Name: 免疫電子顕微鏡のプレ埋め込みによる網膜回路と分子局在の研究 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-12T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: 学ぶ免疫電子顕微鏡法による網膜シナプス回路と神経伝達物質の局在解析。マウス網膜におけるロッド・コーン経路間のシナプス相互作用を超微細構造レベルで解明し、網膜疾患の神経機構理解に貢献します。

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<meta charset="utf8"></head><body>シナプス回路の解析とマウス網膜におけるタンパク質の局在

<ol><li>Chua, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+complete+reconstruction+of+the+early+visual+system+of+an+adult+insect%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">A complete reconstruction of the early visual system of an adult insect.</a> Curr Biol. 33 (21), 4611-4623.e4614 (2023).</li>
<li>Ravi Chander, P., Hanson, L., Chundekkad, L., Awatramani, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+circuits+underlying+multi-feature+extraction+in+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neural circuits underlying multi-feature extraction in the retina.</a> J Neurosci. , JN-RM-0910-23 (2023).</li>
<li>Sirivisoot, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+mouse+anti-canine+PD-L1+monoclonal+antibodies+and+their+expression+in+canine+tumors+by+immunohistochemistry+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Q%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of mouse anti-canine PD-L1 monoclonal antibodies and their expression in canine tumors by immunohistochemistry in vitro.</a> Vet Q. 43 (1), 1-9 (2023).</li>
<li>Raeisi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+phage+display-derived+anti-toxin+antibodies+neutralizing+TcdA+and+TcdB+of+Clostridioides+difficile%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Spectr%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of phage display-derived anti-toxin antibodies neutralizing TcdA and TcdB of Clostridioides difficile.</a> Microbiol Spectr. 11 (5), e0531022(2023).</li>
<li>Ryschich, A., Dong, Y., Schäfer, M., Ryschich, E., Karakhanova, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DWH24%3A+A+new+antibody+for+fluorescence-based+cell+death+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Appl+Fluoresc%22%5BJournal%5D)">DWH24: A new antibody for fluorescence-based cell death analysis.</a> Methods Appl Fluoresc. 11 (4), (2023).</li>
<li>Jastrzebska, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+characterization+of+rhodopsin+monomers+and+dimers+in+detergents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Functional characterization of rhodopsin monomers and dimers in detergents.</a> J Biol Chem. 279 (52), 54663-54675 (2004).</li>
<li>Huang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+Shenfu+injection+in+suppressing+inflammation+and+preventing+sepsis-induced+apoptosis+in+murine+cardiomyocytes+based+on+network+pharmacology+and+experimental+validation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">Mechanism of Shenfu injection in suppressing inflammation and preventing sepsis-induced apoptosis in murine cardiomyocytes based on network pharmacology and experimental validation.</a> J Ethnopharmacol. 322, 117599(2024).</li>
<li>Maheshwari, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inorganic+phosphate+exporter+heterozygosity+in+mice+leads+to+brain+vascular+calcification%2C+microangiopathy%2C+and+microgliosis%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Inorganic phosphate exporter heterozygosity in mice leads to brain vascular calcification, microangiopathy, and microgliosis.</a> Brain Pathol. 33 (6), e13189(2023).</li>
<li>Mackiewicz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+gravity+in+long-term+vitreous+tamponade%3A+In+vivo+investigation+using+perfluorocarbon+liquids+and+semi-fluorinated+alkanes%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Effect of gravity in long-term vitreous tamponade: In vivo investigation using perfluorocarbon liquids and semi-fluorinated alkanes.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 245 (5), 665-675 (2007).</li>
<li>Luján, R., Rubio, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Editorial%3A+Immunoelectron+microscopy%3A+Placing+molecular+functions+within+a+neuronal+context%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neuroanat%22%5BJournal%5D)">Editorial: Immunoelectron microscopy: Placing molecular functions within a neuronal context.</a> Front Neuroanat. 16, 1043371(2022).</li>
<li>Xu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+changes+and+the+response+of+microglia+in+a+light-induced+photoreceptor+degeneration+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Synaptic changes and the response of microglia in a light-induced photoreceptor degeneration model.</a> Mol Vis. 27, 206-220 (2021).</li>
