて持っている主な利点は、虚血の期間中の胸部の閉鎖を可能にすることであり、特に虚血の期間が長いプロトコルでは、特に鈍感な体液損失を最小限に抑えます。これは、クランプまたは止血帯がヒルムに配置されている場合には達成できません。
動物の選択に関しては、ラットやブタなどの大型動物モデルではなく、マウスでこのモデルを開発することを選択しました。その理由は2つあり、私たちの研究室は、同所性マウス肺移植によるマウスマイクロサージャリーに豊富な経験を持っています17。第二に、マウスはラットよりも小さく、技術的に操作が困難ですが、現在、ラット系統よりも市販のトランスジェニックマウス系統の方が多くなっています26,27。また、マウスはより早く繁殖するため、新しい系統の迅速な開発が可能になり、IRIの免疫メカニズムを調べる際に特に役立ちます。これらの理由から、私たちはこの技術をマウスで開発することを選択しました。
私たちの知る限り、これはスリップノットを持つマウスの左肺肺門クランプの技術を使用した最初のビデオベースの記事です。Saitoらは、微小血管クランプ22を用いたラットの肺門クランプを実証するビデオベースの論文を公開しました。マウスでは、Liaoらは、スリップノットで肺動脈(PA)をクランプする肺IRIモデルを発表しましたが、気管支がクランプから除外されているため、このモデルでは肺は換気されたままです28。PAクランプ技術は、肺塞栓症29、肺高血圧症および/または右心室不全30,31を研究するためのモデルとして使用されています。研究分野は移植における肺 IRI であるため、虚血性損傷に加えて圧外傷を最小限に抑えるために、気管支を含む門全体をクランプすることを選択しました。
注目すべきは、IRI後の非常に初期の肺浸潤細胞の動態に興味があるため、30分間の温虚血と1時間の再灌流が選択されました。例えば、ヘムオキシゲナーゼ1などの細胞保護遺伝子のアップレギュレーションは、虚血のわずか30分後とそれに続く2時間の再灌流13の後に報告されています。好中球は、IRI32以降に肺に浸潤する中枢細胞型であると考えられていましたが、単球が好中球に先行して肺に到達することを示しました18,24。最近では、B細胞が単球にさえ先行し、再灌流から1時間以内に肺に入ることがわかりました(未発表のデータ)。この手法を適応させると、温虚血と再灌流の持続時間は、研究の質問と仮説に従って調整できます。この期間中は胸部を閉じることができるため、過度の水分や熱損失を心配することなく、より長い期間の温かい虚血が可能です。
いくつかの合併症が周術期に発生する可能性があり、最終的な共通の結果は周術期の死亡です。手術中の動物の死亡事故は、外科医がこの技術を繰り返すことで減少することが観察されています。私たちは、外科医がスキルのプラトーに達するには、少なくとも2か月の練習および/または少なくとも20の症例が必要であると推定しています。この時点で、術中死亡率は約 50 例に 1 例発生すると推定されています。麻酔をかけたマウスの死は、横隔膜と胸壁の筋肉組織の力強い収縮を伴う苦痛な呼吸によって予告されることがよくあります。これらの苦しい呼吸が始まると、介入を取らなければ3〜5分で死に至ります。術中の死亡を引き起こす可能性のある原因はいくつかあり、その多くは認識可能で予防可能です。この手術の重要なステップと、成功した結果を達成するためのトラブルシューティング技術を以下で強調します。
