真菌およびウイルス性病原体に対する宿主免疫の抗原特異的解析のための二重共刺激による全血アッセイ

私たちの研究は、集中治療室の患者の免疫モニタリングに焦点を当てています。一部の患者は、人工呼吸器中に重度のウイルス性肺炎を発症します。ウイルスの原因を分離するだけでなく、このビデオで紹介されているプロトコルを使用して局所的および全身的な免疫応答を特徴付け、免疫学的リスク因子を特定します。

単離された単核細胞に基づく従来の抗原特異的T細胞アッセイは、分析前の交絡因子の影響を非常に受けやすく、時間とリソースを大量に消費し、大量の血液を必要とします。このため、臨床研究における抗原特異的T細胞アッセイの実施や、予後バイオマーカーや診断バイオマーカーとしての臨床ルーチン使用には深刻な制限が生じています。私たちは、刺激ごとにわずか250マイクロの血液からさまざまなダウンストリームの読み出しに対応する、汎用性の高いイムノアッセイプロトコルを提示します。

これにより、その量が限られている場合や、いくつかの抗原をスクリーニングする必要がある場合でも、アプリケーションが可能になります。さらに、当社のアッセイは実施が容易で、いくつかの病原体に適しています。その汎用性と必要な血液量の少なさに加えて、私たちのプロトコルは、抗原誘導性Tヘルパー細胞応答に対して徹底的かつ特異的に最適化された刺激環境として使用されました。

これはデュアルコア刺激によって達成され、これにより、免疫抑制薬物療法や分析前の遅延などの交絡因子に対してもプロトコルがより堅牢になります。このプロトコルは、換気関連ウイルス性肺炎の患者の免疫モニタリングに使用されています。ヴュルツブルクとヒューストンの共同研究者は、サイトメガロウイルス特異的イムノアッセイの臨床翻訳に取り組んでいます。

さらに、このプロトコルを真菌の免疫病因に関する研究や、日和見感染症のマウスモデルにおける前臨床免疫療法の研究に使用しています。