<li>Chadha, A., Volland, S., Baliaouri, N. V., Tran, E. M., Williams, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+route+of+the+visual+receptor+rhodopsin+along+the+cilium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The route of the visual receptor rhodopsin along the cilium.</a> J Cell Sci. 132 (10), jcs.229526(2019).</li>
<li>Huang, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+nucleocapsid+structural+forms+of+shrimp+white+spot+syndrome+virus+suggests+a+novel+viral+morphogenetic+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Multiple nucleocapsid structural forms of shrimp white spot syndrome virus suggests a novel viral morphogenetic pathway.</a> Int J Mol Sci. 24 (8), 7525(2023).</li>
<li>Tissarinen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+human+placental+heat+shock+protein+5+is+associated+with+spontaneous+preterm+birth%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Elevated human placental heat shock protein 5 is associated with spontaneous preterm birth.</a> Pediatr Res. 94 (2), 520-529 (2023).</li>
<li>Huang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+neural+tract+tracing+study+on+synaptic+connections+for+cortical+glutamatergic+terminals+and+cervical+spinal+calretinin+neurons+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neural+Circuits%22%5BJournal%5D)">A neural tract tracing study on synaptic connections for cortical glutamatergic terminals and cervical spinal calretinin neurons in rats.</a> Front Neural Circuits. 17, 1086873(2023).</li>
<li>Zhang, J., Petralia, R. S., Wang, Y. X., Diamond, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+quantitative+immunogold+analysis+of+membrane+receptors+at+retinal+ribbon+synapses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">High-resolution quantitative immunogold analysis of membrane receptors at retinal ribbon synapses.</a> J Vis Exp. 108, e53547(2016).</li>
<li>Ottersen, O. P., Landsend, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organization+of+glutamate+receptors+at+the+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Organization of glutamate receptors at the synapse.</a> Eur J Neurosci. 9 (11), 2219-2224 (1997).</li>
<li>Greferath, U., Grünert, U., Wässle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+bipolar+cells+in+the+mammalian+retina+show+protein+kinase+C-like+immunoreactivity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Rod bipolar cells in the mammalian retina show protein kinase C-like immunoreactivity.</a> J Comp Neurol. 301 (3), 433-442 (1990).</li>
<li>Wang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+and+synaptic+organization+of+substance+P-like+immunoreactive+neurons+in+the+mouse+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">Distribution and synaptic organization of substance P-like immunoreactive neurons in the mouse retina.</a> Brain Struct Funct. 228 (7), 1703-1724 (2023).</li>
<li>van Opbergen, C. J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((34%3BOrphan%26%2334%3B+Connexin43+in+Plakophilin-2+deficient+hearts+revealed+by+volume+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">34;Orphan&#34; Connexin43 in Plakophilin-2 deficient hearts revealed by volume electron microscopy.</a> Front Cell Dev Biol. 10, 843687(2022).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safe+and+efficient+oral+allergy+immunotherapy+using+one-pot-prepared+mannan-coated+allergen+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Safe and efficient oral allergy immunotherapy using one-pot-prepared mannan-coated allergen nanoparticles.</a> Biomaterials. 303, 122381(2023).</li>
<li>Yamashita, K., Kusakabe, M., Sano, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+and+rapid+method+of+dissociating+hepatocytes+from+fixed+liver+of+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Stain+Technol%22%5BJournal%5D)">A simple and rapid method of dissociating hepatocytes from fixed liver of the mouse.</a> Stain Technol. 56 (1), 29-33 (1981).</li>
<li>Tanabe, T., Shin, M., Fujiwara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoelectron+microscopy+study+of+polyamines+using+a+newly+prepared+monoclonal+antibody+against+spermidine%3A+use+of+a+mixture+of+glutaraldehyde+and+paraformaldehyde+as+a+cross-linking+agent+in+the+preparation+of+the+antigen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biochem%22%5BJournal%5D)">Immunoelectron microscopy study of polyamines using a newly prepared monoclonal antibody against spermidine: use of a mixture of glutaraldehyde and paraformaldehyde as a cross-linking agent in the preparation of the antigen.</a> J Biochem. 135 (4), 501-507 (2004).</li>
<li>Xiao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+bipolar+cells+receive+cone+photoreceptor+inputs+through+both+invaginating+synapses+and+flat+contacts+in+the+mouse+and+guinea+pig+retinas%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Rod bipolar cells receive cone photoreceptor inputs through both invaginating synapses and flat contacts in the mouse and guinea pig retinas.</a> J Comp Neurol. 531 (11), 1184-1197 (2023).</li>