挿管 最初の重要なステップは、注意深い挿管と気道の固定であり、不注意による抜管を防ぐことです。サバイバル手術では、抜管後にマウスが呼吸できなくなるため、最初の挿管中に声帯が損傷しないようにすることが特に重要です。ETTのコードを超えた進行は、顕微鏡による直接視覚化の下で行う必要があります。挿管中に抵抗が満たされた場合、ETTを盲目的に進めないでください。.蚊クランプで中咽頭を開いたままにしながら、血液が気道の視界を遮るので、口腔粘膜を突き刺さないように注意する必要があります。挿管の試行回数は5回未満に制限する必要があります。.
偶発的な抜管 処置中のどの時点でも、肺が適切に膨らんでいるように見えない場合は、ETTが外れている可能性があります。長期間気づかれない偶発的な抜管の別の症状は、マウスが突然苦しい呼吸を発達させることです。最初の挿管後は、ETTをシルクテープで鼻の周囲にしっかりと固定し、マウスの首と胴体の調整を制限するように注意する必要があります。左肺も右肺も膨らんでいない場合は、ETTが気管から出てきた可能性があります。ETTを押し戻す試みを試みることができますが、動物の早期死亡を避けるために、マウスを迅速に再挿管する必要がある場合があります。両方の肺が膨らむと予想されるときに片方の肺だけが膨らんでいる場合は、ETTが深すぎる可能性があるため、慎重に引き戻して再度固定する必要があります。
肺の動員 左肺の動員は、圧迫損傷が肺胞を損傷し、肺のコンプライアンスを低下させる可能性があるため、肺実質に穏やかな圧力をかけた綿の先端のアプリケーターを使用して行う必要があります。肺は鉗子やクランプでつかむと、肺実質が損傷するので避けてください。
ヒラクランプの応用 左肺門クランプは、結び目を中央に置きすぎないように(左心房に引っかからないように)、または末梢に置きすぎないように注意して、直接視覚化して配置する必要があります(肺実質を引っ掛けないように)。肺門クランプで左心房を捉えると、心房細動を引き起こし、その後の死を引き起こす可能性があります。門の視覚化は、視野を拡大するために適切な肋骨の収縮を確保することで改善できます。スリップノットを結んだ後、リクルート操作を行うことにより、クランプが完全に閉塞していることを確認すると便利です-ETTを人工呼吸器に接続する流出チューブを手動で閉塞し、左肺が陽圧で拡張しないようにします。血管閉塞は、軟骨性気管支と比較して肺動脈と静脈の崩壊性が高いことを考えると、気管支閉塞の確認とともに推定されます。さらに、肺門クランプは、左主幹気管支の軟骨部分を押しつぶし、肺門クランプの解放後の左肺の拡張を防ぐため、過度の力で結ぶべきではありません。肺門クランプが解放されたら、別のリクルート操作を実行して、肺がまだ換気できることを確認することが重要です。
チェストクロージャー 胸を閉じるときは、肺が最大限に吸気されたときに、4番目 と5番目の 肋骨を一緒にする必要があります。これにより、胸膜腔に残る空気の量が最小限に抑えられ、肋骨が閉じられると気胸が発生します。筋肉層と皮膚は、緊張性気胸の発生を避けるために、気密性の高い方法で閉じる必要があります。.
ABG の取得 最後に、ABGを取得するときは、ABG測定値が左肺機能22,23のみを反映するように、最初に右肺門をクランプすることが重要です。右肺門クランプがないと、正常に換気されている右肺は、損傷した虚血性左肺を補う以上のものになり、ABG測定値は正常に見えます。
要約すると、上記で説明した肺門クランプ技術は、肺移植の研究にとって貴重なツールであり、重要なことに、同種異性、外科的吻合関連の外傷、または低温虚血性貯蔵を導入することなく、温冷IRIの研究を分離することができます。特に、この説明されている肺門クランプの手法は、簡単に教えられ、広く採用でき、信頼性と再現性のある結果につながる可能性があります。

<a href="https://app.jove.com/t/6603">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/66232">10.3791/66232</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/66232">Murine Left Pulmonary Hilar Clamp Model of Lung Ischemia Reperfusion Injury</a>. The Protocol and Representative Results&#160;sections were&#160;updated.

Erratum: Murine Left Pulmonary Hilar Clamp Model of Lung Ischemia Reperfusion Injury

臓器移植中のIRIは、原発性移植片機能障害およびその後の移植片拒絶反応のエピソードの主要な危険因子である1,2。移植中、温虚血時間は、ドナーの大動脈クロスクランプから冷灌流の開始までの期間、および氷からの臓器摘出から臓器移植までの期間として定義されます。冷蔵保存時間は、冷灌流の開始から臓器の氷からの除去までの期間として定義されます3。温性虚血は、冷性虚血4,5,6よりも後の臓器機能にとってより有害であり、その根底にあるメカニズムは、前臨床モデルでのさらなる研究を必要とします。さらに、心臓死後の臓器提供(DCD)による臓器移植は、従来の脳死後(DBD)の提供よりも温存性虚血期間が長くなります7。DCDドナーの使用はドナープールを拡大し、肺の利用を増やすことができますが、移植後の肺機能に対する温虚血の影響を評価するためのさらなる前臨床研究が必要です。以下では、左肺門クランプを介したマウスの温性IRIのモデルについて説明します。
肺肺門クランプのいくつかの動物モデルが過去数年間に開発され、適応されており、非外傷性微小血管クランプ8,9,10,11,12,13、ルメル止血帯14,15、または縫合結紮16の使用を含むことができるヒラークランプとして。肺門クランプの核心は、再灌流を達成するためには、可逆的であり、肺門構造への損傷が最小限またはまったくない必要があるということです。ここでは、スリップノットで左肺門を可逆的に縫合するマウスの門クランプ技術について説明します。この方法は、肺動脈の流入、静脈の流出、および主幹気管支に出入りする気流を閉塞します。血管クランプ、クリップ、または止血帯にスリップノットを使用する主な利点は、長期間の虚血中に胸を閉じることができるため、マウスの感覚不良な体液と熱損失を最小限に抑えることができることです。信頼性の高い動脈血ガス(ABG)測定値を取得し、肺門クランプ後の細胞外漏出を測定するためのプロトコルを提供します。
この肺門クランプ技術は、肺移植の広範な研究において重要な位置を占めています。同所性肺移植の小動物モデルと比較して、肺門クランプ技術は、外科的吻合部外傷または同種誘発性17を追加せずにIRIの影響を分離することができる。さらに、肺門クランプ技術は、マウスの肺移植よりも簡単かつ迅速に習得できます。実際、肺門クランプ技術を使用して、過去 10 年間で、TLR4、NADPH オキシダーゼ、アデノシン A2A 受容体 14,18,19,20 など、IRI の病因におけるいくつかの重要なメカニズムが特定されています。次のプロトコルでは、肺 IRI を研究するためのツールとして、信頼性が高く、教えやすく、再現性のある肺門クランプの方法を紹介します。