<li>Yang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+%CE%B1-Synuclein+in+the+mouse+retina+is+confined+to+inhibitory+presynaptic+elements%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Expression of α-Synuclein in the mouse retina is confined to inhibitory presynaptic elements.</a> J Comp Neurol. 531 (10), 1057-1079 (2023).</li>
<li>Yazulla, S., Studholme, K. M., Zucker, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+organization+of+substance+P-like+immunoreactive+amacrine+cells+in+goldfish+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Synaptic organization of substance P-like immunoreactive amacrine cells in goldfish retina.</a> J Comp Neurol. 231 (2), 232-238 (1985).</li>
<li>Sassoè-Pognetto, M., Wässle, H., Grünert, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycinergic+synapses+in+the+rod+pathway+of+the+rat+retina%3A+cone+bipolar+cells+express+the+alpha+1+subunit+of+the+glycine+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Glycinergic synapses in the rod pathway of the rat retina: cone bipolar cells express the alpha 1 subunit of the glycine receptor.</a> J Neurosci. 14 (8), 5131-5146 (1994).</li>
<li>Hartveit, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+and+developmental+expression+of+the+NMDA+receptor+subunit+NR2A+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Localization and developmental expression of the NMDA receptor subunit NR2A in the mammalian retina.</a> J Comp Neurol. 348 (4), 570-582 (1994).</li>
<li>Perkins, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+miniSOG+in+the+localization+of+mitochondrial+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">The use of miniSOG in the localization of mitochondrial proteins.</a> Methods Enzymol. 547, 165-179 (2014).</li>
<li>Shu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetically+encoded+tag+for+correlated+light+and+electron+microscopy+of+intact+cells%2C+tissues%2C+and+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">A genetically encoded tag for correlated light and electron microscopy of intact cells, tissues, and organisms.</a> PLoS Biol. 9 (4), e1001041(2011).</li>
<li>Kar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volume+electron+microscopy+reveals+human+retinal+mitochondria+that+align+with+reflective+bands+in+optical+coherence+tomography+%5BInvited%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Volume electron microscopy reveals human retinal mitochondria that align with reflective bands in optical coherence tomography [Invited].</a> Biomed Opt Express. 14 (10), 5512-5527 (2023).</li>
<li>Johnson, J. E. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+regulation+of+ATP+and+Ca2%2B+dynamics+in+vertebrate+rod+and+cone+ribbon+synapses%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal regulation of ATP and Ca2+ dynamics in vertebrate rod and cone ribbon synapses.</a> Mol Vis. 13, 887-919 (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL シリンジ ニードル</td><td>カンデライ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1% OsO4</td><td>Electron Microscopy Science</td><td>19100</td><td></td></tr><tr><td>2,2,2-Tribromoethanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402</td><td></td></tr><tr><td>8% Glutaraldehyde</td><td>Electron Microscopy Science</td><td>16020</td><td></td></tr><tr><td>8% Paraformaldehyde</td><td>Electron Microscopy Science</td><td>157-8</td><td></td></tr><tr><td>アセトン</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>10000</td><td></td></tr>反<tr><td>ウサギPKC</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>P4334</td><td></td></tr>反<tr><td>ウサギSP</td><td>Abcam</td><td>ab67006</td><td></td></tr><tr><td>DAB基板キット</td><td>MXBバイオテクノロジーKIT-9701</td><td>/ 9702/9703</td><td></td></tr><tr><td>エルボーはさみ</td><td>蘇州66ビジョン会社</td><td>54010</td><td></td></tr><tr><td>電子顕微鏡</td><td>フィリップス</td><td>CM120</td><td></td></tr><tr><td>エポン樹脂</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>14910</td><td></td></tr><tr><td>鉗子</td><td>蘇州66ビジョン会社</td><td>S101A</td><td></td></tr><tr><td>ミリポア濾紙</td><td>メルクミリポア&nbsp;</td><td></td><td></td>PR05538</tr><tr><td>Na2HPO4&middot; 12H2O</td><td>Sigma</td><td>71650</td><td>A リン酸緩衝液の成分</td></tr><tr><td>NaH2PO4&middot;H2O</td><td>Sigma</td><td>71507</td><td>リン酸緩衝液の成分</td></tr><tr><td>ピクリン酸</td><td>電子顕微鏡 科学</td><td>19550</td><td></td></tr><tr><td>水素化ホウ素ナトリウム (NaBH4)&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>215511</td><td></td></tr><tr><td>Tris</td><td>Solarbio</td><td>917R071</td><td></td></tr><tr><td>Ultramicrotome</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Uranyl acetate</td><td>Electron Microscopy Science</td><td>22400</td><td></td></tr><tr><td>VACTASTAIN ABC kit, Peroxidase (Rabbit IgG)</td><td>Vector Laboratories</td><td>PK-4001</td><td></td></tr></tbody></table>