<table><tbody><tr><td>Medications</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>10%ポビドンヨード溶液</td><td>Aplicare</td><td>NDC 52380-0126-2</td><td>消毒剤ブ</td></tr><tr><td>プレノルフィン用 1.3 mg/mL</td><td>Fidelis Animal Health</td><td>NDC 86084-100-30</td><td>疼痛管理用</td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Cronus Pharma</td><td>NDC 69043-027-18</td><td>疼痛管理用</td></tr><tr><td>ヘパリン1000単位/mL</td><td>Sagent</td><td>NDC 25021-404-01</td><td>動脈血を得るため</td></tr><tr><td>イソフルラン 1%-1.5%</td> <td>シグマ アルドリッチ</td><td>26675-46-7</td><td>麻酔用</td></tr><tr><td>ケタミン塩酸塩 100 mg/mL</td><td>Vedco</td><td>NDC 50989-996-06</td><td>麻酔用</td></tr><tr><td>Puralube 獣医眼軟膏</td><td>Medi-Vet.com</td><td>11897</td><td>眼の乾燥を防ぐために</td></tr><tr><td>キシラジン 20 mg/mL</td><td>アコーン</td><td>NDC59399-110-20</td><td>疼痛管理</td></tr><tr><td>用Tools and Instruments</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Argent High Temp Fine Tip Cautery Pen</td><td>McKesson</td><td>231</td><td>血管を凝固させるには</td></tr><tr><td>湾曲した蚊クランプ</td><td>Fine Science Tools</td><td>13009-12</td><td>外科手術用</td></tr><tr><td>Fine Curved 鉗子</td><td>Fine Science Tools</td><td>11274-20</td><td>外科用手技</td></tr><tr><td>ファインハサミ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15040-11</td><td>外科手術用</td></tr><tr><td>挿管クランプのセットアップ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>18374-44, 18144-30</td><td>挿管時にマウスを舌で垂直に保持するため。補足図1Aを参照してください。&nbsp;</td></tr><tr><td>磁気リブリトラクター</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>18200-01, 18200-10</td><td>開胸術の引き込み用。磁気固定具とリトラクターは、以下のマイクロラテックスチューブで接続する必要があります。</td></tr><tr><td>光学グレードプラスチック光ファイバージャケットなし、500&mu;m</td><td>Edmund Optics</td><td>02-532</td><td>気管内チューブのイントロデューサーを作るため。この光ファイバーの1.5インチの長さには、一端に固定されたシルクテープが必要です。その後、気管内チューブのイントロデューサーとして使用できます。イントロデューサーの端はわずかに湾曲している必要があります。</td></tr><tr><td>パワプロウルトラクリッパー</td><td>オ</td><td>スター078400-020-001</td><td>髪をクリップするには</td></tr><tr><td>さみ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>14370-22</td><td>外科手術用</td></tr><tr><td>小動物加熱パッド</td><td>K&H ペット製品</td><td>サーモピープ加熱パッド</td><td>正常体温を維持するため</td></tr><tr><td>小動物用人工呼吸器</td><td>ハーバード装置</td><td>55-0000</td><td>換気用(TV 0.35 cc、PEEP 1 cm H2O、RR 100-105/min、FiO2 100%)</td></tr><tr><td>Spearit マイクロラテックスゴムチューブ(外径1/8、内径1/16)</td><td>Amazon.com</td><td>https://www.amazon.com/Rubber-Tubing-CONTINUOUS-Select-Length/dp/B00H4MT7V0?th=1</td><td>の引き込み用開胸術</td></tr><tr><td>Stat Profile Prime Critical Care 血液ガス分析装置</td><td>Nova Biomedical</td><td>https://novabiomedical.com/prime-plus-critical-care-blood-gas-analyzer/index.php?gad=1&gclid=Cj0KCQjwmICoBhDx ARIsABXkXlInZX--R3ezBkc304nS_GVGI9Z2T3Esr33 2aM8WGPiUVhicPQZ Wj2AaAqhDEALw_wcB&nbsp;&nbsp;</td><td>開胸術の引き込み用</td></tr><tr><td>ストレートクランプ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>13008-12</td><td>外科手術用</td></tr><tr><td>ストレート鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>91113-10</td><td>外科手術用</td></tr><tr><td>顕微鏡</td><td>ワイルド・ヘールブルッグ</td><td>は生産されなくなりました</td><td>挿管および外科手術用; ライカ手術用顕微鏡</td></tr><tr><td>Supplies</strongとの</td>交換をお勧めします><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&frac12; ccシリンジ &frac12; インチ 29G ニードル</td><td>マッケソン</td><td>942665</td><td>ケタミン/キシラジン腹腔内注射用</td></tr> <tr><td>&frac12; インチ 31G ニードル 1 cc ツベルクリン注射器</td><td>マッケソン</td><td>16-SNT1C2705</td><td>左心室からの動脈血の吸引用</td></tr><tr><td>1インチ 20G IV カテーテル</td><td>テルモ</td><td>SROX2025CA</td><td>気管内チューブ (ETT)</td></tr> <tr><td>1インチ シルクテープ</td><td>デュラポア</td><td>3M ID 7100057168</td><td>ETTを鼻にテープで固定し、手足を固定するために</td></tr><tr><td>3/10 cc シリンジ 5/16 インチ 31G 針</td><td>マッケソン</td><td>102-SN310C31516P</td><td>下大静脈への抗体注入用</td></tr><tr><td>6-0 モノフィラメント縫合糸 P-10 針</td><td>マッケソン</td><td>S697GX</td><td>開胸術、筋肉層、皮膚の閉鎖用</td></tr><tr><td>6-0 シルクネクタイ</td><td>外科専門</td><td>SP102</td><td>肺門クランプ用のスリップノットを作るには</td></tr><tr><td>先のとがった綿の先端のアプリケーター</td><td>ソロン</td><td>56225</td><td>肺を操作し、鈍い解剖のために</td></tr></tbody></table>

マウス左肺ヒラークランプモデル 肺虚血再灌流損傷

Murine Left Pulmonary Hilar Clamp Model of Lung Ischemia Reperfusion Injury

肺移植中の虚血再灌流障害(IRI)は、移植後合併症の主要な危険因子です。これには、原発性移植片の機能障害、急性および慢性の拒絶反応、および死亡率が含まれます。IRIの基盤を研究する努力は、左肺肺門クランプの信頼性と再現性のあるマウスモデルの開発につながりました。このモデルには、麻酔をかけられ挿管されたマウスで行われる外科的処置が含まれます。左開胸術が行われ、続いて慎重な肺動員と左肺肺門の解剖が行われます。肺門クランプは、スリップノットによる肺門の可逆的な縫合結紮を含み、動脈の流入、静脈の流出、および左主幹気管支を通る空気の流れを止めます。再灌流は、縫合糸を慎重に除去することによって開始されます。当研究室では、現在の研究において、実験モデルに30分間の虚血と1時間の再灌流を用いています。ただし、これらの期間は、特定の実験問題に応じて変更できます。犠牲の直前に、右肺門クランプの4分間後に左心室から動脈血ガスを採取して、得られたPaO2 値が負傷した左肺のみに起因することを確認できます。また、フローサイトメトリーを使用して細胞外漏出を測定する方法についても説明します。これには、犠牲になる前に研究対象の細胞に特異的な蛍光色素標識抗体の静脈内注射が含まれます。その後、左肺を採取して、フローサイトメトリー、凍結または固定、パラフィン包埋免疫組織化学、および定量的ポリメラーゼ連鎖反応を行うことができます。この肺門クランプ技術により、IRIの根底にある細胞および分子メカニズムの詳細な研究が可能になります。代表的な結果は、肺門クランプ後の左肺の酸素化の減少と肺損傷の組織学的証拠を明らかにしています。この技術は、顕微手術の経験の有無にかかわらず、担当者が容易に習得および再現できるため、信頼性が高く一貫した結果が得られ、肺 IRI の研究に広く採用されているモデルとして機能します。