免疫電子顕微鏡のプレ埋め込みによる網膜回路と分子局在の研究

Investigating Retinal Circuits and Molecular Localization by Pre&#45;Embedding Immunoelectron Microscopy

図1 は、プロテインキナーゼCα(PKCα)またはSPに対する一次抗体をインキュベートせずに、免疫反応性(IR)が認められなかった対照実験の例を示しています。
図2 は、マウス網膜のPKCα-IRを示しています。PKCαは、網膜18のすべての桿体双極細胞(RBC)のマーカーとして機能します。電子顕微鏡(EM)レベルでは、赤血球はPKCα-IRによって同定でき、高電子密度のジアミノベンジジン(DAB)反応生成物によって可視化されます。 図2A は、外網状層(OPL)のロッド末端とシナプスを形成するPKCα陽性RBC樹状突起を示し、 図2B は、PKCα陽性RBC樹状突起が錐体末端にシナプス後である錐体RBCシナプスを示しています。さらに、DAB反応生成物は、内側の網状層(IPL)のRBC末端(図2C)および軸索突起(図2D)の同定に役立ちます。
図3 は、マウス網膜のIPLにおけるシナプス前およびシナプス後結合の両方でのサブスタンスP(SP)の発現を示しています。SP-IRアマクリン細胞は、SP陰性アマクリン細胞(図3A)およびSP-IRアマクリンプロセス(データは示さず)に対してシナプス前です。さらに、SP-IRアマクリン細胞は、IPLのサブレイヤー3(S3)およびサブレイヤー5(S5)レベルでそれぞれシナプス後からバイポーラ末端にあります(図3B、C)。私たちの以前の研究では、SP-IRアマクリン細胞プロセスがIPLの他のプロセスにシナプス出力を形成するシナプスの解析について詳しく説明しています19。特に、SPの細胞内局在は、主にシナプス前末端のシナプス小胞に見られます(図3)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66543/66543fig01v2.jpg"> 図1:対照実験の免疫電子顕微鏡写真。 OPLに2本のリボン(矢じり)(A)と1本のリボンを持つロッドスフェルール(RS)(B)は、いずれも染色を示さなかった。スケールバー:500 nm(A)、200 nm(B)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66543/66543fig01largev2.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66543/66543fig02.jpg"> 図2:マウス網膜のPKCα抗体で標識した免疫電子顕微鏡写真(A)RSは、OPL中の1つのPKCα陽性RBC(矢印は免疫反応性を示す)および2つの水平細胞(H)と結合します。(B)CPはOPLのPKCα陽性RBCと結合します。(C)および(D)は、それぞれIPLにおけるPKCα陽性RBC末端および軸索突起を示す。スケールバー:200 nm(A)、500 nm(B)、500 nm(C)、500 nm(D)。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66543/66543fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66543/66543fig03.jpg"> 図3:マウス網膜のIPLでSP抗体で標識した免疫電子顕微鏡写真( A)(A)SP-IRアマクリン細胞(A+)は、SP陰性アマクリン細胞(A-)に対してシナプス前です。SP-IRアマクリン細胞は、IPLのS3(B)およびS5(C)レベルでそれぞれバイポーラ端末から入力を受け取りました。スケールバー:200 nm(A)、200 nm(B)、200 nm(C)。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66543/66543fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

The retina comprises numerous cells forming diverse neuronal circuits, which constitute the first stage of the visual pathway. Each circuit is ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

新生児マウスの網膜は血管新生を調節する別の遺伝子や薬剤の役割の調査を可能にし、血管新生のよく特徴付け生理学的モデルを提供...

血管新生を調査するために新生児マウス網膜の全体のマウント免疫蛍光染色<em生体内で&gt;</em

ここで説明するプロトコルは、全量網膜製剤の構造評価のためのものです。これには、組織解剖、親水性ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)メンブレンインサートへのマウント、蛍光マーカーによるボーラスローディング、細胞およびシナプス成分の免疫組織化学的分析のためのカルボジイミドおよびパラホルムアルデヒドによる固定の比較の説明が含まれます。...

イメージングと免疫組織化学のための網膜ホールマウントの準備のために最適化されたプロトコル

ポストエンベッドイムノゴールド法は、特定の分子の細胞内局在を高解像度で分析するための最も効果的な方法の一つです。ここでは、網膜リボンシナプスにおけるグルタミン酸受容体を定量的に解析するためのプロトコールについて述べます。...

網膜リボンシナプスにおける膜受容体の高分解能定量的イムノゴールド分析

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網膜の低温電子顕微鏡セクション全体-マウント、および微小血管の免疫組織化学的可視化の低張性分離血管準備

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網膜神経節細胞の研究のためのメタノールベースのホールマウント調製

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このプロトコールは、透過型電子顕微鏡用のレチナールオルガノイドサンプルの最適化された精巧な調製手順を提供します。成熟した網膜オルガノイドのシナプス分析を含むアプリケーションに適しています。...

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マウス網膜凍結切片を調製し、光受容体上で免疫染色を実施するためのプロトコルが記載されている。この記事により、研究者は、保存状態の良い形態と高品質の免疫染色結果を備えたマウス網膜凍結切片を一貫して作製することができます。...

マウス網膜の凍結切片および免疫染色

網膜は、その層状構造全体で複雑な空間構成を示します。最新の空間トランスクリプトミクスおよびシーケンシング技術では、厚さ20μm&lt;組織切片が必要であり、網膜研究の適用性は限られています。この新鮮凍結凍結切片法は、平面的な空間的関係を維持しながら、マウス網膜の薄い 顔...

顔面 高次元空間分子解析のためのマウス網膜の凍結切片

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