左肺門クランプ後、左肺に起因する動脈血中の酸素化の分圧 (PaO2) は ~100 mmHg であり、偽開胸術後の ~500 mmHg と比較して大幅に低くなっています (図 7A、n=6-7)。注目すべきは、B6マウスで偽開胸術が行われ、右肺門クランプの4分後にABG測定が行われ、左肺のみに起因する値を表していることです。肺門クランプ左肺のH&amp;E染色では、赤血球による気道と血管の充血を満たす炎症細胞の浸潤が示されましたが、これらの所見はナイーブな左肺には見られません(図7B、n = 2)。これらの結果は、虚血と再灌流の期間に続く即時の組織損傷と細胞浸潤を示しています。
ステップ6で述べたように、犠牲の5分前にFITC標識抗Ly6G抗体を静脈内注射することで血管内好中球と間質性好中球を区別し、続いてすべての好中球をAPC-Ly6G抗体で標識することで鑑別できる18,24。代表的なプロットは、左肺の肺門クランプ後(図7C、n = 4)、好中球の~75%が血管内(APC-Ly6G + FITC-Ly6G +)であり、~25%が間質性(APC-Ly6G + FITC-Ly6G-)であることを示しています。これらの結果は、好中球の血管外漏出を評価する信頼性の高い方法を示しており、使用する抗体(単球には抗Ly6C、B細胞には抗CD19)に応じて他の細胞タイプにも適応できます。この手法は、IRI後の細胞動態の研究に役立ちます。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig1v2.jpg"> 図1:マウスの挿管。 (A)左胸部と腹部を剃ったマウス。(B)人工呼吸器チューブに接続された気管内チューブ。(C)挿管が確認されたら、チューブをマウスの鼻に周囲にテープで固定します。(D)小動物用人工呼吸器との間の流入および流出チューブを備えた挿管されたマウス。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig1v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig02.jpg"> 図2:左開胸術 (A)第4肋 間腔(ICS)上の皮膚切開。(B)4番目の 肋間腔に分割された筋肉層。(C)5番目の 肋骨のすぐ上に小さな切開を行います。(D) 4番目の ICS で切開を前方および後方に延長する。(E) 4番目の ICS で視覚化された肺。(F-G)リブリトラクターが配置されています。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig03.jpg"> 図3:左肺門クランプ (A)綿棒で動員された左肺。(B) 下肺靭帯 (IPL) の視覚化。(C)左肺を前方に反転させた状態で、シルクタイをヒルムの後方に配置します。(D)シルクタイの上で左を後方に反転させると、前門が視覚化されます。(E)左のヒルムにスリップノットを合わせた楽器のタイ。(F)ヒルムのスリップノット。(G)流出を手動で閉塞すると、左肺は膨らまず、肺門クランプが成功したことを示します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig04.jpg"> 図4:左肺門クランプの解除と左胸部閉鎖 (A) スリップノットを離すと、左肺が再び膨らみます。(B)4番目の 肋骨のすぐ上に1つの咬傷、および(C)6番目の 肋骨のすぐ上に1つの咬傷を伴う肋骨の閉鎖。(D-E)胸はエンドインスピレーションで結ばれた1針で閉じられています。(F)断続縫合による皮膚閉鎖(ランニングステッチによる筋肉層閉鎖後)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig05.jpg"> 図5:開腹術、両側クラムシェル開胸術、および動脈採血。 (A)仰臥位に調整されたマウス。(B)腹部の正中線上に行われた皮膚切開。(C)剣状突起から恥骨まで伸びる開腹術で、最も劣った肋骨に沿って左右に延長されます。(D-E)胸腔に入るための横隔膜の開口部で、最も下肋骨(点線)に沿って左右に横隔膜切開が延長されます。(F)胸部の頂点に向かって前腋窩線(点線)を切開する両側クラムシェル開胸術。(G)下大静脈の後方の左胸部に伸びる右肺の副葉。(H)副小葉が動員され、右胸に戻った。(I)左心室からの動脈血の吸引(挿入図:右心室と左心室の色差)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig06.jpg"> 図6:下大静脈への静脈内注射(A)右内側内臓回転により、下大静脈(IVC)を露出させます。(B)IVCへの溶液の注入。(C)止血を達成するためにIVCに圧力をかける。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig06large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66232/66232fig07.jpg"> 図 7: 左肺門クランプ後の肺酸素化、組織型、および好中球血管外漏出の代表的な結果 (A) 偽開胸術を受けた C57BL/6 マウスの動脈血中の酸素分圧と肺門クランプの比較。結果はSEM±平均、n = 6-7として表示されます。Mann-Whitney U検定によって計算されたp値。**P &lt;0.01。(B)偽開胸術と肺門クランプを受けたC57BL/6マウスのホルマリン固定パラフィン包埋肺切片のH&amp;E染色。スケールバーは250μmを表し、(C)肺門クランプ後のC57BL/6マウスにおける血管内(APC-Ly6G+FITC-Ly6G+)対血管外(APC-Ly6G+FITC-Ly6G-)Ly6G+好中球の分布の代表的な図。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/66232fig07large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
補足図1: 気管内チューブのイントロデューサー。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66232/Supplemental_Figure_1_updated.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>

このプロトコルは、マウスモデルにおける肺虚血再灌流障害の研究に使用できる、実現可能で信頼性が高く、再現性のある左肺門結灌法の概要を示しています。

Ischemia reperfusion injury (IRI) during lung transplantation is a major risk factor for post-transplant complications, including primary graft ...

私たちは、虚血再灌流障害が肺移植後の転帰に及ぼす影響を研究することに関心があり、根底にある細胞および分子メカニズムを理解することを目標としています。肺に入る好中球は、虚血再灌流障害(IRI)の一因となります。最近、B細胞が好中球の肺への侵入を進行し、IRI後の好中球の動員に役割を果たしていることを発見しました。マウスへの左肺移植は技術的に困難であり、一貫した結果を得るためには、数ヶ月にわたるフルタイムの専任のトレーニングが必要です。さらに、アレルギー誘発性と外科的吻合部外傷を導入します。したがって、虚血再灌流障害の研究を分離できる、よりアクセスしやすい技術が必要です。私たちの肺門クランプモデルを使用して、B細胞は虚血再灌流障害の早期に肺に入り、B細胞受容体の古典的な単球をTLR4依存的に動員することを発見しました。これにより、最終的には肺への好中球の血管外漏出が増加します。私たちのプロトコルには、スリップノットによる左肺門の可逆的縫合結紮が含まれます。縫合糸のしなやかで目立たない性質により、胸部閉鎖が可能になり、胸部閉鎖によりマウスの熱と感覚不能な体液損失が最小限に抑えられるため、温性虚血の長期研究に役立ちます。

murine-left-pulmonary-hilar-clamp-model-lung-ischemia-reperfusion

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

外科手術による外傷、炎症反応を誘導する。サイトカイン、内因性リガンドは、虚血再灌流後に心筋梗塞サイズを調節することが知られています。我々は、開胸の影響を最小限に抑えるためにぶら下がって重みを使用してマウスの虚血再灌流の変更されたクローズド·胸のモデルを提示します。...

心筋虚血再灌流障害のマウスクローズド胸モデル

我々は、再現性を高めるために左前下行枝（LAD）に結紮の位置決めにおいてより明確にするために可能にするマウスモデルにおける心筋梗塞（MI）をシミュレートするための実験的虚血/再灌流（I / R）傷害を誘導するための外科的方法を紹介マウスでのMIの実験の。...

左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル

ユニークなラット肝門部クランプモデルは虚血再灌流障害を改善するのに薬理学的分子の影響を研究するために開発されました。このモデルは、直接肝臓送達を可能にする、門脈の分岐を介して虚血性肝セグメントにポータル供給の直接挿管を含みます。...

ラット肝臓肝門部クランプモデルを用いたダイレクトセグメント別肝臓内送達方法

本明細書では、マウスにおける左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを達成する方法を示す外科的処置について説明する。このモデルは、心筋梗塞の病態生理学とそれに付着した生物学的プロセスを調べるために高い関連性がある。...

左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを用いたマウス心筋梗塞モデル

臨床的に関連する大腸癌肝転移(CRLM)腫瘍モデルと、腫瘍増殖および転移における肝虚血再灌流(I/R)の影響について詳しく述べる。このモデルは、肝転移成長の手術誘発促進の根底にあるメカニズムをよりよく理解するのに役立ちます。...

虚血多灌流損傷の設定における転移性肝腫瘍のマウスモデル

ラット心臓の心筋虚血再灌流モデルは、自作リトラクター、ポリ塩化ビニルチューブ、および独自の結び目法を使用することによって改善される。心電図、トリフェニルテトラゾリウムクロリドおよび組織学的染色、ならびに生存率分析の結果は、改善されたモデル群が既存のモデル群よりも高い成功率および生存率を有することを示した。...

心筋虚血および再灌流傷害の改善されたげっ歯類モデル

換気を維持し、低酸素症を回避しながら左肺虚血再灌流(IR)損傷を引き起こすマウス手術モデル。...

口腔気管挿管と人工肺虚血再灌流手術のマウスモデル

ここに提示されるのは、マウスの左冠状動脈の永久結紮のための外科的処置である。このモデルは、心筋梗塞後の病態生理学および関連する炎症反応を調査するために使用できます。...

左冠動脈結紮術:心筋梗塞の外科用マウスモデル

この研究は、ラットの開腹術による腹腔上大動脈クロスクランプ中の内臓虚血再灌流後の急性肺損傷のモデルについて説明しています。これにより、大動脈クランプの臨床的および生物学的影響、および虚血再灌流が基礎となる臓器や遠隔肺損傷に及ぼす影響の両方を調査することができます。...

ラットにおけるセリアック大動脈クロスクランプによる内臓虚血再灌流後の急性肺損傷のモデル

私たちは、マウスが受けている中等度および重度の虚血再灌流誘発性腎傷害のモデルを記述する一方的な腎茎それぞれ、同時または遅延対側腎摘出続いクランプ。これらのモデルは、一貫して腎機能障害や損傷後の線維化を生じさせるが、傷害の重症度と生存率は、マウス、背景、年齢や手術用機器に依存している。...

マウスにおける急性腎障害とポスト傷害線維の虚血再灌流モデル

学ぶ マウス左肺ヒラークランプモデルを用いた肺虚血再灌流損傷の手法。好中球とB細胞の役割を解明し、肺移植の転帰改善に向けた治療戦略の基礎を築きます。

マウス左肺ヒラークランプモデル肺虚血再灌流損傷

さらに動画を探す

マウス左肺ヒラークランプモデル 肺虚血再灌流損傷

さらに動画を探す

マウス左肺ヒラークランプモデル肺虚血再灌流損傷